特異性CTL對移植性小鼠神經膠質瘤免疫治療的研究
發(fā)布時間:2021-11-16 03:01
目的:樹突狀細胞(DCs)是動物體內功能最強的抗原呈遞細胞(antigenprocessing cell,APC)。在捕獲腫瘤細胞之后,DC遷移到淋巴結中將腫瘤抗原呈遞給T淋巴細胞,誘導其成為具有腫瘤特異性的細胞毒性T淋巴細胞(cytotoxicT lymphocyte,CTL),后者能特異性殺傷腫瘤細胞。本實驗通過體外培養(yǎng)小鼠的脾T淋巴細胞,經負載神經膠質瘤抗原的DC激活后,使之成為具有抗腫瘤特異性的CTL,未負載腫瘤抗原的則為非特異性CTL,將特異性CTL和非特異性CTL作為對比實驗,輸入移植性小鼠神經膠質瘤模型中,通過測量腫瘤體積以及HE染色等實驗技術,研究腫瘤特異性CTL在小鼠體內對神經膠質瘤細胞的生長抑制以及殺傷作用。方法:在小鼠骨髓中分離得到細胞懸液,以rhGM-CSF、rhIL-4、和TNF-α進行誘導培養(yǎng),定期觀察細胞形態(tài)的變化,收集其中的部分細胞做流式細胞術(flow cytometry,F(xiàn)CM)分析,確定其為可以使用的DC細胞。用神經膠質瘤細胞凍融抗原刺激DC,使之成為DC疫苗。制備小鼠脾T細胞,進行體外培養(yǎng),并和DC疫苗共培養(yǎng),從而誘導產生具有腫瘤抗原特異性的CT...
【文章來源】:河北師范大學河北省
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
MHCI類抗原加工以及抗原呈遞途徑
經被用來解釋發(fā)生變化的多肽的差別效應。這些模型包括信號傳導動力學的變化,免疫突觸的形成,負信號的誘導以及 TCR 或者共刺激分子的補充。此外,在沒有 T 細胞增殖的刺激下,細胞溶解的誘導也能夠被肽對 MHC 降低的親和力所引發(fā);這凸顯了肽與 MHC 之間的相互作用在 TCR 參與中作為一個重要的決定因素。因此,應該指出,肽拮抗劑不僅對于 MHCI 類分子的約束力而競爭,而且改變了 T 細胞活化的級聯(lián)過程(圖 2)。效應 CTL 的產生要求至少有三個連續(xù)信號:(1)TCR 連接反應;(2)共刺激信號傳輸,例如,CD28-B7 的相互作用;(3)IL-2 介導的信號。未激活的幼稚 CD8+T 細胞不表達 IL-2 及其受體,這是在 TCR 和 CD28-介導的信號之上誘導的。這些信號誘導 IL-2 產生的量,但是,可能對于充分激活沒有足夠的保證。在這種情況下,活化的 Th 細胞可能提供額外的 IL-2。
2 結 果 神經膠質瘤細胞和 DC 細胞的形態(tài)學觀察.1 神經膠質瘤 C6 細胞的形態(tài)學觀察倒置相差顯微鏡對神經膠質瘤 C6 細胞進行觀察,100 倍物鏡呈長梭形或多邊形,傳代當天 4 h 后細胞呈球形半貼壁生長,已經出現(xiàn)全貼壁生長,但是細胞數(shù)量較少,細胞排列較稀疏(細胞繁殖較迅速,在細胞培養(yǎng)瓶內兩天即可達到 80%的細胞融
【參考文獻】:
期刊論文
[1]MUC1/Y基因真核表達載體構建及MUC1、MUC1/Y體外修飾DC誘導特異性抗腫瘤免疫應答[J]. 劉虹,任秀寶,魏楓,尹志偉,郝希山. 中華微生物學和免疫學雜志. 2004(07)
[2]腫瘤抗原致敏樹突狀細胞瘤苗治療顱內膠質瘤的實驗研究[J]. 劉福生,王忠誠,歷俊華,林松,任銘,肖慶,張亞卓. 中華神經外科雜志. 2002(02)
[3]MAGE-1修飾的樹突狀細胞體外誘導殺傷人肝癌細胞[J]. 劉彬彬,葉勝龍,賀平,鄭寧,趙燕,孫瑞霞,湯釗猷. 中華肝臟病雜志. 2001(03)
[4]人外周血樹突狀細胞的體外擴增及鑒定[J]. 朱學軍,曹雪濤,于益芝,陳國友,萬濤,馬施華,唐華,章衛(wèi)平. 中國腫瘤生物治療雜志. 1997(04)
本文編號:3498038
【文章來源】:河北師范大學河北省
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
MHCI類抗原加工以及抗原呈遞途徑
經被用來解釋發(fā)生變化的多肽的差別效應。這些模型包括信號傳導動力學的變化,免疫突觸的形成,負信號的誘導以及 TCR 或者共刺激分子的補充。此外,在沒有 T 細胞增殖的刺激下,細胞溶解的誘導也能夠被肽對 MHC 降低的親和力所引發(fā);這凸顯了肽與 MHC 之間的相互作用在 TCR 參與中作為一個重要的決定因素。因此,應該指出,肽拮抗劑不僅對于 MHCI 類分子的約束力而競爭,而且改變了 T 細胞活化的級聯(lián)過程(圖 2)。效應 CTL 的產生要求至少有三個連續(xù)信號:(1)TCR 連接反應;(2)共刺激信號傳輸,例如,CD28-B7 的相互作用;(3)IL-2 介導的信號。未激活的幼稚 CD8+T 細胞不表達 IL-2 及其受體,這是在 TCR 和 CD28-介導的信號之上誘導的。這些信號誘導 IL-2 產生的量,但是,可能對于充分激活沒有足夠的保證。在這種情況下,活化的 Th 細胞可能提供額外的 IL-2。
2 結 果 神經膠質瘤細胞和 DC 細胞的形態(tài)學觀察.1 神經膠質瘤 C6 細胞的形態(tài)學觀察倒置相差顯微鏡對神經膠質瘤 C6 細胞進行觀察,100 倍物鏡呈長梭形或多邊形,傳代當天 4 h 后細胞呈球形半貼壁生長,已經出現(xiàn)全貼壁生長,但是細胞數(shù)量較少,細胞排列較稀疏(細胞繁殖較迅速,在細胞培養(yǎng)瓶內兩天即可達到 80%的細胞融
【參考文獻】:
期刊論文
[1]MUC1/Y基因真核表達載體構建及MUC1、MUC1/Y體外修飾DC誘導特異性抗腫瘤免疫應答[J]. 劉虹,任秀寶,魏楓,尹志偉,郝希山. 中華微生物學和免疫學雜志. 2004(07)
[2]腫瘤抗原致敏樹突狀細胞瘤苗治療顱內膠質瘤的實驗研究[J]. 劉福生,王忠誠,歷俊華,林松,任銘,肖慶,張亞卓. 中華神經外科雜志. 2002(02)
[3]MAGE-1修飾的樹突狀細胞體外誘導殺傷人肝癌細胞[J]. 劉彬彬,葉勝龍,賀平,鄭寧,趙燕,孫瑞霞,湯釗猷. 中華肝臟病雜志. 2001(03)
[4]人外周血樹突狀細胞的體外擴增及鑒定[J]. 朱學軍,曹雪濤,于益芝,陳國友,萬濤,馬施華,唐華,章衛(wèi)平. 中國腫瘤生物治療雜志. 1997(04)
本文編號:3498038
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