背景帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是一種常見的神經(jīng)退行性疾病,也是最常見的突觸核蛋白病之一,眾所周知帕金森病典型的病理表現(xiàn)為腦中黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元退行性變和路易小體沉積;α-突觸核蛋白是多巴胺能神經(jīng)元中嗜伊紅染色路易小體（Lewy body,LB）的主要成分^[1];路易小體內(nèi)有多種蛋白質(zhì)富集,主要包括α-突觸核蛋白、parkin、泛素等,其中α-突觸核蛋白是其主要成分。神經(jīng)元中α-突觸核蛋白陽性包涵體是其主要的病理改變,即由錯誤折疊的α-突觸核蛋白（alpha-synuclein,α-syn）構(gòu)成的異常細胞質(zhì)內(nèi)含物^[2];主要累及黑質(zhì)紋狀體多巴胺能神經(jīng)元,還包括去甲腎上腺素能神經(jīng)及腦干、5-HT神經(jīng)元。α-突觸核蛋白是可溶性的蛋白質(zhì),當與膜結(jié)合時,結(jié)構(gòu)發(fā)生α-螺旋化的改變。在病理條件下,它會寡聚化聚集成纖維體,排列成富含β-片層結(jié)構(gòu)的薄片^[1,3,4]。Braak^[5]等發(fā)現(xiàn)在帕金森病患者不同病程的發(fā)生發(fā)展階段,錯誤折疊異常聚集的α-突觸核蛋白在神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)通過軸突按照一定順序... 

【文章來源】：鄭州大學河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

制備α-突觸核蛋白單體、寡聚體、纖維體的形態(tài)示意圖

圖 2A 小鼠嗅球立體定位注射圖 2 B 小鼠頭部解剖示意圖及連接嗅球（OB）的各個腦區(qū)OB：嗅球；AON：前嗅核；FrA：額葉聯(lián)絡皮質(zhì)；OTu：嗅結(jié)節(jié)；Str：丘腦上輻射 PIR：梨形皮質(zhì)；Am：丘腦前內(nèi)側(cè)核；LEnt：內(nèi)嗅區(qū)外側(cè)皮質(zhì)2.6 小鼠灌注取材在不同時間點（注射后1天、2天、3天及4天）灌注小鼠。我們用戊巴比妥鈉麻醉小鼠并用0.9％鹽水經(jīng)心臟灌注，然后用磷酸鹽中的4％PFA緩沖。 我們收集小鼠大腦（每組4-5只小鼠）用于組織學實驗取材，在4％PFA中將它們固定24小時，并將它們置于30％蔗糖磷酸鹽緩沖液中。 我們將大腦儲存在4°C直到切片。我們在冷凍切片機上將每只小鼠的整個大腦切成30μm自由浮動的冠狀切片，并將它們儲存在4℃的防凍液中直至進行免疫組織化學染色及免疫熒光染色。2.7 免疫組化法檢測嗅球 α-突觸核蛋白陽性包涵體的表達

圖 2A 小鼠嗅球立體定位注射圖 2 B 小鼠頭部解剖示意圖及連接嗅球（OB）的各個腦區(qū)OB：嗅球；AON：前嗅核；FrA：額葉聯(lián)絡皮質(zhì)；OTu：嗅結(jié)節(jié)；Str：丘腦上輻射 PIR：梨形皮質(zhì)；Am：丘腦前內(nèi)側(cè)核；LEnt：內(nèi)嗅區(qū)外側(cè)皮質(zhì)2.6 小鼠灌注取材在不同時間點（注射后1天、2天、3天及4天）灌注小鼠。我們用戊巴比妥鈉麻醉小鼠并用0.9％鹽水經(jīng)心臟灌注，然后用磷酸鹽中的4％PFA緩沖。 我們收集小鼠大腦（每組4-5只小鼠）用于組織學實驗取材，在4％PFA中將它們固定24小時，并將它們置于30％蔗糖磷酸鹽緩沖液中。 我們將大腦儲存在4°C直到切片。我們在冷凍切片機上將每只小鼠的整個大腦切成30μm自由浮動的冠狀切片，并將它們儲存在4℃的防凍液中直至進行免疫組織化學染色及免疫熒光染色。2.7 免疫組化法檢測嗅球 α-突觸核蛋白陽性包涵體的表達

【參考文獻】：
期刊論文
[1]α-突觸核蛋白在神經(jīng)損傷中的作用[J]. 賈琳琳,李術(shù).  畜牧與獸醫(yī). 2011(02)
[2]α-突觸核蛋白的生物學功能及其在帕金森病中的作用[J]. 熊中奎,胡雅兒.  中國病理生理雜志. 2010(09)
[3]α-synuclein表達與相關(guān)神經(jīng)系統(tǒng)疾病的關(guān)系[J]. 宋香全,康云霄,李雙成.  河北醫(yī)科大學學報. 2010 (03)
[4]α-突觸核蛋白存在于大鼠腦線粒體中[J]. 劉光偉,殷娟娟,張春巖,李昕,劉耀波,李堯華,楊慧,陳彪,于順.  首都醫(yī)科大學學報. 2007(03)
[5]SH-SY5Y細胞α-突觸核蛋白的過表達可部分抵抗魚藤酮誘導的氧化應激[J]. 劉延英,趙煥英,趙春禮,段春禮,魯玲玲,楊慧.  生理學報. 2006(05)



本文編號：3483941