背景和目的：多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（GBM）是最常見、最致命的顱內(nèi)腫瘤,過去10年患者的中位生存時(shí)間只有1年。研究發(fā)現(xiàn),GBM對誘導(dǎo)凋亡的治療耐藥,但是對誘導(dǎo)自噬的治療較少耐藥。因此,GBM的治療應(yīng)主要針對誘導(dǎo)自噬。替莫唑胺（TMZ）是目前對GBM最有效的細(xì)胞毒藥物,主要誘導(dǎo)自噬性細(xì)胞死亡。然而,目前TMZ的療效也不理想,這與GBM的多藥耐藥性緊密相關(guān)。因此,如何解決耐藥性的問題異常關(guān)鍵,而在其中如何增強(qiáng)TMZ誘導(dǎo)的自噬作用進(jìn)而提高化療效果成為目前聯(lián)合化療研究的重點(diǎn)之一。研究發(fā)現(xiàn)GBM和氧化應(yīng)激密切相關(guān)。氧化應(yīng)激影響到許多信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,也可以誘導(dǎo)自噬。其中,Nrf2/Keap1信號通路是主要的抗氧化應(yīng)激通路,Nrf2是一個(gè)重要的保護(hù)性轉(zhuǎn)錄因子,與腫瘤的多藥耐藥性相關(guān)。然而,Nrf2和自噬之間的關(guān)系還不是很清楚。因此,本研究的目的是明確Nrf2對TMZ誘導(dǎo)U251細(xì)胞的自噬的影響。材料和方法：通常條件下培養(yǎng)人源神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤U251細(xì)胞,構(gòu)建Si-Nrf2、pEGFP-Nrf2質(zhì)粒并按照說明書進(jìn)行Lipofectamine2000介導(dǎo)的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,分為5組：脂質(zhì)體試劑（Lipo）組,兩個(gè)陰性... 

【文章來源】：南京大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

自唾的過程及調(diào)節(jié)因素[10]

圖2 Nrf2下調(diào)后Nrf2的蛋白水平改變?nèi)?8 h后細(xì)胞內(nèi)Nrf2蛋白表達(dá)水平的western blot圖。B. Nrf2蛋f]水平的定尸<0.001, Si-Nrf2 組 VS Si-control 組、Lipo 組）調(diào)Nrf2后U251細(xì)胞基礎(chǔ)自噬水平的改變細(xì)胞中的自卩筮結(jié)構(gòu)見圖3。Si-control組中，細(xì)胞質(zhì)中有極少量溶明顯自唆泡；Si-Nrf2組中，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見較多的自嚼泡和消化殘佘消化細(xì)胞器的自嘆體、包含消化完剩余結(jié)構(gòu)的自唾體、次級溶酶體屮的結(jié)構(gòu)均可見到。-15-

圖9 Nrf2通路在氧化應(yīng)激下激活的示意圖[38]GBM占成人原發(fā)性腦腫瘤的50%，預(yù)后很差，盡管包括手術(shù)治療、放療、化內(nèi)的多模式治療提高了預(yù)后，然而5年生存率仍然不超過5%。由于GBM細(xì)停遷移、高度侵襲，因此很難通過手術(shù)完全切除腫瘤，因此綜合治療的關(guān)鍵是增強(qiáng)化療效果[5，32]。TMZ是目前廣泛使用的細(xì)胞毒藥物，可以誘導(dǎo)顯著自嚼性細(xì)胞死亡，但是效果仍然不佳，這與GBM的多藥耐藥性相關(guān)。藥物耐藥


本文編號：3498245