研究背景:肝豆?fàn)詈俗冃杂址Q為威爾遜�。╓ilson’s Disease,WD）,是由于常染色體ATP7B基因突變造成銅代謝障礙致使銅沉積于身體多個(gè)臟器并引起損害。如未及時(shí)合理治療,可進(jìn)行性加重導(dǎo)致殘疾甚至死亡。而目前的診斷依據(jù)尚有不足之處,銅藍(lán)蛋白降低程度不同甚至可正常,在其他肝病也可降低;肝銅是有創(chuàng)性檢查;ATP7B基因檢測相對昂貴;因此在臨床工作中需要更加靈敏特異的診斷標(biāo)志物。WD患者肝臟病理改變與非酒精性脂肪肝表現(xiàn)相似,均為脂肪變性改變,但是WD患者血清甘油三酯水平偏低,與非酒精性脂肪肝患者表現(xiàn)完全相反。而對于WD的脂類改變機(jī)制尚未完全闡明,且多方意見不統(tǒng)一,因此有必要應(yīng)用脂質(zhì)代謝組學(xué)方法對其脂質(zhì)改變做進(jìn)一步的研究,以發(fā)掘有助于診斷的標(biāo)志物并闡明其中機(jī)制。通過應(yīng)用脂質(zhì)代謝組學(xué)技術(shù)檢測WD血清中脂質(zhì)物質(zhì),探討脂質(zhì)物質(zhì)的改變規(guī)律,從而解釋血清指標(biāo)與病理改變不一致的現(xiàn)象,并發(fā)掘可能對疾病診斷有價(jià)值的代謝標(biāo)志物以及闡述其中的機(jī)制。目的:利用脂質(zhì)代謝組學(xué)方法對WD患者、家屬及健康對照血清樣本進(jìn)行脂質(zhì)物質(zhì)檢測,從中尋找差異代謝物質(zhì),以期發(fā)現(xiàn)具有診斷價(jià)值的代謝標(biāo)志物,并尋找受影響的代謝通路,探... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

銅離子在肝細(xì)胞內(nèi)的代謝途徑（GSH:glutathione;MT:metallothioneins;CP:ceruloplasmin;GPI:glycosylphosphatidylinositol）

第3章材料與方法15家屬組排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并乙型或丙型病毒性肝炎、藥物性肝炎、酒精性肝并自身免疫性肝并重疊綜合征、血色玻（2）原患或現(xiàn)患惡性腫瘤。（3）妊娠或哺乳期女性。對照組納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）檢查及化驗(yàn)指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)。（2）知情并同意參加本研究，并簽署知情同意書。對照組排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并乙型或丙型病毒性肝炎、藥物性肝炎、酒精性肝并自身免疫性肝并重疊綜合征、血色玻（2）原患或現(xiàn)患惡性腫瘤。（3）妊娠或哺乳期女性。圖3.1WD患者診斷流程圖3.1.2實(shí)驗(yàn)儀器與試劑實(shí)驗(yàn)儀器

第4章結(jié)果234.2數(shù)據(jù)預(yù)處理本實(shí)驗(yàn)共檢測512種脂質(zhì)物質(zhì)，對缺失值過濾，按照質(zhì)量控制樣本（qualitycontrol，QC）中缺失超過50%的去除、樣本中缺失值超過80%的原則去除進(jìn)行數(shù)據(jù)過濾，剩余503種物質(zhì)。由于96孔板對樣本數(shù)量的限制，將樣本分裝在兩個(gè)96孔板檢測，樣本按照每10個(gè)插入一個(gè)QC樣本進(jìn)行檢測，對得出的數(shù)據(jù)進(jìn)行QC校正，利用QC樣本數(shù)據(jù)對所有樣本數(shù)據(jù)進(jìn)行校正，消除系統(tǒng)誤差，對數(shù)據(jù)進(jìn)行歸一化處理。4.3數(shù)據(jù)質(zhì)控為了監(jiān)測整個(gè)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)質(zhì)量，本實(shí)驗(yàn)在130個(gè)血清樣本中插入13個(gè)QC樣本，以CV30%為過濾閾值，確保用于統(tǒng)計(jì)分析的脂質(zhì)的質(zhì)譜檢測峰面積值滿足這一嚴(yán)格條件。QC的變異系數(shù)（coefficientofvariance，CV）平均值是6%，98%脂質(zhì)的CV<30%，顯示整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中良好的定量準(zhǔn)確性（圖4.1A）。同時(shí)，我們將QC樣本之間進(jìn)行皮爾森相關(guān)性（Pearsoncorrelation）分析，得到相關(guān)性在0.99-1之間，說明整體實(shí)驗(yàn)的重現(xiàn)性非常好，圖4.1B為QC1和QC9之間相關(guān)性分析，相關(guān)性為0.99。圖4.1為監(jiān)測實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)質(zhì)量，設(shè)置了QC樣本，圖（A）98%脂質(zhì)的CV<30%，絕大部分＜10%，說明實(shí)驗(yàn)具有良好的定量準(zhǔn)確性；圖（B）挑選相關(guān)性最小的兩組，QC1和QC9，相關(guān)系數(shù)為0.99，說明整體實(shí)驗(yàn)的重現(xiàn)性非常好。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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