目的在最新的研究中表明,IKBKE（inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase subunit epsilon）在多種類型的惡性腫瘤中過(guò)度表達(dá)。我們的研究也已經(jīng)證實(shí),IKBKE在人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中高表達(dá),并且與人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的級(jí)別呈正相關(guān),沉默IKBKE蛋白質(zhì)的表達(dá),可以明顯抑制人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移能力。在本次實(shí)驗(yàn)中,我們通過(guò)沉默/過(guò)表達(dá)IKBKE、YAP1及miR-Let-7b/i的表達(dá),來(lái)探討IKBKE通過(guò)IKBKE/YAP1/miR-Let-7b/i環(huán)路途徑調(diào)控人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的惡性進(jìn)展的影響。方法我們選取人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系U87-MG細(xì)胞系和LN-229細(xì)胞系用于本實(shí)驗(yàn)的研究。首先構(gòu)建IKBKE shRNA慢病毒。以IKBKE shRNA慢病毒轉(zhuǎn)染U87-MG細(xì)胞株及LN-229細(xì)胞株,來(lái)下調(diào)細(xì)胞中IKBKE蛋白的表達(dá)水平。通過(guò)RT-PCR及Western blot方法來(lái)檢測(cè)細(xì)胞中IKBKE mRNA及其蛋白水平的表達(dá);通過(guò)CCK-8的方法來(lái)比較,對(duì)照組、無(wú)義序列組及沉默IKBKE基因組細(xì)胞的增值能力的改變;通過(guò)Tr... 

【文章來(lái)源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：88 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

轉(zhuǎn)染IKBKEshRNA慢病毒后各處理組IKBKE蛋白表達(dá)含量

圖 1. 2 轉(zhuǎn)染 IKBKE shRNA 慢病毒后各處理組 IKBKE mRNA 表達(dá)含量*P<0.05，**P<0.01，***P<0.0011.3.2 敲低 IKBKE 基因能夠抑制膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞增值能力根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，明確細(xì)胞 IKBKE 基因敲低效果后，取狀態(tài)良好對(duì)照組細(xì)胞、無(wú)義序列組細(xì)胞及 shIKBKE 組細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞增值實(shí)驗(yàn)，同一時(shí)間段連續(xù)測(cè)量 5天后收集所得 OD 值進(jìn)行處理分析；實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組細(xì)胞、無(wú)義序列組細(xì)胞相比較，shIKBKE 組細(xì)胞，增值曲線明顯平緩，細(xì)胞增值能力顯著降低，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖 1. 3

?咼饗云交海?赴?鮒的芰ο災(zāi)?檔停?笛榻峁?繽?1. 3圖 1. 3 敲低 IKBKE 基因后 U87-MG、LN229 細(xì)胞增值曲線圖1.3.2 敲低 IKBKE 基因能夠抑制膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞遷移及侵


本文編號(hào)：3562374