目的:本研究旨在觀察ApoA-Ⅳ對(duì)大鼠腦缺血再灌注后TNF-α,MMP-9和Lp-PLA2的影響,探討其可能的腦保護(hù)作用及機(jī)制。方法:將180只成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組:假手術(shù)（MS）組,腦缺血再灌注（IR）組,ApoA-Ⅳ小劑量（LD,50μg/kg體重）組和ApoA-Ⅳ大劑量（HD,75μg/kg體重）組,每組45只,每組按缺血2h再灌注后12h,24h,48h分為3個(gè)時(shí)間點(diǎn),每個(gè)時(shí)間點(diǎn)各15只。在IR組,LD組和HD組,采用改良Longa縫合法制備右側(cè)大腦中動(dòng)脈閉塞和再灌注動(dòng)物模型。MS組僅切開皮膚并分離動(dòng)脈。LD組及HD組在缺血2h后再灌注時(shí)陰莖背靜脈注射相應(yīng)劑量ApoA-Ⅳ一次。在大鼠缺血再灌注后的相應(yīng)時(shí)間點(diǎn),用Longa評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)估神經(jīng)功能,并通過氯化三苯基四氮唑（TCC）染色檢測(cè)腦梗死的體積。用ELISA法檢測(cè)血清Lp-PLA2、MMP-9和TNF-α的含量,用免疫組織化學(xué)染色（DAB法）檢測(cè)腦組中TNF-α、Lp-PLA2和MMP-9蛋白的表達(dá)。用qPCR檢查腦組織中TNF-α、Lp-PLA2和MMP-9的mRNA水平的表達(dá)。結(jié)果:1.各組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分的比較:I... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

陰莖背靜脈注射藥物

(1)小劑量 ApoA-Ⅳ的配制：用生理鹽水配成含 ApoA-Ⅳ10μg/ml(2)大劑量 ApoA-Ⅳ的配制：用生理鹽水配成含 ApoA-Ⅳ20μg/ml(3)PBS 緩沖液的配制：稱取 8gNaCl，0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和 0.24KH2PO4 800ml 雙蒸水中，用 NaCl 將溶液的 pH 調(diào)節(jié)至 7.4，最后用蒸餾水定容至 1L，保存?zhèn)溆�。用于免疫組化者，在配置的時(shí)候分別加入 100u/ml 青霉素和鏈霉素之調(diào) pH、定容。(4)2%TTC 溶液配制：稱取 TTC(紅四氮唑粉末)6g，溶于 300mlPBS 溶液中，4光保存。(5)25%烏拉坦配制：1g 烏拉坦加 4ml 生理鹽水。.2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥ApoA-Ⅳ小劑量組按 50μg/kg 體重，大劑量組按 75μg/kg 體重，于缺血 2h 后再時(shí)用 5.5 號(hào)頭皮針陰莖背靜脈注射給藥，給藥物后用約 1ml 生理鹽水沖管保證藥全輸入靜脈內(nèi)（如圖 2）

1.2.5 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型制作采用 Longa[27]線栓法制備右側(cè)大腦中動(dòng)脈(Middle cerebral artery,MCA)阻注大鼠模動(dòng)物模型。(1)大鼠稱重并記錄體重后，用10%葡萄糖、0.9%鹽水和牛奶(三者的比例為按 10ml/kg 體重灌胃，目的是防止術(shù)中出血較多血容量不足及術(shù)后增加營(yíng)養(yǎng)，型后存活率(2) 灌胃后 30 分鐘，按 0.3ml/100g 體重給 25%烏拉坦，通過腹腔注射麻醉麻醉后將四肢固定于大鼠操作板上。(3) 用電動(dòng)剃刀清潔手術(shù)視野的鼠毛，碘伏消毒手術(shù)區(qū)域皮膚，取頸部正右側(cè)約 5mm 縱行切開皮膚大約 3-5cm，逐層鈍性分離皮下組織及肌肉，充分側(cè)頸總動(dòng)脈(Common carotid artery,CCA)，延解剖結(jié)構(gòu)找到右側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈(carotid artery,ICA)及右側(cè)頸外動(dòng)脈(External carotid artery,ECA)，分離迷走神經(jīng)nerve)（圖 4），勿鉗夾迷走神經(jīng)。


本文編號(hào)：3421619