腫瘤細(xì)胞即使在有氧條件下仍通過糖酵解為細(xì)胞供能,這一現(xiàn)象稱為“Warburg效應(yīng)”。由于腫瘤細(xì)胞的快速增殖需要攝取大量的葡萄糖供細(xì)胞所用,葡萄糖經(jīng)酵解產(chǎn)生大量乳酸,因此腫瘤細(xì)胞中常伴有酸性的微環(huán)境。腦組織由于以葡萄糖的利用為主,同時(shí)存在血腦屏障,腫瘤細(xì)胞的快速增殖導(dǎo)致其形成一個(gè)缺氧、酸性和營養(yǎng)缺乏的微環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞中的乳酸可以通過單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白MCT1/MCT4的轉(zhuǎn)運(yùn)而被周圍細(xì)胞重新利用,這一現(xiàn)象被稱為代謝共生。但腦膠質(zhì)瘤的微環(huán)境是否誘導(dǎo)MCT1/MCT4的表達(dá)?MCT1/MCT4在膠質(zhì)瘤增殖中的作用及其調(diào)控機(jī)制并不清楚,研究這一問題對腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生機(jī)制和臨床治療有重要的意義。本研究以腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞T98G和U251為研究材料,研究葡萄糖不足和乳酸培養(yǎng)條件對膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長和乳酸代謝途徑的影響。研究發(fā)現(xiàn)低糖培養(yǎng)條件抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長,乳酸培養(yǎng)條件可促進(jìn)腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長,ATP維持較高水平。在葡萄糖不足且乳酸存在的條件下乳酸促進(jìn)細(xì)胞增殖和維持細(xì)胞能量水平的效果更為明顯。表明腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞可利用乳酸為能源維持細(xì)胞增殖生長。檢測不同培養(yǎng)條件下細(xì)胞乳酸代謝相關(guān)蛋白的表達(dá)發(fā)現(xiàn)腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞在乳... 

【文章來源】：云南大學(xué)云南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３．?３培養(yǎng)條件不同對Ｔ９８Ｇ細(xì)胞乳酸代謝途徑的影響??Ｆｉｇ３．３?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｕｌｔｕｒｅ?ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ?ｏｎ??

導(dǎo)ＭＣＴ１蛋白表達(dá)水平的增加。同時(shí)ＨＩＦ－ｌａ在高糖加乳酸條件下的表達(dá)量是高糖培??養(yǎng)條件的１．?１２倍，ＨｌＦ－ｌａ的表達(dá)在低糖加乳酸中是低糖培養(yǎng)條件下的１．２９倍，提??示逆境培養(yǎng)條件能誘導(dǎo)ＨＩＦ－ｌｕ表達(dá)以抵抗不良環(huán)境（圖３．４）。??２５ｍＭＧ?２５ｍＭＧ＋ＬＡＣ?５ｍＭＧ?５ｍＭＧ＋ＬＡＣ??ＭＣＴ１?？＿??１?１．３３?１?１．３２??ＧＬＵＴ１?｜?＊?｜丨一屬丨??１?０．７８?１?１．５８??ＨＩＦ－ｌａ?Ｉ?卜一?Ｉ?卜，Ｉ??１?１．１２?Ｉ?１．２９??Ｔｕｂｕｌｉｎ?１?１?［???圖３．?４培養(yǎng)條件不同對Ｕ２５１細(xì)胞乳酸代謝途徑的影響??Ｆｉｇ３．４?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｕｌｔｕｒｅ?ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ?ｏｎ?ｌａｃｔｉｃ?ａｃｉｄ?ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ?ｐａｔｈｗａｙ?ｉｎ?Ｕ２５１?ｃｅｌｌｓ??（ＤＭＥＭ高糖培養(yǎng)基（２５ｍＭＧ）、高糖加乳酸（２５ｍＭＧ＋１５ｍＭＬＡＣ）；低糖（５ｍＭＧ）、??低糖加乳酸（５ｍＭＧ＋１５ｍＭＬＡＣ）不同營養(yǎng)環(huán)境下對Ｕ２５１細(xì)胞７２小時(shí)的能量代謝的影響

們提取了轉(zhuǎn)染后的Ｔ９８Ｇ細(xì)胞的總蛋白并進(jìn)行ＷＢ實(shí)驗(yàn)，對靶基因的抑制效果進(jìn)行??檢測，結(jié)果顯示３條ｓｉＭＣＴｌ片段對靶蛋白都有一定的抑制效果，尤其ｓｉＭＣＴｌ－３片??段，蛋白表達(dá)水平是對照組的０．６５倍（圖３．５－Ｃ）。細(xì)胞學(xué)指標(biāo)檢測發(fā)現(xiàn)ＭＣＴ１基??因表達(dá)被抑制的細(xì)胞數(shù)目明顯比對照細(xì)胞少，細(xì)胞生長較為緩慢，相對于對照組??ＭＣＴ１表達(dá)的降低明顯抑制Ｔ９８Ｇ細(xì)胞的增殖（圖３．５－Ａ），對應(yīng)的ＡＴＰ水平也比對??照細(xì)胞低（圖３．５－Ｂ）。??２９??


本文編號：3447985