目的:肺炎鏈球菌腦膜炎是兒童嚴(yán)重的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病。居高不下的病死率和神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥的發(fā)生率,可能與炎癥反應(yīng)過度激活,造成腦組織不可逆性損傷有關(guān)。腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（Brain-derived neurotrophic factor,BDNF）是神經(jīng)營養(yǎng)素家族成員,廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng),可以促進(jìn)神經(jīng)元的存活、成熟和生長。我們前期研究發(fā)現(xiàn),抗生素治療肺炎鏈球菌腦膜炎后明顯降低了急性期升高表達(dá)的BDNF,外源性BDNF補充治療后,呈現(xiàn)顯著的神經(jīng)保護(hù)作用。在此基礎(chǔ)上,本研究探討經(jīng)典炎癥信號通路MyD88/NF-κB,在肺炎鏈球菌腦膜炎中是否參與調(diào)節(jié)BDNF的表達(dá),而BDNF/TrkB信號激活后是否又可以對MyD88/NF-κB通路產(chǎn)生作用,從而初步闡明BDNF/TrkB和MyD88/NF-κB信號通路在肺炎鏈球菌腦膜炎中的交互作用。方法:第一部分:采用MyD88基因敲除（myd88-/-）和同窩野生（WT）小鼠,構(gòu)建肺炎鏈球菌腦膜炎模型,造模24 h后,通過組織學(xué)染色觀察腦組織病理變化,ELISA檢測皮層和脾臟組織中炎癥因子的表達(dá),EMSA評估皮層中NF-κB的轉(zhuǎn)錄活性,real-t... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

Kaplan-Meier曲線示兩組腦膜炎組小鼠造模24h后的生存率

myd88-/-腦膜炎組和生理鹽水對照組小鼠腦組織無類似表現(xiàn)。圖2 為造模 24 h 后，光鏡下各組小鼠腦組織切片 HE 染色結(jié)果，WT 腦膜炎組小鼠腦膜翹起，蛛網(wǎng)膜下腔和側(cè)腦室內(nèi)可見大量的炎性滲出物，出血，中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞聚集，并伴有腦實質(zhì)點狀出血。而在 myd88-/-腦膜炎組小鼠中，蛛網(wǎng)膜下腔炎癥反應(yīng)明顯減輕，僅有少量中性粒細(xì)胞滲出，炎性滲出物較 WT 腦膜炎組小鼠明顯減少。兩組生理鹽水對照組小鼠腦組織表面光滑、平整，無腦膜炎病理改變。

圖 3：造模 24 h 后 MyD88 基因缺陷對腦組織切片病理組織學(xué)改變的影響Figure 3. Effect of MyD88 deficiency on histological changes of mouse brains 24 h afterinfection注：圖為造模 24h 后，腦組織切片尼氏染色結(jié)果。KO+PM 為 myd88-/-腦膜炎組，KO+NS 為 myd88-/-生理鹽水組，WT+PM 為 WT 腦膜炎組，WT+NS 為 WT 生理鹽水組。肺炎鏈球菌腦膜炎感染 24 h 后，我們采用 TUNEL 免疫熒光染色進(jìn)一步評估海馬齒狀回神經(jīng)元的凋亡情況。如圖 4 所示，兩組腦膜炎組小鼠分別與其生理鹽水對照組小鼠相比，可發(fā)現(xiàn)肺炎鏈球菌腦膜炎可以顯著導(dǎo)致海馬齒狀回神經(jīng)元發(fā)生凋亡，同時 myd88-/-腦膜炎組小鼠海馬齒狀回 TUNEL 陽性細(xì)胞數(shù)明顯多于WT 腦膜炎組小鼠，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（圖 4，p < 0.05）。兩組生理鹽水對照組小鼠海馬齒狀回幾乎沒有 TUNEL 陽性的細(xì)胞。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子在急性感染性腦損傷腦組織中的表達(dá)[J]. 李玲,水泉祥,俞錫林,尚世強(qiáng),顧偉忠,湯宏峰.  浙江大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2003(05)



本文編號：3447934