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PEG-PELG水凝膠擔載的新劑型神經(jīng)生長因子的緩釋行為及組織相容性研究

發(fā)布時間:2017-05-13 05:00

  本文關鍵詞:PEG-PELG水凝膠擔載的新劑型神經(jīng)生長因子的緩釋行為及組織相容性研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:研究目的:聚乙二醇/聚(γ-乙基-L-谷氨酸酯)(PEG-PELG)水凝膠是一種新型的可以作為藥物緩釋載體的材料,本研究的目的是探究這種新型材料擔載神經(jīng)生長因子(Nerve growth factor,NGF)后的緩釋行為及組織相容性,為該材料的進一步研究及臨床應用提供依據(jù)。材料與方法:(1)選擇C57小鼠作為實驗動物,將PEG-PELG水凝膠注射到C57小鼠的皮下,分別在不同時間點觀察凝膠的降解情況,以研究其組織相容性及體內(nèi)降解情況。(2)在體外模擬生理條件下,分別在不同時間檢測神經(jīng)生長因子在37℃條件下從水凝膠中釋放的情況以研究新劑型NGF的釋放行為。(3)分別檢測第1、4、7和14天采集到的新劑型NGF在12孔板中緩釋的上清液,以PC12細胞為模型細胞,觀察其誘導PC12細胞分化的情況。(4)檢測上述處理后的PC12細胞ERK蛋白及磷酸化ERK蛋白水平以驗證凝膠緩釋的NGF的生物活性。結(jié)果:(1)聚乙二醇/聚(γ-乙基-L-谷氨酸酯)(PEG-PELG)注射到小鼠皮下21d后完全降解,與周圍組織無明顯炎性黏連。將PEG-PELG的降解情況繪制圖表,可見其降解幅度平滑適中。(2)夾心ELISA檢測200ng/m L的新劑型NGF在不同時間點釋放NGF到培養(yǎng)基中的劑量,檢測第1天,NGF緩釋量最大,約18ng/m L;從檢測第2天開始,NGF緩釋量開始下降,但直到檢測第7天,NGF緩釋劑量仍可維持在10ng/m L左右;檢測第14天,NGF濃度約為8ng/m L。(3)體外檢測新劑型NGF的生物活性規(guī)律結(jié)果:500ng/m L的PEG-PELG-NGF,在材料緩釋的第14天所釋放出來的NGF仍然可以誘導細胞發(fā)生分化。(4)新劑型NGF水凝膠可長期緩釋出可以有效促使PC12細胞中ERK磷酸化的具有良好生物活性的NGF。結(jié)論:(1)PEG-PELG水凝膠擔載的新劑型NGF具有較好的組織相容性;(2)新劑型NGF具有較好的緩釋能力,緩釋曲線平滑而持久;(3)新劑型NGF可長期緩釋出具有較好生物活性的神經(jīng)生長因子。
【關鍵詞】:PEG-PELG水凝膠 新劑型NGF PC12細胞 緩釋
【學位授予單位】:吉林大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R745
【目錄】:
  • 中文摘要4-6
  • Abstract6-11
  • 相關縮寫說明11-12
  • 第1章 引言12-15
  • 1.1 研究背景12
  • 1.2 研究現(xiàn)狀12-14
  • 1.3 研究目的及意義14-15
  • 第2章 資料與方法15-17
  • 2.1 研究對象及試劑15
  • 2.2 研究方法15-17
  • 2.2.1 制備新劑型NGF15
  • 2.2.2 PEG-PELG水凝膠的體內(nèi)降解和組織相容性的驗證15
  • 2.2.3 新劑型NGF的體外釋放行為研究15-16
  • 2.2.4 體外檢測新劑型NGF水凝膠所釋放NGF的生物活性16
  • 2.2.5 PC12細胞ERK及磷酸化ERK水平的檢測16-17
  • 第3章 結(jié)果17-22
  • 3.1 PEG-PELG水凝膠的體內(nèi)降解和組織相容性的研究結(jié)果17-18
  • 3.2 新劑型NGF的體外緩釋行為的研究結(jié)果18-19
  • 3.3 體外檢測新劑型 NGF 水凝膠所釋放 NGF 生物活性的結(jié)果19-20
  • 3.4 PC12細胞ERK及磷酸化ERK水平的檢測結(jié)果20-22
  • 第4章 討論22-28
  • 第5章 結(jié)論28-29
  • 參考文獻29-32
  • 綜述32-53
  • 參考文獻48-53
  • 作者簡介53-54
  • 在校期間取得的主要科研成果54-55
  • 致謝55

【參考文獻】

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  本文關鍵詞:PEG-PELG水凝膠擔載的新劑型神經(jīng)生長因子的緩釋行為及組織相容性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:361581

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