<正>目的探討鞘磷脂合酶1在氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的Neuro—2a細(xì)胞凋亡中的作用,與神經(jīng)酰胺和ERK通路的關(guān)系,探討SMS1可能的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制。研究方法 1.體外培養(yǎng)小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞（N2a）細(xì)胞,用不同濃度梯度的過氧化氫建立氧化應(yīng)激模型,并用MTT法和光鏡顯微鏡評價(jià)模型。用Real—time PCR和western blot檢測不同濃度梯度H₂O₂處理的細(xì)胞中SMS1的基因和蛋白水平變化。2.實(shí)驗(yàn)分為對照組、H₂O₂組、H₂O₂+D609組和D609組。采用Real—Time PCR法從基因水平檢測SMS1表達(dá),Western—blot法從蛋白水平檢測SMS1及p—ERK表達(dá)。LS—MS分析法檢測神經(jīng)酰胺水平。Hoechst33342染色法和流式細(xì)胞儀測定各組細(xì)胞凋亡率。 

【文章來源】： 胡治平涂然然 中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科

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本文編號：3476390