該研究探討長鏈非編碼RNA LINC01296（lncRNA LINC01296）是否通過調(diào)控Wnt/β-連環(huán)蛋白（Wnt/β-catenin）信號通路而調(diào)節(jié)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SK-N-SH增殖、凋亡、遷移及侵襲。采用qRT-PCR法檢測神經(jīng)母細(xì)胞瘤組織與瘤旁組織中LINC01296的表達(dá)水平;體外培養(yǎng)SK-N-SH細(xì)胞,隨機(jī)分為Control組（正常培養(yǎng)SK-N-SH細(xì)胞）、si-NC組（si-NC轉(zhuǎn)染至SK-N-SH細(xì)胞）、si-LINC01296組（si-LINC01296轉(zhuǎn)染至SK-N-SH細(xì)胞）、LiCl組（Wnt/β-catenin信號通路激活劑處理SK-N-SH細(xì)胞）、si-LINC01296+LiCl組（si-LINC01296與LiCl共同處理SK-N-SH細(xì)胞）;采用甲基噻唑基四唑（MTT）與克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖能力;Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞遷移及侵襲能力;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率;蛋白免疫印跡法（Western blot）檢測增殖標(biāo)記蛋白細(xì)胞增殖核抗原-67（Ki67）、神經(jīng)型鈣黏蛋白（N-cadherin）、上皮型鈣黏蛋白（E-cadherin）、... 

【文章來源】：中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2020,42(12)CSCD

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料與試劑
        1.1.1 一般資料
        1.1.2 細(xì)胞與試劑
    1.2 方法
        1.2.1 實(shí)驗(yàn)分組
        1.2.2 實(shí)時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)檢測細(xì)胞中LINC01296的表達(dá)水平
        1.2.3 MTT檢測細(xì)胞增殖
        1.2.4 平板克隆形成實(shí)驗(yàn)
        1.2.5 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞遷移與侵襲
        1.2.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率
        1.2.7 蛋白免疫印跡(Western blot)檢測Wnt1、β-catenin、Ki67、N-cadherin、E-cadherin、cleaved-caspase3蛋白表達(dá)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 qRT-PCR檢測LINC01296在各個分組處理的SK-N-SH中的表達(dá)
    2.2 MTT法檢測各個分組處理的SK-N-SH細(xì)胞活性
    2.3 克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測各個分組處理的SK-N-SH克隆形成數(shù)
    2.4 Tranwell檢測各個分組處理的SK-N-SH遷移侵襲數(shù)
    2.5 流式細(xì)胞檢測各個分組處理的SK-N-SH凋亡率
    2.6 各個分組處理的SK-N-SH中Wnt/β-catenin信號通路的表達(dá)
    2.7 Western檢測各個分組處理的SK-N-SH中Ki67、E-cadherin、N-cadherin、cleaved-caspase3蛋白的表達(dá)
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[4]年齡及血清神經(jīng)元烯醇化酶在中、高危神經(jīng)母細(xì)胞瘤病理預(yù)后分型中的預(yù)測價值[J]. 楊深,蔡思雨,馬曉莉,秦紅,韓煒,彭曉霞,王煥民.  中華實(shí)用兒科臨床雜志. 2018 (15)
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碩士論文
[1]激活Notch1和Wnt/β-catenin信號通路對人胃癌細(xì)胞BGC-823增殖的影響[D]. 默娟.遼寧醫(yī)學(xué)院 2012



本文編號：3439862