DCX和SPAPC共表達對膠質(zhì)瘤細胞生長、侵襲和放射敏感性的影響及其機制研究
發(fā)布時間：2021-11-19 11:25
目的構(gòu)建DCX和SPARC雙基因共表達腺病毒載體（Ad-DCX-SPARC），研究其對膠質(zhì)瘤細胞生長、侵襲和放射敏感性的影響及其機制研究。方法1. PCR擴增獲得DCX和SPARC目的基因，構(gòu)建針對DCX和SPARC的pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter-SPARC雙基因共表達重組轉(zhuǎn)移質(zhì)粒；2.將構(gòu)建正確的pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter-SPARC重組轉(zhuǎn)移質(zhì)粒經(jīng)PmeI酶切后與pAdEasy-1腺病毒骨架質(zhì)粒在BJ5183大腸桿菌中同源重組；3.同源重組質(zhì)粒pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter-SPARC（簡稱為pAd-DCX-polyA+promoter-SPARC）經(jīng)PacI酶切后再用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染QBI-293A細胞，經(jīng)多輪感染和擴增后獲得Ad-DCX-polyA+promoter-SPARC（簡稱Ad-DCX-SPARC）雙基因共表達重組腺病毒載體；4.將Ad-DCX-SPARC重組腺病毒體外感染膠質(zhì)瘤細胞U251和A172，篩選出Ad-DCX-SPARC的最佳感染劑量；5.通過...
【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校
【文章頁數(shù)】：84 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
腺病毒表達載體構(gòu)建流程示意圖
目的基因的鑒定
pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter質(zhì)粒的鑒定A:pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter質(zhì)粒PCR鑒定B:pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter質(zhì)粒雙酶切鑒定
【參考文獻】：
期刊論文
[1]Effect of silencing Bcl-2 expression by small interfering RNA on radiosensitivity of gastric cancer BGC823 cells[J]. Hong-Tao Liu,Chun-Lei Lu. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2013(01)
[2]Microarray screening of differentially expressed genes in DCX transfected U87 cells before and after irradiation[J]. FENG Shuang1 WANG Jie1 JIANG Xin1 XU Yuanyuan1 ZHANG Haowen1 Cao Jianping1 YU Jiahua1 LIU Fenju1,* 1School of Radiation Medicine and Protection, Jiangsu Key Laboratory of Radiation Medicine and Protection, Medical College of Soochow University, Suzhou 215123, China. Nuclear Science and Techniques. 2012(02)
[3]熱療上調(diào)細胞間隙連接通訊對膠質(zhì)瘤侵襲性的影響及其機制[J]. 秦麗娟,張志勇,王銀環(huán),朱麗艷,楊秀紅,張?zhí)?孫娜,宋鴻艷. 中國藥理學(xué)通報. 2011(12)
[4]腦膠質(zhì)瘤的被動免疫治療[J]. 徐昊,王占祥. 中國腫瘤臨床. 2011(20)
[5]電離輻射誘導(dǎo)啟動子Egr-1調(diào)控的基因放射治療[J]. 張春麗,王榮福. 腫瘤學(xué)雜志. 2010(03)
[6]人Egr-1啟動子的克隆及其在腫瘤細胞中的輻射誘導(dǎo)反應(yīng)[J]. 徐小潔,丁麗華,王凌雪,秦璽,程龍,蔣凱,葉棋濃. 細胞與分子免疫學(xué)雜志. 2009(11)
[7]細胞輻射敏感性相關(guān)基因的研究進展(文獻綜述)[J]. 李偉,江其生. 放射免疫學(xué)雜志. 2009(02)
[8]重組腺病毒介導(dǎo)的野生型p53基因?qū)Y(jié)直腸癌細胞的放射治療增敏作用[J]. 崔濱濱,劉明,趙鵬,趙家宏,董新舒. 中華外科雜志. 2005(15)
[9]多基因共表達載體的構(gòu)建策略[J]. 曹慧青. 國外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊). 2002(01)
[10]膠質(zhì)瘤bcl-2基因表達水平與其細胞增殖和凋亡關(guān)系的研究[J]. 于士柱,浦佩玉,江德華,安同嶺,管欣琴,楊露春. 中華病理學(xué)雜志. 2000(01)
本文編號：3504937
【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校
【文章頁數(shù)】：84 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
腺病毒表達載體構(gòu)建流程示意圖
目的基因的鑒定
pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter質(zhì)粒的鑒定A:pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter質(zhì)粒PCR鑒定B:pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter質(zhì)粒雙酶切鑒定
【參考文獻】：
期刊論文
[1]Effect of silencing Bcl-2 expression by small interfering RNA on radiosensitivity of gastric cancer BGC823 cells[J]. Hong-Tao Liu,Chun-Lei Lu. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2013(01)
[2]Microarray screening of differentially expressed genes in DCX transfected U87 cells before and after irradiation[J]. FENG Shuang1 WANG Jie1 JIANG Xin1 XU Yuanyuan1 ZHANG Haowen1 Cao Jianping1 YU Jiahua1 LIU Fenju1,* 1School of Radiation Medicine and Protection, Jiangsu Key Laboratory of Radiation Medicine and Protection, Medical College of Soochow University, Suzhou 215123, China. Nuclear Science and Techniques. 2012(02)
[3]熱療上調(diào)細胞間隙連接通訊對膠質(zhì)瘤侵襲性的影響及其機制[J]. 秦麗娟,張志勇,王銀環(huán),朱麗艷,楊秀紅,張?zhí)?孫娜,宋鴻艷. 中國藥理學(xué)通報. 2011(12)
[4]腦膠質(zhì)瘤的被動免疫治療[J]. 徐昊,王占祥. 中國腫瘤臨床. 2011(20)
[5]電離輻射誘導(dǎo)啟動子Egr-1調(diào)控的基因放射治療[J]. 張春麗,王榮福. 腫瘤學(xué)雜志. 2010(03)
[6]人Egr-1啟動子的克隆及其在腫瘤細胞中的輻射誘導(dǎo)反應(yīng)[J]. 徐小潔,丁麗華,王凌雪,秦璽,程龍,蔣凱,葉棋濃. 細胞與分子免疫學(xué)雜志. 2009(11)
[7]細胞輻射敏感性相關(guān)基因的研究進展(文獻綜述)[J]. 李偉,江其生. 放射免疫學(xué)雜志. 2009(02)
[8]重組腺病毒介導(dǎo)的野生型p53基因?qū)Y(jié)直腸癌細胞的放射治療增敏作用[J]. 崔濱濱,劉明,趙鵬,趙家宏,董新舒. 中華外科雜志. 2005(15)
[9]多基因共表達載體的構(gòu)建策略[J]. 曹慧青. 國外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊). 2002(01)
[10]膠質(zhì)瘤bcl-2基因表達水平與其細胞增殖和凋亡關(guān)系的研究[J]. 于士柱,浦佩玉,江德華,安同嶺,管欣琴,楊露春. 中華病理學(xué)雜志. 2000(01)
本文編號：3504937
本文鏈接：http://sikaile.net/yixuelunwen/shenjingyixue/3504937.html
最近更新
教材專著
