目的構建DCX和SPARC雙基因共表達腺病毒載體（Ad-DCX-SPARC），研究其對膠質(zhì)瘤細胞生長、侵襲和放射敏感性的影響及其機制研究。方法1. PCR擴增獲得DCX和SPARC目的基因，構建針對DCX和SPARC的pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter-SPARC雙基因共表達重組轉(zhuǎn)移質(zhì)粒；2.將構建正確的pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter-SPARC重組轉(zhuǎn)移質(zhì)粒經(jīng)PmeI酶切后與pAdEasy-1腺病毒骨架質(zhì)粒在BJ5183大腸桿菌中同源重組；3.同源重組質(zhì)粒pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter-SPARC（簡稱為pAd-DCX-polyA+promoter-SPARC）經(jīng)PacI酶切后再用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染QBI-293A細胞，經(jīng)多輪感染和擴增后獲得Ad-DCX-polyA+promoter-SPARC（簡稱Ad-DCX-SPARC）雙基因共表達重組腺病毒載體；4.將Ad-DCX-SPARC重組腺病毒體外感染膠質(zhì)瘤細胞U251和A172，篩選出Ad-DCX-SPARC的最佳感染劑量；5.通過... 

【文章來源】：蘇州大學江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

腺病毒表達載體構建流程示意圖

目的基因的鑒定

pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter質(zhì)粒的鑒定A:pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter質(zhì)粒PCR鑒定B:pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter質(zhì)粒雙酶切鑒定

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3504937