背景與目的多發(fā)性硬化癥（MS）是一種典型的慢性炎癥性、脫髓鞘疾病。臨床表現(xiàn)以神經(jīng)炎、共濟失調(diào)、肢體癱瘓為主。實驗性自身免疫性腦脊髓炎（EAE）是人體多發(fā)性硬化癥的一個非常成熟的動物模型,被廣泛應(yīng)用于研究免疫學(xué)機制。Pin1,是肽酰脯氨酰順/反式異構(gòu)酶細小蛋白亞家族中的一員,其對許多關(guān)鍵蛋白的構(gòu)象調(diào)節(jié)對多種重要的細胞活動都具有很深遠的影響。有研究表明Pin1在哮喘的發(fā)展和微生物感染等免疫系統(tǒng)相關(guān)疾病中起了重要作用。但Pin1在自身免疫系統(tǒng)疾病中發(fā)揮的功能及其機制報道很少。本研究的目的是通過體外實驗和體內(nèi)實驗相結(jié)合的方法初步探討Pin1對EAE中自身免疫炎癥導(dǎo)致疾病發(fā)生的作用及機制,以及Pin1調(diào)節(jié)自身免疫性腦脊髓炎發(fā)生發(fā)展的細胞機制,為多發(fā)性硬化癥及其他T淋巴細胞有關(guān)的自體免疫性疾病的臨床研究提供參考與借鑒。方法本論文主要從EAE小鼠整體及病理分析、Pin1對EAE小鼠脊髓和外周淋巴結(jié)中及各T細胞亞群的調(diào)節(jié)作用和Pin1對EAE小鼠致病作用的體外研究三方面進行論述。首先構(gòu)建EAE的小鼠動物模型,并將20只小鼠分成兩組,每組10只,實驗組在誘導(dǎo)前一周尾靜脈注射重組慢病毒載體用來敲低Pin1... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

免疫炎癥細胞和因子介導(dǎo)的MS/EAE發(fā)病機制示意圖

天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文型，分泌不同譜系的細胞因子，而行使不同的免疫功能。CD4 陽性 T 細胞是大類 T 細胞，主要又分為輔助性 T 細胞（T helper cells，Th）和調(diào)節(jié)性 T 細胞T regulatory cells，Treg）兩大亞類。其中輔助性 T 細胞還可繼續(xù)分為 Th1、Th2h17三個亞型。樹突狀細胞介導(dǎo)不同T細胞亞群分化行使不同的功能。Harringto在 2005 年，根據(jù) T 細胞分泌的細胞因子發(fā)現(xiàn)于定義 Th17 細胞以來[28, 29]，不有證據(jù)說明，Th17 細胞在誘發(fā) EAE 發(fā)病中具有很重要的促進作用[30, 31]。Th1胞就是在周圍環(huán)境存在 TGF-β和 IL-6 的條件下，刺激 CD4 陽性處女 T 細胞定分化為的 Th 細胞亞群，分泌 IL-17A、IL-17F、IL-6 及 IL-22 等一系列細胞因。TGF-β既可通過 Foxp3 誘導(dǎo) Treg 細胞分化下調(diào)免疫應(yīng)答[32]，又可抑制 Th1h2，促進 Th17 分化。IL-6 在促進 Th17 分化和抑制 Treg 細胞分化上起到平衡用，如圖 2 所示。

3.1 敲低 Pin1 后，小鼠 EAE 的臨床評分表現(xiàn)。在誘導(dǎo)前一周尾靜脈注射重組滴度>108IU/ml，含終濃度 8μg/μl 的聚凝胺）。免疫誘導(dǎo)后，開始進行觀察并及時進行臨床評分，一直持續(xù)到 35 天后。*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001。了明確 Pin1 對自身免疫腦脊髓炎的調(diào)節(jié)作用，我們利用 20 只小鼠究敲低 Pin1 抑制小鼠自身免疫腦脊髓炎 EAE 發(fā)生發(fā)展。我們首先in1 后，對小鼠自身免疫腦脊髓炎 EAE 的臨床評分表現(xiàn)的影響。結(jié)果病毒載體組對照（Pin1-control）相比，敲低 Pin1（Pin1-KD）組的腦脊髓炎 EAE 的臨床癥狀直到 9 天后才出現(xiàn)，比空白病毒載體1-control）推遲了 2 天；而且后續(xù)的臨床評分從整體上看，敲1-KD）組的小鼠自身免疫腦脊髓炎 EAE 的臨床評分要低于空白�。≒in1-control）的臨床評分（圖 3.1）。 敲低 Pin1 表達后，小鼠實驗性腦脊髓炎 EAE 的發(fā)病率下降


本文編號：3491262