目的：1.研究雌激素（17-β雌二醇,E2）對氧糖剝奪/復(fù)氧復(fù)糖（oxygen-glucose deprivation/reoxygenation, OGD/R）大鼠皮層神經(jīng)元的影響并探討其作用機(jī)制。2.研究E2對大鼠腦缺血再灌損傷的作用并初步觀察其作用機(jī)制。方法：選擇原代培養(yǎng)的Sprague-Dawley （SD）大鼠大腦皮層神經(jīng)元,通過測定LDH漏出率和MTT比色法檢測細(xì)胞活力作為評價指標(biāo),建立體外OGD/R損傷模型。在此基礎(chǔ)上,通過LDH漏出率的測定、MTT比色法、流式細(xì)胞術(shù)、Hoechst33342染色觀察E2對皮層神經(jīng)元OGD/R損傷的影響,RT-PCR、Western blotting、熒光活性測定和Fura-2/AM熒光探針標(biāo)記等方法探討Ca2+/calpain/caspase12介導(dǎo)的凋亡途徑在E：神經(jīng)保護(hù)中的作用。雌性SD大鼠行卵巢切除術(shù)排除內(nèi)源性E2的干預(yù),通過大腦中動脈線栓法建立腦缺血再灌損傷模型,通過神經(jīng)功能評分、TTC染色、腦梗塞體積計(jì)算評價模型穩(wěn)定性,TUNEL染色,免疫組織化學(xué)染色和熒光定量法測定caspase12活性,觀察E2對缺血再灌神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：111 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞
前言
第一章 E_2對大鼠皮層神經(jīng)元OGD/R損傷的影響
    1.1 材料與方法
        1.1.1 材料
        1.1.2 方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 神經(jīng)元培養(yǎng)與鑒定
        1.2.2 E_2受體蛋白的表達(dá)
        1.2.3 E_2對OGD/R損傷神經(jīng)元的影響
    1.3 討論
    1.4 結(jié)論
第二章 E_2對OGD/R損傷皮層神經(jīng)元的保護(hù)作用與Ca~(2+)/calpain/caspase 12凋亡通路的關(guān)系
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 E_2預(yù)處理對OGD/R損傷神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)Ca~(2+)濃度的影響
        2.2.2. E_2對Caspase 12、caspase 7和GRP 78 mRNA水平的影響
        2.2.3 E_2對OGD/R損傷神經(jīng)元calpain、caspase 12活性的影響
        2.2.4 抑制calpain活性對OGD/R損傷皮層神經(jīng)元的影響
    2.3 討論
    2.4 結(jié)論
第三章 雌二醇對大鼠腦缺血/再灌注損傷的保護(hù)作用
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 大鼠神經(jīng)功能評分
        3.2.2 TTC染色和大鼠腦梗塞體積比
        3.2.3 E_2對MCAO大鼠神經(jīng)元細(xì)胞形態(tài)的影響
        3.2.4 E_2對MCAO大鼠神經(jīng)元凋亡的影響
        3.2.5 蛋白含量測定
        3.2.6 E_2對MCAO大鼠procaspase 12蛋白表達(dá)和caspase 12活性的影響
    3.3 討論
    3.4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間主要的研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
博士論文
[1]肝細(xì)胞生長因子對神經(jīng)元缺氧/復(fù)氧損傷的影響及其分子機(jī)制研究[D]. 賀芳.中南大學(xué) 2007



本文編號：3630082