發(fā)布時(shí)間：2017-05-11 01:07

  本文關(guān)鍵詞：HOXA5調(diào)控膠質(zhì)瘤干細(xì)胞干性和替莫唑胺耐藥的作用及機(jī)制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見(jiàn)的腫瘤,其中級(jí)別最高的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤又因其惡性程度高,耐藥性強(qiáng)等特性而導(dǎo)致患者預(yù)后極差。近年研究表明,腫瘤干細(xì)胞是腫瘤發(fā)生復(fù)發(fā)、侵襲及治療抵抗的根源,因此研究膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的“干性”維持及其耐藥機(jī)制將為膠質(zhì)瘤特別是膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的臨床治療提供新的思路和方法。HOX家族是生物體內(nèi)一類專門調(diào)控生物形成的基因。HOXA5基因位于人類第7號(hào)染色體上,集中表達(dá)于頭頸部組織,在人體胚胎發(fā)育,成體干細(xì)胞分化過(guò)程中發(fā)揮重要作用。HOXA5的異常表達(dá)已在乳腺癌,肺癌和淋巴瘤等腫瘤中得到了證實(shí),然而,HOXA5在膠質(zhì)瘤中作用如何,是否參與了腫瘤干細(xì)胞“干性”及耐藥調(diào)控仍需進(jìn)一步研究。本研究通過(guò)改變HOXA5在膠質(zhì)瘤中的表達(dá),研究了其與膠質(zhì)瘤干性維持的關(guān)系;檢測(cè)HOXA5下游分子PTPRZ1的變化,探討了HOXA5對(duì)膠質(zhì)瘤干性調(diào)控的機(jī)制;在膠質(zhì)瘤臨床標(biāo)本病例中分析了HOXA5與膠質(zhì)瘤干性標(biāo)記物的共定位、相關(guān)性及與膠質(zhì)瘤級(jí)別和患者預(yù)后的關(guān)系;檢測(cè)NF-k B通路關(guān)鍵分子P65的表達(dá)以及替莫唑胺IC50值的變化,探討了HOXA5與膠質(zhì)瘤細(xì)胞耐藥性的關(guān)系;最后通過(guò)大規(guī)模臨床樣本分析了替莫唑胺耐藥相關(guān)基因MGMT在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤分子分型中的作用和預(yù)后研究。主要結(jié)果與結(jié)論如下:1.HOXA5在膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中高表達(dá),且隨膠質(zhì)瘤級(jí)別的增加而升高(1)我們?cè)?09例膠質(zhì)瘤臨床標(biāo)本中通過(guò)免疫組化的方法檢測(cè)HOXA5的表達(dá),發(fā)現(xiàn)隨著膠質(zhì)瘤級(jí)別增加,HOXA5表達(dá)也逐漸增高,并通過(guò)不同級(jí)別的膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U87,U251,CHG5,HEB及原代細(xì)胞091214,090116驗(yàn)證了上述結(jié)論。(2)從膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U87和膠質(zhì)瘤原代細(xì)胞091214中分選腫瘤干細(xì)胞和非腫瘤干細(xì)胞,檢測(cè)了HOXA5的表達(dá),發(fā)現(xiàn)在蛋白水平和m RNA水平HOXA5均在腫瘤干細(xì)胞中高表達(dá),而后通過(guò)免疫熒光的雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)和分析TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)發(fā)現(xiàn)HOXA5與干性標(biāo)記物CD133,OLIG2等具有共定位情況,且兩者的表達(dá)呈現(xiàn)正相關(guān)性趨勢(shì)。2.HOXA5通過(guò)調(diào)控PTPRZ1而維持膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的“干性”(1)過(guò)表達(dá)HOXA5后,膠質(zhì)瘤細(xì)胞干性增強(qiáng),其中SOX2,CD133等干性標(biāo)記物表達(dá)增加,而膠質(zhì)瘤細(xì)胞的成球能力和克隆形成能力等反映其干性的指標(biāo)也都隨之增強(qiáng)。(2)敲低HOXA5的表達(dá)后,膠質(zhì)瘤細(xì)胞的成球能力,克隆形成能力以及SOX2,CD133等干性基因的表達(dá)也隨之減弱。(3)課題組前期發(fā)現(xiàn)PTPRZ1是調(diào)控膠質(zhì)瘤干細(xì)胞干性的關(guān)鍵分子,我們進(jìn)一步通過(guò)數(shù)據(jù)庫(kù)分析發(fā)現(xiàn)HOXA5在PTPRZ1啟動(dòng)子區(qū)域有兩個(gè)可能的結(jié)合位點(diǎn),通過(guò)Luciference實(shí)驗(yàn)和Chi P實(shí)驗(yàn)證實(shí)HOXA5通過(guò)第一個(gè)啟動(dòng)子區(qū)域結(jié)合PTPRZ1并調(diào)控PTPRZ1的表達(dá),此結(jié)果也通過(guò)過(guò)表達(dá)或者敲低HOXA5后檢測(cè)PTPRZ1的變化得以證實(shí)。3.HOXA5通過(guò)激活NF-KB通路調(diào)控膠質(zhì)瘤細(xì)胞的耐藥且影響膠質(zhì)瘤患者預(yù)后(1)敲低HOXA5表達(dá)后膠質(zhì)瘤細(xì)胞的替莫唑胺IC50值隨之降低,而過(guò)表達(dá)HOXA5后膠質(zhì)瘤細(xì)胞的替莫唑胺IC50值隨之增加。(2)HOXA5表達(dá)的改變影響了NF-kB通路上關(guān)鍵分子P65的表達(dá),兩者的變化趨勢(shì)一致。(3)在我院臨床標(biāo)本和TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)中發(fā)現(xiàn)HOXA5表達(dá)越高,患者總生存期越差。(4)高表達(dá)HOXA5的細(xì)胞所形成的移植瘤裸鼠生存期顯著短于對(duì)照組。4.替莫唑胺耐藥關(guān)鍵分子MGMT的表達(dá)與膠質(zhì)瘤分子分型密切相關(guān),且影響患者預(yù)后(1)MGMT在Proneural-like型膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中低表達(dá)。(2)MGMT表達(dá)與Proneural-like型膠質(zhì)母細(xì)胞瘤標(biāo)記物P53呈負(fù)相關(guān)。(3)MGMT低表達(dá)的Proneural-like型膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者預(yù)后較好。(4)在TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)中Proneural型MGMT表達(dá)低,預(yù)后更好綜上所述,HOXA5可以通過(guò)調(diào)控PTPRZ1的表達(dá)來(lái)調(diào)控膠質(zhì)瘤細(xì)胞的干性,并且可以通過(guò)NF-KB通路來(lái)影響膠質(zhì)瘤細(xì)胞的耐藥性,聯(lián)合MGMT在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的分子分型和預(yù)后預(yù)測(cè)中發(fā)揮作用。因此,靶向HOXA5可能為臨床膠質(zhì)瘤的治療提供新思路和新靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】：膠質(zhì)瘤干細(xì)胞 HOXA5 PTPRZ1 耐藥性 MGMT NF-KB
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.41
【目錄】：

• 縮略語(yǔ)表4-6
• 英文摘要6-9
• 中文摘要9-11
• 第一章 前言11-13
• 第二章 HOXA5在膠質(zhì)瘤及膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中的表達(dá)及意義13-29
• 2.1 材料與方法13-22
• 2.2 結(jié)果22-28
• 2.3 討論28
• 2.4 小結(jié)28-29
• 第三章 HOXA5通過(guò)調(diào)控PTPRZ1維持膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的“干性”29-46
• 3.1 材料與方法29-38
• 3.2 結(jié)果38-44
• 3.3 討論44-45
• 3.4 小結(jié)45-46
• 第四章 HOXA5對(duì)膠質(zhì)瘤替莫唑胺耐藥及患者預(yù)后的影響46-55
• 4.1 材料與方法46-48
• 4.2 結(jié)果48-53
• 4.3 討論53
• 4.4 小結(jié)53-55
• 第五章 MGMT與膠質(zhì)母細(xì)胞瘤分子亞型及患者預(yù)后的關(guān)系55-63
• 5.1 材料與方法55-56
• 5.2 結(jié)果56-61
• 5.3 討論61-62
• 5.4 小結(jié)62-63
• 全文總結(jié)63-64
• 參考文獻(xiàn)64-70
• 文獻(xiàn)綜述 膠質(zhì)瘤干細(xì)胞在膠質(zhì)瘤耐藥性中的作用70-76
• 參考文獻(xiàn)73-76
• 攻讀碩士期間撰寫和發(fā)表論文情況76-77
• 致謝77-78

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2 徐俊杰;于洪泉;趙偉;金宏;溫娜;齊玲;劉興吉;;西蘭花多肽對(duì)C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡作用[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年01期

3 仝海波,江澄川,唐鎮(zhèn)生,金一尊;膠質(zhì)瘤細(xì)胞化學(xué)增敏作用實(shí)驗(yàn)研究[J];山西臨床醫(yī)藥;2000年07期

4 李嗍,王楓,繆珊,駱文靜;過(guò)量鋅對(duì)鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞體外生長(zhǎng)的影響[J];解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2001年04期

5 梁一鳴,郭國(guó)慶,鄭少俊,沈偉哉;膠質(zhì)瘤血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)的調(diào)節(jié)[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;2001年02期

6 曲元明,韓韜,李桂林,王成偉;血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體對(duì)膠質(zhì)瘤生長(zhǎng)的影響[J];山東醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2001年02期

7 黃強(qiáng),董軍;膠質(zhì)瘤的分子外科治療[J];中國(guó)微侵襲神經(jīng)外科雜志;2001年04期

8 葉明,周岱,周幽心,王瑋,傅建新,黃煜倫;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)[J];腫瘤;2002年06期

9 顧宇翔,陳銜城,王宇倩;膠質(zhì)瘤對(duì)親細(xì)胞非均質(zhì)分子脂質(zhì)和幾種藥物敏感性的比較[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2003年02期

10 王成偉 ,劉福生 ,曲元明 ,李桂林;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體抑制膠質(zhì)瘤生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華神經(jīng)外科雜志;2003年01期

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2 吳安華;王運(yùn)杰;Ohlfest JR;Wei Chen;Low WC;;膠質(zhì)瘤的生物治療-從實(shí)驗(yàn)室到臨床[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)分會(huì)第九次學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

3 徐宏;韓楊云;孫中書;李新軍;;與膠質(zhì)瘤代謝通路相關(guān)的候選基因篩選[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)分會(huì)第九次學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

4 潘冬生;;多基因修飾膠質(zhì)瘤細(xì)胞疫苗的抗腫瘤免疫反應(yīng)[A];中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)神經(jīng)外科醫(yī)師分會(huì)第六屆全國(guó)代表大會(huì)論文匯編[C];2011年

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6 張震;徐克;;低強(qiáng)度超聲誘導(dǎo)C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡的體外實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三次全國(guó)超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

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10 黃強(qiáng);;膠質(zhì)瘤生成細(xì)胞研究[A];第三屆中國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)教育論文集[C];2004年

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1 衣曉峰　馮宇曦;中藥三氧化二砷有望成為治療膠質(zhì)瘤新藥[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2011年

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3 張獻(xiàn)懷　張文;瘤區(qū)埋雷 持續(xù)殺傷[N];健康報(bào);2007年

4 白毅;人腦膠質(zhì)瘤基礎(chǔ)與應(yīng)用研究喜結(jié)“九大碩果”[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

5 王德江；劉藏；王貴懷；曹勇；王新生；肖新如;交流最新進(jìn)展 提高診治水平[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

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1 董軍;CUL4B在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤中的作用研究[D];山東大學(xué);2015年

2 張睿;循環(huán)miR-221/222在膠質(zhì)瘤診斷與預(yù)后中的價(jià)值與基于CED的中樞神經(jīng)系統(tǒng)給藥新方法的研究[D];山東大學(xué);2015年

3 許森林;ALDH1A1在膠質(zhì)瘤侵襲和結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移中的作用和機(jī)制[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 王嘯;靶向嵌段共聚物膠束在膠質(zhì)瘤磁共振成像、藥物輸送及治療的應(yīng)用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

5 廖紅展;鋅指轉(zhuǎn)錄因子SNAI2在miR-203的影響下通過(guò)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化參與膠質(zhì)瘤耐藥機(jī)制的調(diào)節(jié)[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

6 潘俊;IRG1促進(jìn)膠質(zhì)瘤增殖的作用機(jī)制及臨床意義[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

7 鄭傳宜;膠質(zhì)瘤中GLUT3基因異常表達(dá)的意義及其相關(guān)調(diào)控機(jī)制[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

8 徐紅超;氬氦冷凍消融聯(lián)合GM-CSF治療膠質(zhì)瘤小鼠的療效及其對(duì)小鼠脾臟樹突狀細(xì)胞免疫功能影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

9 黃素寧;TNFRSF6B在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖及凋亡的作用研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

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7 姬云翔;磷酸化Cx43蛋白在人膠質(zhì)瘤細(xì)胞中表達(dá)及其與腫瘤細(xì)胞增殖相關(guān)性研究[D];石河子大學(xué);2015年

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