目的:探討叉頭框P2基因（FOXP2）對膠質(zhì)細胞瘤細胞侵襲的影響。方法:采用熒光定量PCR技術與Western blot分別檢測FOXP2在正常星型膠質(zhì)細胞與膠質(zhì)瘤細胞中的核糖核酸與蛋白表達水平。用攜帶FOXP2基因慢病毒質(zhì)粒轉染膠質(zhì)瘤細胞U87和U251細胞系,通過劃痕實驗、Transwell侵襲實驗和Western blot觀察其對膠質(zhì)瘤細胞侵襲性以及PI3K、Akt蛋白的影響。結果:FOXP2的表達在膠質(zhì)瘤細胞U87和U251中明顯低于正常星型膠質(zhì)細胞。上調(diào)FOXP2后,膠質(zhì)瘤細胞U87和U251細胞侵襲性明顯降低,Akt與PI3K表達明顯降低。結論:FOXP2通過調(diào)控PI3K/Akt通路可以在一定程度上抑制膠質(zhì)瘤細胞的侵襲能力,從而延緩膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展。 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學學報(自然科學版). 2017,37(05)北大核心CSCD

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FOXP2抑制U87和U251細胞遷移Figure2FOXP2inhibitsmigrationinU87andU251cells

第37卷第5期2017年5月A：Westernblot檢測FOXP2過表達效率；B、C：過表達FOXP2后膠質(zhì)瘤細胞U87及U251細胞劃痕實驗；*P＜0.01(n=3)。圖2FOXP2抑制U87和U251細胞遷移Figure2FOXP2inhibitsmigrationinU87andU251cells2.3過表達FOXP2抑制膠質(zhì)瘤的細胞侵襲能力過表達FOXP2后，Transwell小室侵襲實驗結果顯示，在膠質(zhì)瘤U87（圖3A,B）和U251細胞（圖3C,D）過表達FOXP2后，細胞侵襲與遷移能力較對照組均明顯下降（P<0.01）。2.4FOXP2調(diào)控PI3K/Akt信號通路在膠質(zhì)瘤U87和U251細胞過表達FOXP2，Westernblot顯示FOXP2蛋白水平明顯升高（圖4A、B）。結果表明，升高FOXP2后，PI3K和Akt蛋白表達水平顯著高于對照組（P<0.01）,提示FOXP2通過調(diào)控PI3K/Akt信號通路影響膠質(zhì)瘤細胞侵襲與遷移。3討論過往研究表明，叉頭框基因家族已經(jīng)成為一種癌癥治療的有效靶點。叉頭框基因與多種癌癥的侵襲轉移關系密切，研究報道FOXC1可以抑制肺癌細胞侵襲并且抑制肺癌腫瘤的轉移［8］，F(xiàn)OXF1可以促進多種腫瘤細胞侵襲［9］，下調(diào)FOXM1能夠抑制胰腺癌細胞和骨肉瘤細胞的侵襲能力［10］，過表達FOXP3可以抑制卵巢癌細胞的侵襲［11］，F(xiàn)OXP4在多種乳腺癌細胞中因異位而失活［12］，在腎癌中呈低表達。FOXP2*P<0.01(n=3)。圖1qPCR與Westernblot檢測FOXP2在膠質(zhì)瘤組織與細胞中的表達Figure1TheexpressionofFOXP2ingliomatissuesandgliomacellsbyqPCRandWesternblot徐然，仇文進，陳正新，等.FOXP2調(diào)控PI3K/Akt信號通路抑制膠質(zhì)瘤的侵襲［J］．南京醫(yī)科大學學報（自然科學版），2017，37（5）：559-563·561·

第37卷第5期南京醫(yī)科大學學報2017年5月南京醫(yī)科大學學報（社會科學版）ACTAUNIVERSITATISMEDICINALISNANJING（SocialSciences）第5期總第82期175月南月*P<0.01(n=3)。圖4Westernblot檢測FOXP2靶向調(diào)控P13K/Akt信號通路Figure4FOXP2regulatesPI3K/AktsignalingpathwaybyWesternblot*P<0.01(n=3)。圖3Transwell侵襲實驗檢測FOXP2抑制U87和U251細胞侵襲Figure3FOXP2inhibitsinvasioninU87andU251cellsbyTranswell基因是語言發(fā)展和神經(jīng)發(fā)展方面至關重要的因素［13］，相關研究表明FOXP2基因在結腸癌、卵巢、肝臟、腸和大腦中高表達［6］，且最近研究報道，F(xiàn)OXP2在前列腺癌與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展中起到了重要作用［7］。敲除FOXP2基因能夠促進乳腺癌的起始與轉移，并且FOXP2低表達與乳腺癌患者低生存率密切相關［14］。但是，F(xiàn)OXP2在膠質(zhì)瘤中的作用卻仍然未知。本研究觀察了FOXP2基因在膠質(zhì)瘤組織與膠質(zhì)瘤細胞中的表達水平，qPCR與Westernblot實驗結果顯示FOXP2在膠質(zhì)瘤組織與細胞中明顯降低，因此推測FOXP2在膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中起到重要作用。在膠質(zhì)瘤細胞U87和U251細胞系過表達FOXP2后，劃痕實驗與Transwell侵襲實驗表明，侵襲能力和遷移能力明顯減弱，說明FOXP2能夠抑制膠質(zhì)瘤的侵襲。這些結果都表明FOXP2是一潛在的具有抑癌功能的基因，是診斷與治療膠質(zhì)瘤的新靶點。PI3K/Akt是一信號轉導通路，不僅在胰島素調(diào)節(jié)和糖代謝中發(fā)揮重要作用，還能促進細胞的存活和抗凋亡，調(diào)節(jié)細胞的變形和運動［15］。近幾年來研究發(fā)現(xiàn)，PI3K/Akt信號通路在多數(shù)人類腫瘤中能夠調(diào)節(jié)腫瘤細胞增殖和凋亡，在腫瘤侵襲、轉移及化療與放療抵抗中也有重要作用［16］。Akt激活后在細胞內(nèi)重新定位，磷酸化相關底物蛋白，能夠?


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