本研究旨在探討β1，3-N-乙酰氨基葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶8（β3Gn-T8）對(duì)膠質(zhì)瘤侵襲及增殖的影響。通過對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞惡性表型相關(guān)因子、成瘤模型及臨床標(biāo)本的相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)分析，來了解β3Gn-T8在膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展中扮演的重要作用，為治療人惡性膠質(zhì)瘤提供一個(gè)新的有效的輔助分子治療方法。目的：（1）探討糖基轉(zhuǎn)移酶β3Gn-T8在人腦膠質(zhì)瘤組織與正常腦組織中表達(dá)的差異。（2）在人膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞水平探討糖基轉(zhuǎn)移酶β3Gn-T8對(duì)膠質(zhì)瘤侵襲及增殖能力的影響，以及β3Gn-T8與MMP-2的關(guān)系。（3）觀察糖基轉(zhuǎn)移酶β3Gn-T8對(duì)膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞裸鼠皮下種植瘤生長(zhǎng)的影響。（4）探討糖基轉(zhuǎn)移酶β3Gn-T8對(duì)腫瘤細(xì)胞多聚乳糖胺鏈的影響。方法：（1）運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法，在人腦星形膠質(zhì)瘤和正常腦組織的石蠟標(biāo)本上，分別檢測(cè)β3Gn-T8的表達(dá)情況并分析其差異。收集相關(guān)膠質(zhì)瘤組織標(biāo)本的臨床病理參數(shù)，通過統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析膠質(zhì)瘤β3Gn-T8表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系。（2）將β3Gn-T8的真核表達(dá)正義載體pEGFP-C1-T8及空載體pEGFP-C1、RNA干擾載體pSilenCircle-T8Si及對(duì)照載... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省211工程院校

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

糖鏈結(jié)構(gòu)的細(xì)胞機(jī)制[6]

4圖2 β3GnT家族各成員合成結(jié)構(gòu)圖[15]大量研究表明，細(xì)胞惡變過程中某些糖鏈加工酶基因表達(dá)上調(diào)或下調(diào)，將導(dǎo)致細(xì)胞合成的糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。腫瘤糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)異常與腫瘤的生物學(xué)行為，如惡性轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)移與浸潤(rùn)等密切相關(guān)[18]。N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶（GlcNAcT或GnT）是一類重要的也是被研究得較多的糖基轉(zhuǎn)移酶，它是一組催化轉(zhuǎn)移GlcNAc的酶，參與天冬酰胺連接型（N-）聚糖或絲氨酸/蘇氨酸連接型（O-）聚糖的合成加工[19]。有研究報(bào)道，GlcNAc-TV與腫瘤的進(jìn)展密切相關(guān)[20]。GnTV與細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移間存在相關(guān)性，它可以通過酪氨酸磷酸酶受體蛋白，活化表皮生長(zhǎng)因子介導(dǎo)的遷移信號(hào)從而促進(jìn)細(xì)胞遷移[21]。近年來糖鏈結(jié)構(gòu)與疾病關(guān)系的研究已引起重視。對(duì)糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)的測(cè)定已成為臨床實(shí)驗(yàn)室診斷疾病，尤其是腫瘤診斷的一個(gè)新的方向。糖鏈結(jié)構(gòu)分析方法近年發(fā)展很快

1. β3Gn-T8 蛋白在人腦星形膠質(zhì)瘤組織和正常腦組織中的表達(dá)光學(xué)顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn) β3Gn-T8 蛋白在人腦星形膠質(zhì)瘤細(xì)胞和正常腦組織細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中均有表達(dá)，呈棕黃色顆粒狀（見圖1）。免疫組織化學(xué)方法結(jié)果顯示，42例星形膠質(zhì)瘤組織中有14例 β3Gn-T8 低表達(dá)，23例高表達(dá)，而另外5例則為陰性表達(dá)，β3Gn-T8 在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)陽性率為88.10﹪；在8例正常腦組織中僅1例 β3Gn-T8 低表達(dá)，其余都呈陰性表達(dá)，故正常腦組織中 β3Gn-T8 的表達(dá)陽性率僅為12.5﹪。兩者相比具有顯著差異（P﹤0.01）。圖1 正常腦組織和星形膠質(zhì)瘤組織中β3Gn-T8的表達(dá)（A）正常腦組織（B）星形膠質(zhì)瘤組織（免疫組織化學(xué)SP法 ×400）Fig.1 Expression of β3Gn-T8 in astroglioma and normal brain tissues. (A) normal braintissues (B) astroglioma (immunohistochemistry SP method ×400)2. β3Gn-T8 蛋白在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)與膠質(zhì)瘤患者的臨床病理參數(shù)的關(guān)系我們又進(jìn)行了 β3Gn-T8 的表達(dá)強(qiáng)度與42例星形膠質(zhì)瘤患者的臨床病理參數(shù)相關(guān)關(guān)系分析。分析結(jié)果顯示，膠質(zhì)瘤組織 β3Gn-T8 的表達(dá)與患者的年齡和性別無關(guān)（P﹥0.05），而與膠質(zhì)瘤臨床分級(jí)正相關(guān)（P﹤0.05）（圖2）。在臨床分級(jí)中

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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