小鼠腦缺血再灌注模型的建立及C3aR、C5aR拮抗劑對于小鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用研究
發(fā)布時間:2022-01-11 01:42
第一部分小鼠腦缺血再灌注模型的建立目的:建立一種穩(wěn)定的、可重復(fù)的局灶性腦缺血再灌注動物模型。方法:采用插線法建立小鼠局灶性腦缺血再灌注動物模型。栓塞時間為60分鐘。手術(shù)后24小時分別對各組小鼠進(jìn)行神經(jīng)功能評分。觀察模型的可靠性。結(jié)果:模型組出現(xiàn)神經(jīng)功能障礙,腦組織缺血梗死。結(jié)論:成功建立了小鼠腦缺血再灌注模型,適合用于腦缺再灌注損傷的研究。第二部分C3aR、C5aR拮抗劑對于小鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用研究目的:我們通過抑制C3a、C5a在受體水平的活性,調(diào)查C3a、C5a受體在缺血再灌注損傷中的作用。探究C3aR、C5aR抑制劑在腦缺血再灌注中對損傷的治療作用。方法:使用C3aR、C5aR拮抗劑及制造梗死模型對小鼠大腦中動脈進(jìn)行臨時閉塞。24小時后評估缺血再灌注損傷的結(jié)果,完整大腦2mm冠狀厚片行2%氯化-2,3,5-三苯基四氮唑(TTC)染色,計算梗死體積。結(jié)果:使用C3aR、C5aR拮抗劑治療的動物神經(jīng)功能有所改善、梗死體積顯著減少。結(jié)論:研究結(jié)果證明,C3aR、C5aR拮抗劑顯著改變?nèi)毖俟嘧p傷程度。第三部分C3a、C5a受體缺陷對于小鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用研究目的:...
【文章來源】:中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
栓線制備
carotidartery,ECA)、頸內(nèi)動脈(Internal carotid artery,ICA)。分離ICA 至近顱底,結(jié)扎ICA 顱外段的唯一分支翼腭動脈(Pterygopalatine artery,PPA)。在ECA 的近心端設(shè)置活結(jié),結(jié)扎ECA、CCA遠(yuǎn)心端,夾閉和ICA(血管分離及結(jié)扎見圖1-2)。圖1-2 結(jié)扎頸外動脈2.1.2.4 插線:在頸總動脈結(jié)扎部位遠(yuǎn)心端剪口,插入制備好的線段,送入栓線至CCA分叉處,然后翻轉(zhuǎn)方向,使ECA與ICA盡量成為平角,以利于栓線通過;將栓線向內(nèi)上方緩慢推進(jìn)。適當(dāng)調(diào)整栓線插入方向,插入長度為10~12mm(從CCA分叉處計算),微遇阻力時即停止。松開CCA上的微動脈夾,縫合皮膚,將栓線尾部略露出皮膚,并固定。上述過程一般10~15 min。術(shù)后讓小鼠自然清醒
解放軍醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文16圖1-3 頸總動脈插線2.1.2.5 記錄插線成功時間點(不包括縫合皮膚的時間)2.1.2.6 模型組術(shù)前45分鐘,按照150mg/kg注射PBS、C3aR抑制劑、C5aR抑制劑。2.1.3 完成再灌注:在栓線置入60min后再次麻醉小鼠,切開皮膚。將略路出皮膚的栓線抽出,抽出過程需緩慢進(jìn)行,使大腦中動脈血供恢復(fù)。當(dāng)栓線經(jīng)處理過的頭端,因其頭端在栓線拔出過程中,經(jīng)過在ECA上的結(jié)扎線時,會遇到阻力,此時,停止拔線,剪掉栓線露出皮膚的末端。小鼠清醒后可以自由進(jìn)食、進(jìn)水。假手術(shù)組小鼠除不用插線外,其他處理同實驗組。2.1.4 MCAO模型剔除標(biāo)準(zhǔn):術(shù)后無明顯腦梗死癥狀(無明顯神經(jīng)功能缺損癥狀)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]腦缺血動物模型的研究進(jìn)展[J]. 鄒永杰,崔高宇,馮華. 國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志. 2012(05)
[2]補體級聯(lián)反應(yīng)在腦缺血/再灌注炎癥損傷中的作用[J]. 鮮盡紅,何莉,汪正清. 創(chuàng)傷外科雜志. 2011(06)
[3]過敏毒素C3a與前列腺增生癥合并組織炎癥的關(guān)系[J]. 謝亮,程樹林,李一竹,柳良仁,韓平,陳妮,魏強,周橋. 四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2011(05)
[4]補體C5a、C5a受體及其拮抗劑的研究進(jìn)展[J]. 王會會,陳國江,黎燕,石艷春. 國際藥學(xué)研究雜志. 2010(03)
[5]局灶性腦缺血動物模型的制備[J]. 馬寧,蔡繼福,姜衛(wèi)劍. 神經(jīng)損傷與功能重建. 2010(01)
[6]分子佐劑小鼠補體C3d基因的克隆與序列分析[J]. 孫梅芹,趙連三,陳守春,王松,周陶友,唐紅,陳毅榮,閆娟. 四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2003(02)
[7]C3d及荷C3d免疫復(fù)合物的測定與意義[J]. 虞偉,俞小忠,武建國. 免疫學(xué)雜志. 1997(04)
[8]實驗性局灶性腦缺血再灌注動物模型的改進(jìn)及評價[J]. 劉亢丁,蘇志強,李毅平,饒明俐. 中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志. 1997(02)
[9]大鼠局灶腦缺血再灌注模型的研究[J]. 楊世方,閔寶珍,周錫英. 中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志. 1996(01)
[10]栓線法大鼠局灶性腦缺血模型的研究[J]. 陳春富,李勁松. 中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志. 1996(01)
碩士論文
[1]抗補體C5a單克隆抗體對炎癥性腸病的治療作用研究[D]. 高旭東.天津大學(xué) 2009
本文編號:3581828
【文章來源】:中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
栓線制備
carotidartery,ECA)、頸內(nèi)動脈(Internal carotid artery,ICA)。分離ICA 至近顱底,結(jié)扎ICA 顱外段的唯一分支翼腭動脈(Pterygopalatine artery,PPA)。在ECA 的近心端設(shè)置活結(jié),結(jié)扎ECA、CCA遠(yuǎn)心端,夾閉和ICA(血管分離及結(jié)扎見圖1-2)。圖1-2 結(jié)扎頸外動脈2.1.2.4 插線:在頸總動脈結(jié)扎部位遠(yuǎn)心端剪口,插入制備好的線段,送入栓線至CCA分叉處,然后翻轉(zhuǎn)方向,使ECA與ICA盡量成為平角,以利于栓線通過;將栓線向內(nèi)上方緩慢推進(jìn)。適當(dāng)調(diào)整栓線插入方向,插入長度為10~12mm(從CCA分叉處計算),微遇阻力時即停止。松開CCA上的微動脈夾,縫合皮膚,將栓線尾部略露出皮膚,并固定。上述過程一般10~15 min。術(shù)后讓小鼠自然清醒
解放軍醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文16圖1-3 頸總動脈插線2.1.2.5 記錄插線成功時間點(不包括縫合皮膚的時間)2.1.2.6 模型組術(shù)前45分鐘,按照150mg/kg注射PBS、C3aR抑制劑、C5aR抑制劑。2.1.3 完成再灌注:在栓線置入60min后再次麻醉小鼠,切開皮膚。將略路出皮膚的栓線抽出,抽出過程需緩慢進(jìn)行,使大腦中動脈血供恢復(fù)。當(dāng)栓線經(jīng)處理過的頭端,因其頭端在栓線拔出過程中,經(jīng)過在ECA上的結(jié)扎線時,會遇到阻力,此時,停止拔線,剪掉栓線露出皮膚的末端。小鼠清醒后可以自由進(jìn)食、進(jìn)水。假手術(shù)組小鼠除不用插線外,其他處理同實驗組。2.1.4 MCAO模型剔除標(biāo)準(zhǔn):術(shù)后無明顯腦梗死癥狀(無明顯神經(jīng)功能缺損癥狀)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]腦缺血動物模型的研究進(jìn)展[J]. 鄒永杰,崔高宇,馮華. 國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志. 2012(05)
[2]補體級聯(lián)反應(yīng)在腦缺血/再灌注炎癥損傷中的作用[J]. 鮮盡紅,何莉,汪正清. 創(chuàng)傷外科雜志. 2011(06)
[3]過敏毒素C3a與前列腺增生癥合并組織炎癥的關(guān)系[J]. 謝亮,程樹林,李一竹,柳良仁,韓平,陳妮,魏強,周橋. 四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2011(05)
[4]補體C5a、C5a受體及其拮抗劑的研究進(jìn)展[J]. 王會會,陳國江,黎燕,石艷春. 國際藥學(xué)研究雜志. 2010(03)
[5]局灶性腦缺血動物模型的制備[J]. 馬寧,蔡繼福,姜衛(wèi)劍. 神經(jīng)損傷與功能重建. 2010(01)
[6]分子佐劑小鼠補體C3d基因的克隆與序列分析[J]. 孫梅芹,趙連三,陳守春,王松,周陶友,唐紅,陳毅榮,閆娟. 四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2003(02)
[7]C3d及荷C3d免疫復(fù)合物的測定與意義[J]. 虞偉,俞小忠,武建國. 免疫學(xué)雜志. 1997(04)
[8]實驗性局灶性腦缺血再灌注動物模型的改進(jìn)及評價[J]. 劉亢丁,蘇志強,李毅平,饒明俐. 中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志. 1997(02)
[9]大鼠局灶腦缺血再灌注模型的研究[J]. 楊世方,閔寶珍,周錫英. 中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志. 1996(01)
[10]栓線法大鼠局灶性腦缺血模型的研究[J]. 陳春富,李勁松. 中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志. 1996(01)
碩士論文
[1]抗補體C5a單克隆抗體對炎癥性腸病的治療作用研究[D]. 高旭東.天津大學(xué) 2009
本文編號:3581828
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