發(fā)布時(shí)間：2021-09-30 18:29

　　目的:探索DREAM在腦缺血再灌注損傷中的作用以及DREAM是否通過(guò)調(diào)控TRPM7參與腦缺血再灌注損傷的潛在機(jī)制。方法:1)建立SD大鼠腦缺血再灌注損傷模型;2)隨機(jī)將SD成年鼠分為Normal組、缺血再灌注（I/R）0h、4h、24h、48h、72h、1w共七組,通過(guò)RT-PCR和Western blotting檢測(cè)梗死核心區(qū)及周?chē)氚祹ЫM織中DREAM的mRNA和蛋白表達(dá)量的變化;3)隨機(jī)將SD成年鼠分為Normal組、I/R組、I/R+瑞格列奈（Repaglinide,RP）0.5mg/kg組和I/R+RP 1mg/kg組,分別腹腔注射給與生理鹽水、溶劑Vehicle、RP 0.5mg/kg、RP 1mg/kg治療,于術(shù)后第1天、3天、5天、7天進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分,術(shù)后第7天用TTC染色進(jìn)行腦梗死體積評(píng)估,用RT-PCR和Western blotting分別檢測(cè)DREAM、凋亡相關(guān)因子Bcl2和Bax在mRNA和蛋白水平表達(dá)的變化;4)原代神經(jīng)元培養(yǎng)體系中,用免疫熒光檢測(cè)DREAM在神經(jīng)元和星型膠質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)及亞細(xì)胞定位;5)建立體外原代神經(jīng)元氧糖剝奪再灌注（OGD/R）模型,... 

【文章來(lái)源】：電子科技大學(xué)四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

瑞格列奈分子結(jié)構(gòu)式[29]

電子科技大學(xué)碩士學(xué)位論文61.5.4DREAM參與腦缺血再灌注損傷的可能機(jī)制DREAM發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制的探究主要分為：1）通過(guò)免疫共沉淀來(lái)探究DREAM與TRPM7二者是否存在相互結(jié)合以及結(jié)合的位點(diǎn)；2）若存在相互結(jié)合，通過(guò)瑞格列奈調(diào)控DREAM的表達(dá)，TRPM7膜表達(dá)等特性是如何變化的？基于以上的擬解決目標(biāo)，本研究中我們?cè)O(shè)計(jì)如圖1-2所示的實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線，旨在探究DREAM在腦缺血再灌注損傷的作用和機(jī)制。圖1-2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和技術(shù)路線

第二章DREAM在SD大鼠腦缺血再灌注損傷中的作用9圖2-1I/R模型線栓法示意圖[41]1、術(shù)前準(zhǔn)備：所用手術(shù)器械均清洗干凈后滅菌烘干，手術(shù)臺(tái)用75%醫(yī)用酒精擦拭，準(zhǔn)備好手術(shù)相關(guān)用品，手術(shù)房間紫外照射滅菌30min。生理鹽水配制7.5%的水合氯醛。2、動(dòng)物麻醉：麻醉前稱(chēng)重，按0.35mL/100g腹腔注射麻醉。3、大腦中動(dòng)脈栓塞：待深度麻醉后，保持仰臥位，將其固定于手術(shù)臺(tái)先用剪刀剪掉頸部多余毛。用碘伏消毒后，左手持鑷子提起頸部皮膚，右手持手術(shù)剪于其頸部正中剪開(kāi)皮膚約2cm。用鑷子順著肌肉進(jìn)行鈍性分離，直至找到右側(cè)頸總動(dòng)脈并將頸總動(dòng)脈與迷走神經(jīng)分離干凈，在頸總動(dòng)脈上備一根線。此過(guò)程中注意不要破環(huán)血管和過(guò)度刺激迷走神經(jīng)。將頸總動(dòng)脈的線輕輕向上提起，順著頸總動(dòng)脈往頭部分離直到分叉處，依次輕輕分離頸外和頸內(nèi)動(dòng)脈并備線。將頸外動(dòng)脈結(jié)扎，頸總動(dòng)脈用動(dòng)脈夾夾閉，頸內(nèi)的線輕輕拉向左側(cè)。在頸總動(dòng)脈上用虹膜剪輕輕剪一個(gè)小破口，有血流溢出即可。線栓由此口進(jìn)入后松開(kāi)頸內(nèi)的線，將線栓輕輕送入頸內(nèi)直至稍稍有阻力，此時(shí)線栓上小黑點(diǎn)的位置大約處于血管分叉處，線


本文編號(hào)：3416422