本文關(guān)鍵詞：星形膠質(zhì)細(xì)胞上酸敏感離子通道1a在顳葉癲癇發(fā)生中的作用研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：癲癇是神經(jīng)系統(tǒng)第二大常見疾病,最突出的特點(diǎn)為發(fā)作的反復(fù)性、不可預(yù)知性和藥物治療的長(zhǎng)期性。即使經(jīng)系統(tǒng)規(guī)范化抗癲癇藥物治療,仍有接近1/3的患者癲癇發(fā)作未能得到有效控制,并最終進(jìn)展成為難治性癲癇,給病人及家屬帶來了極大的痛苦,因此探索治愈癲癇的途徑已成為神經(jīng)病學(xué)領(lǐng)域的重要課題。目前癲癇的治療藥物主要靶向于控制發(fā)作癥狀,對(duì)慢性癲癇形成的病理生理過程難以發(fā)揮逆轉(zhuǎn)作用,因此難以達(dá)到治愈癲癇的目的。這種情況下,探索新的針對(duì)癲癇發(fā)生的藥物有可能為治愈癲癇帶來希望。大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和癲癇患者活檢證據(jù)表明,星形膠質(zhì)細(xì)胞的活化增生是癲癇發(fā)生中重要的病理改變。我們課題組前期研究發(fā)現(xiàn):星形膠質(zhì)細(xì)胞上的酸敏感離子通道1a(Acid Sensing Ion Channel 1a,ASIC1a)在癲癇慢性期中表達(dá)增多,這種變化可能和癲癇慢性期的病理進(jìn)展有關(guān),提示星形膠質(zhì)細(xì)胞上的ASIC1a可能參與癲癇發(fā)生的病理過程,并可能成為新的癲癇治療靶點(diǎn)。目的研究星形膠質(zhì)細(xì)胞上ASIC1a在小鼠顳葉癲癇發(fā)生中的作用。方法分別構(gòu)建攜帶有星形膠質(zhì)細(xì)胞特異性啟動(dòng)子GFAP的Asic1a基因sh-RNA及ORF(open reading frame)的重組腺相關(guān)病毒(recombined adeno-associated virus,r AAV)載體(r AAV-GFAP-GFP-ASIC1a-sh RNA,r AAV-GFAP-ASIC1a-GFP),經(jīng)過立體定向注射感染海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞,敲低野生(WT)型小鼠海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞上ASIC1a的表達(dá),以及恢復(fù)Asic1a基因敲除(KO)小鼠海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞上ASIC1a的表達(dá)。使用雄性8周齡C57遺傳背景的WT和Asic1a基因敲除型KO小鼠,采用氯化鋰-匹羅卡品腹腔注射建立小鼠顳葉癲癇發(fā)生模型,在小鼠氯化鋰-匹羅卡品腹腔注射誘導(dǎo)癲癇持續(xù)狀態(tài)后3-5天進(jìn)行病毒載體立體定向注射和電極安裝,觀察小鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)發(fā)作后12-19天和5-6周4組實(shí)驗(yàn)小鼠:WT干擾組(下調(diào)ASIC1a表達(dá))、WT對(duì)照組、KO型表達(dá)重建組(恢復(fù)ASIC1a表達(dá))和KO型對(duì)照組腦電圖發(fā)作和行為發(fā)作變化,結(jié)合免疫熒光染色方法進(jìn)行分析。結(jié)果1、小鼠海馬經(jīng)立體定向注射病毒后5周,超過90%的星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)綠色熒光蛋白(green fluorescence protein,GFP)。2、小鼠氯化鋰-匹羅卡品腹腔注射后12-19天(慢性癲癇發(fā)生潛伏期),敲低WT小鼠海馬星型膠質(zhì)細(xì)胞ASIC1a表達(dá)以及恢復(fù)ASIC1a KO小鼠海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞上ASIC1a的表達(dá)對(duì)小鼠行為學(xué)發(fā)作以及EEG癲癇樣放電無明顯影響。各組間潛伏期內(nèi)發(fā)作次數(shù)、發(fā)作程度Racine評(píng)分和平均自發(fā)發(fā)作持續(xù)時(shí)間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。WT干擾組和WT對(duì)照組腦電功率值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);KO型表達(dá)重建組和KO型對(duì)照組腦電功率值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);KO型表達(dá)重建組腦電功率值與WT型干擾組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。3、小鼠氯化鋰-匹羅卡品腹腔注射后5-6周(慢性癲癇發(fā)生期),WT鼠海馬星型膠質(zhì)細(xì)胞ASIC1a敲低組慢性自發(fā)性癲癇發(fā)作次數(shù)以及發(fā)作間期EEG放電強(qiáng)度明顯低于相應(yīng)對(duì)照組(P0.05)。KO小鼠海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞上ASIC1a表達(dá)重建組慢性自發(fā)性發(fā)作次數(shù)以及發(fā)作間期EEG放電強(qiáng)度較相應(yīng)對(duì)照組明顯增多(P0.05)。各組間行為發(fā)作等級(jí)和平均每次自發(fā)發(fā)作時(shí)間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論在小鼠顳葉癲癇發(fā)生模型中,特異性抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞上ASIC1a能夠明顯減少小鼠慢性自發(fā)性發(fā)作次數(shù),并減輕腦電圖發(fā)作強(qiáng)度,提示星形膠質(zhì)細(xì)胞上的ASIC1a可能為癲癇發(fā)生治療的新靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】：酸敏感離子通道1a rAAV病毒載體 星形膠質(zhì)細(xì)胞 癲癇發(fā)生
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R742.1
【目錄】：

• 縮略語表4-5
• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-13
• 文獻(xiàn)回顧13-23
• 實(shí)驗(yàn)一 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞特異性啟動(dòng)子和ASIC1a基因的r AAV病毒載體包裝與驗(yàn)證23-41
• 1 材料23-24
• 2 方法24-34
• 3 結(jié)果34-38
• 4 討論38-41
• 實(shí)驗(yàn)二 星形膠質(zhì)細(xì)胞上ASIC1a在癲癇發(fā)生中的作用研究41-61
• 引言41
• 1 材料41-43
• 2 方法43-51
• 3 結(jié)果51-58
• 4 討論58-61
• 小結(jié)61-62
• 參考文獻(xiàn)62-70
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷和研究成果70-71
• 致謝71

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1 項(xiàng)紅兵,田玉科;星形膠質(zhì)細(xì)胞與疼痛敏化調(diào)控[J];臨床麻醉學(xué)雜志;2003年09期

2 劉慧,王小軍,胡榮,楊忠,蔡文琴;星形膠質(zhì)細(xì)胞[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2004年01期

3 張敬軍;;星形膠質(zhì)細(xì)胞的研究[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2006年07期

4 陳彬;劉寬;王偉;;成年大鼠神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子表達(dá)的差異研究[J];卒中與神經(jīng)疾病;2007年05期

5 沈維高;何欣;王振江;;星形膠質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)功能及其與疾病的關(guān)系研究進(jìn)展[J];北華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2008年06期

6 ;英國(guó)科學(xué)家確定星形膠質(zhì)細(xì)胞新功能[J];中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥;2010年27期

7 靳哲;趙忠新;;星形膠質(zhì)細(xì)胞在癲癇發(fā)病中的作用研究[J];世界臨床藥物;2012年01期

8 李軍杰,張致身;短暫性腦缺血發(fā)作后海馬區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)學(xué)研究[J];首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1998年04期

9 解旭東,田國(guó)紅;星形膠質(zhì)細(xì)胞與癲癇[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;1999年01期

10 莫永炎,姜勇,陳瑗;腦星形膠質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)功能研究進(jìn)展[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2002年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉慶瑩;趙珠峰;朱長(zhǎng)庚;;星形膠質(zhì)細(xì)胞在癲癇復(fù)發(fā)中的作用[A];解剖學(xué)雜志——中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2002年年會(huì)文摘匯編[C];2002年

2 唐愛輝;王同飛;王世強(qiáng);;星形膠質(zhì)細(xì)胞鈣活動(dòng):腦細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)中的第二興奮系統(tǒng)?[A];中國(guó)神經(jīng)科學(xué)學(xué)會(huì)第六屆學(xué)術(shù)會(huì)議暨學(xué)會(huì)成立十周年慶祝大會(huì)論文摘要匯編[C];2005年

3 池美珠;陳超;錢燕;李劍敏;吳步猛;;產(chǎn)前重復(fù)激素治療對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)育的影響[A];浙江省圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

4 魏爾清;;半胱氨酰白三烯受體對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)作用[A];中國(guó)藥理學(xué)會(huì)第九次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨全國(guó)藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

5 吳建云;王鮮忠;王劍;諶劍波;范光麗;張家驊;;大腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)及鑒定[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)分會(huì)第十五次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

6 趙玉武;程曉娟;;星形膠質(zhì)細(xì)胞與腦水腫的形成[A];山東省2013年神經(jīng)內(nèi)科學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中國(guó)神經(jīng)免疫大會(huì)2013論文匯編[C];2013年

7 董其平;柴真;;谷氨酸對(duì)培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞的鈣活動(dòng)的影響[A];“基因、進(jìn)化與生理功能多樣性”海內(nèi)外學(xué)術(shù)研討會(huì)暨中國(guó)生理學(xué)會(huì)第七屆比較生理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2009年

8 曾俊;李康生;;柯薩奇病毒感染星形膠質(zhì)細(xì)胞及細(xì)胞因子變化研究[A];新發(fā)和再發(fā)傳染病防治熱點(diǎn)研討會(huì)論文集[C];2010年

9 鮑歡;徐曉云;顧曉波;徐霞紅;胡暉;;缺氧后水通道蛋白4在體外培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)變化的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

10 熊加祥;白云;宋敏;王艷艷;楊曉亞;;星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)免疫分子維持大腦免疫穩(wěn)態(tài)[A];中國(guó)神經(jīng)科學(xué)學(xué)會(huì)第六屆學(xué)術(shù)會(huì)議暨學(xué)會(huì)成立十周年慶祝大會(huì)論文摘要匯編[C];2005年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 記者 胡德榮;星形膠質(zhì)細(xì)胞由“天使”變“魔鬼”原因找到[N];健康報(bào);2012年

2 記者 劉海英;星形膠質(zhì)細(xì)胞可調(diào)節(jié)呼吸強(qiáng)度[N];科技日?qǐng)?bào);2010年

3 劉霞;腦內(nèi)星形膠質(zhì)細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)室培育成功[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

4 汪敏華;大腦星形膠質(zhì)細(xì)胞有兩種新功能[N];解放日?qǐng)?bào);2003年

5 吳一福;黃芪可調(diào)節(jié)星形膠質(zhì)細(xì)胞“時(shí)間模式”[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

6 南方日?qǐng)?bào)記者 曹斯　實(shí)習(xí)生 趙莞 張寧 通訊員 鄒瑩 張淼;用ATP對(duì)抗不快樂[N];南方日?qǐng)?bào);2013年

7 記者 班瑋;德國(guó)腦細(xì)胞再生研究取得新進(jìn)展[N];人民日?qǐng)?bào);2010年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 曾招;離子通道TRPM7調(diào)節(jié)細(xì)胞生理的分子機(jī)制研究[D];蘇州大學(xué);2014年

2 高蓓;視上核星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)急性腹腔高滲刺激引起的神經(jīng)元反應(yīng)的調(diào)節(jié)及其機(jī)制[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2008年

3 李學(xué)忠;星形膠質(zhì)細(xì)胞在脂多糖誘導(dǎo)的多巴胺神經(jīng)元損傷中的作用[D];蘇州大學(xué);2008年

4 曹旭;1，5-二咖啡�？鼘幩犷A(yù)處理對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞腦缺血模型的保護(hù)作用及機(jī)制的研究[D];華中科技大學(xué);2010年

5 黃曉佳;5-脂氧酶和半胱氨酰白三烯受體在大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞缺氧缺糖損傷中的作用[D];浙江大學(xué);2007年

6 王萍;星形膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)元細(xì)胞周期調(diào)控機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2006年

7 柳秀平;蛋白磷酸酯酶-2A對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移的促進(jìn)作用及其機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2012年

8 徐光錦;大鼠海馬腦片星形膠質(zhì)細(xì)胞線性膜電導(dǎo)及細(xì)胞間電偶聯(lián)特性的研究[D];華中科技大學(xué);2009年

9 李昕華;缺血預(yù)處理星形膠質(zhì)細(xì)胞神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2008年

10 張皓云;星形膠質(zhì)細(xì)胞在帕金森病神經(jīng)元鐵代謝紊亂中的調(diào)節(jié)作用研究[D];青島大學(xué);2013年

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1 龔佩佩;磷酸化MSK1在星形膠質(zhì)細(xì)胞炎癥活化過程中的作用的研究[D];南通大學(xué);2013年

2 何潔玉;糖皮質(zhì)激素對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞分泌GnRH的調(diào)控機(jī)制[D];西南大學(xué);2015年

3 張麗麗;脂肪基質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)分化為星形膠質(zhì)細(xì)胞過程中線粒體凋亡與自噬的關(guān)系[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

4 燕茹;高同型半胱氨酸血癥致ApoE~(-/-)小鼠腦血管、星形膠質(zhì)細(xì)胞及神經(jīng)元損傷作用研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2015年

5 高亞榮;NB-3介導(dǎo)神經(jīng)軸突接觸性抑制的信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制的體外培養(yǎng)研究[D];蘇州大學(xué);2015年

6 米鵬霞;P物質(zhì)對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞的活化作用及機(jī)制研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

7 楊志奇;小鼠皮層內(nèi)移植膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)及功能重建研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

8 陳雅南;敲除星形膠質(zhì)細(xì)胞的dicer對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響[D];杭州師范大學(xué);2015年

9 馬輝;星形膠質(zhì)細(xì)胞上酸敏感離子通道1a在顳葉癲癇發(fā)生中的作用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

10 張媛;飛秒脈沖激光誘導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞鈣波[D];華中科技大學(xué);2007年

  本文關(guān)鍵詞：星形膠質(zhì)細(xì)胞上酸敏感離子通道1a在顳葉癲癇發(fā)生中的作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：362104