發(fā)布時(shí)間：2021-10-07 05:47

　　目的：研究miRNA-150調(diào)節(jié)大鼠腦梗塞后的血管新生及機(jī)制研究。方法：制作SD大鼠大腦中動(dòng)脈梗塞模型,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測腦梗塞后1,3,7天時(shí)大腦和血清中的miR-150的濃度；原代大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞4-5代后,應(yīng)用糖氧剝奪模擬體外缺血模型,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測糖氧剝奪2,4,6小時(shí)后檢測腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞miR-150的表達(dá)。通過轉(zhuǎn)染（?）miR-150mimic和inhibitor上下調(diào)腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的表達(dá),用基質(zhì)膠實(shí)驗(yàn)檢測內(nèi)皮管腔形成能力,用MTT法或ki-67免疫熒光染色法檢測細(xì)胞增殖能力,用劃痕試驗(yàn)檢測細(xì)胞遷移能力,并建立大鼠永久性腦缺血模型,側(cè)腦室注射miR-150inhibitor或negative inhibitor,觀察神經(jīng)行為學(xué)評分,HE切片觀察梗塞周邊腦血管密度,用FITC標(biāo)記的葡聚糖檢測皮層血流灌注；腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-150inhibitor或negative inhibitor,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法檢測c-myb和VEGF的mRNA水平,用Western blotting檢測上述分子的蛋白水平水平改變；用慢病毒載體的siRN... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
第一篇
    英漢縮略語名詞對照表
    中文摘要
    英文摘要
    前言
    第一部分 大鼠腦缺血后miR-150的變化
        材料與方法
        結(jié)果
        討論
    第二部分 miR-150調(diào)節(jié)大鼠腦梗塞后血管新生
        材料與方法
        結(jié)果
        討論
    第三部分 miR-150通過c-myb,VEGF調(diào)節(jié)腦梗塞后血管新生
        材料與方法
        結(jié)果
        討論
    參考文獻(xiàn)
第二篇
    英漢縮略語名詞對照表
    中文摘要
    英文摘要
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
致謝
附錄 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文



本文編號：3421469