帕金森疾�。≒arkinson’s Disease,PD）是一種與年齡相關(guān)并且嚴重危害中老年人健康的神經(jīng)性退行性疾病。該病以多巴胺能神經(jīng)元漸進性變性脫失,紋狀體多巴胺輸入受損為主要病理特征。PD是一種多因素疾病,但具體機制仍待進一步闡明。因此,臨床上仍采用對癥治療,如L-DOPA補充PD病人缺失的多巴胺。但是這種治療方法并不能阻止疾病的進展且有毒副作用。血小板源性生長因子-BB（Platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB）是為數(shù)不多經(jīng)FDA批準投入臨床使用的生長因子。近年來,因發(fā)現(xiàn)其明顯的促進神經(jīng)再生的作用,研究人員擬探究其作為一種神經(jīng)保護劑的可能。研究者在PD動物模型中發(fā)現(xiàn)PDGF-BB可以促進黑質(zhì)酪氨酸羥化酶（Tyrosine hydroxylase,TH）的表達。與此同時,PDGF-BB臨床前實驗評估中,研究結(jié)果顯示PD患者對PDGF-BB是安全且耐受的。這些研究為對PDGF-BB的功效及劑量等研究和臨床試驗奠定了基礎(chǔ)。然而,基于PDGF-BB對神經(jīng)元的保護功能及分子機制的研究尚未有報道。本課題以當前該領(lǐng)域研究結(jié)果為基礎(chǔ),以MPTP/MPP... 

【文章來源】：電子科技大學四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

小鼠側(cè)腦室立體定位注射

電子科技大學碩士學位論文24圖3-1PDGF-BB保護神經(jīng)元免受MPP+誘導的細胞死亡（a）用CCK8法檢測不同濃度MPP+（0-500μM）處理細胞48h后SH-SY5Y細胞的活力；（b）用不同濃度的PDGF-BB（10-100ng/mL）預處理SH-SY5Y細胞30min，不經(jīng)洗滌加入MPP+（250μM），CCK8法測定培養(yǎng)48h后活細胞數(shù)；（c）用PDGF-BB（50ng/mL）預處理SH-SY5Y細胞30min，不經(jīng)洗滌加入MPP+（250μM）。細胞與PDGF-BB和MPP+共孵育48小時，用血球計數(shù)板計數(shù)細胞數(shù)；（d）處理方式同（c），流式細胞儀（d）分析凋亡細胞，凋亡細胞的相對百分比；（e）表示Annexin-V（A-V）陽性細胞的相對百分比，為（d）的量化。Control組（未經(jīng)處理組）標準化為1，圖中所示數(shù)據(jù)均為control組的相對值。所有數(shù)據(jù)均為至少三個獨立實驗的平均值±標準差，“***”表示與control組相比P<0.001�！�##”表示P<0.01，“###”表示P<0.001。數(shù)據(jù)分析采用單因素方差分析，然后進行Bonferroni事后檢驗。

電子科技大學碩士學位論文26圖3-2PDGF-BB抑制MPP+誘導的神經(jīng)元ROS生成（a）用MPP+（250μM）處理SH-SY5Y細胞（0-360min），用DCFH-DA試劑盒檢測細胞ROS的產(chǎn)生，在多功能酶標儀中讀取熒光；（b）用PDGF-BB（50ng/mL）和/或PBN（500uM）/mitoTEMPO（100uM）預處理SH-SY5Y細胞30min，不經(jīng)洗滌加入MPP+（250μM）。細胞再孵育3小時，然后進行ROS檢測；（c）將SH-SY5Y細胞經(jīng)PDGF-BB（50ng/mL）預處理30min，不經(jīng)洗滌加入MPP+（250μM）。將細胞再孵育3小時，在顯微鏡下拍攝具有代表性的免疫熒光圖像（圖像中的標尺為50μm）；（d）細胞經(jīng)與（b）相同的處理，培養(yǎng)48小時后用CCK8法檢測細胞活力。control組（未經(jīng)處理組）標準化為1，（a），（b）和（d）所有數(shù)據(jù)表示與control組的相對值。所有數(shù)據(jù)均表示為至少三個獨立實驗的平均值±標準差，“*”表示與control組相比P<0.05，“**”表示P<0.01，“***”表示P<0.001�！�#”表示與單用MPP+處理的細胞組相比P<0.05，“###”表示P<0.001。數(shù)據(jù)分析采用單因素方差分析，然后進行Bonferroni事后檢驗。


本文編號：3493990