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SDF-1/CXCR4信號(hào)通路在誘導(dǎo)內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞治療帕金森病中的作用

發(fā)布時(shí)間:2022-01-06 22:34
  目的(1)探討神經(jīng)干細(xì)胞移植對(duì)帕金森病的治療作用。(2)以SDF-1/CXCR4信號(hào)軸為切入點(diǎn),研究神經(jīng)干細(xì)胞移植治療PD的作用,并初步闡明其作用。實(shí)驗(yàn)方法(1)解剖分離E14d大鼠胚胎腹側(cè)中腦神經(jīng)干細(xì)胞,以無血清完全神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng),觀察其增殖、分化。并對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行干細(xì)胞特性和分化潛能的免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定。(2)健康成年大鼠的黑質(zhì)、內(nèi)側(cè)前腦束部位立體定向注射6-羥多巴胺(6-OHDA),建立帕金森病的大鼠模型。(3)將建立成功的PD大鼠隨機(jī)分為四組:神經(jīng)干細(xì)胞移植組;神經(jīng)干細(xì)胞移植+AMD3100組;AMD3100組(假手術(shù));對(duì)照組(假手術(shù)不移植神經(jīng)干細(xì)胞也不注射AMD3100);(4)取生長狀態(tài)良好的培養(yǎng)第3代的神經(jīng)干細(xì)胞,采用立體定向技術(shù)移植到神經(jīng)干細(xì)胞移植組和神經(jīng)干細(xì)胞移植+AMD3100組PD大鼠模型的黑質(zhì)、內(nèi)側(cè)前腦束部位。(5)移植后每天給神經(jīng)干細(xì)胞移植+AMD3100組和AMD3100組腹腔注射SDF-1/CXCR4阻斷劑AMD3100。(6)行為學(xué)觀察:移植神經(jīng)干細(xì)胞后1W,2W,3W,4W分別腹腔注射APO誘導(dǎo)大鼠旋轉(zhuǎn),觀察各組PD大鼠模型的行為學(xué)改善情況。(... 

【文章來源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】:69 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
英文縮寫一覽表
引言
1. 材料
    1.1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.2. 主要儀器設(shè)備
    1.3. 主要試劑
    1.4. 主要溶液的配制
2. 方法
    2.1. 神經(jīng)干細(xì)胞的原代培養(yǎng)
    2.2. 神經(jīng)干細(xì)胞的傳代培養(yǎng)
    2.3. 神經(jīng)干細(xì)胞的巢蛋白鑒定
    2.4. 大鼠胚胎mNSCs的體外誘導(dǎo)分化
    2.5. 大鼠PD模型的建立
    2.6. 神經(jīng)干細(xì)胞移植治療PD大鼠模型
    2.7. 行為學(xué)檢測(cè)
    2.8. 免疫熒光檢測(cè)
    2.9. 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3. 結(jié)果
    3.1. 大鼠胚胎mNSCs的分離培養(yǎng)
    3.2. 神經(jīng)干細(xì)胞Nestin免疫熒光標(biāo)記
    3.3. 神經(jīng)干細(xì)胞的傳代培養(yǎng)
    3.4. 神經(jīng)干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化
    3.5. 大鼠胚胎中腦多巴胺神經(jīng)元的鑒定
    3.6. 帕金森病大鼠模型的行為學(xué)特征
    3.7. 神經(jīng)干細(xì)胞移植前后PD大鼠旋轉(zhuǎn)行為檢測(cè)結(jié)果
    3.8. Nestin,SDF-l和CXCR4大鼠腦切片免疫突光結(jié)果
4. 討論
    4.1. 神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果分析討論
    4.2. 帕金森病模型的建立結(jié)果分析討論
    4.3. 帕金森病的神經(jīng)千細(xì)胞移植治療結(jié)果分析討論
    4.4. 免疫熒光結(jié)果分析討論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
碩士期間發(fā)表論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3573284

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