第一部分膠質(zhì)瘤干細(xì)胞誘導(dǎo)宿主腦膠質(zhì)細(xì)胞癌變的實(shí)驗(yàn)研究目的：探討人膠質(zhì)瘤干細(xì)胞在裸鼠腦內(nèi)組織重構(gòu)過(guò)程中，腫瘤干細(xì)胞與宿主神經(jīng)細(xì)胞的相互作用。方法：將紅色熒光蛋白（RFP）基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)染到已建株的人膠質(zhì)瘤干細(xì)胞SU3，再將轉(zhuǎn)染RFP的SU3細(xì)胞（SU3-RFP）接種于表達(dá)綠色熒光蛋白（GFP）的裸小鼠腦內(nèi)。獲取移植瘤組織，篩選增殖能力強(qiáng)的GFP細(xì)胞，單克隆化后，鑒定細(xì)胞類(lèi)型，測(cè)定細(xì)胞DNA含量，行染色體顯帶分析。并將建系的GFP細(xì)胞H1和H9分別接種于裸小鼠腋下和顱內(nèi)，觀察這兩株細(xì)胞的致瘤率和相關(guān)癌性表型。結(jié)果：在接種30天后的移植瘤組織中，RFP、GFP、RFP/GFP細(xì)胞的比例分別為（88.99±1.46）%、（5.59±0.68）%和（4.11±1.02）%。經(jīng)二次單克隆化的宿主GFP細(xì)胞株H1、H9，在體外表現(xiàn)出無(wú)限增殖、接觸抑制消失、超四倍體等癌細(xì)胞特征，并且表達(dá)少突膠質(zhì)細(xì)胞特異性標(biāo)志物2′，3′-環(huán)腺苷酸-3′-磷酸二酯酶（CNP）。H1和H9細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)致瘤率均為100%，且腫瘤細(xì)胞均向臨近組織廣泛浸潤(rùn)性生長(zhǎng)。結(jié)論在可移植性膠質(zhì)瘤模型中的腫瘤細(xì)胞，并非像傳統(tǒng)觀點(diǎn)那樣均來(lái)源于移... 

【文章來(lái)源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：53 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

SU3-RFP細(xì)胞穩(wěn)定高表達(dá)紅色熒光蛋白

（a） （b）3-RFP/GFP 裸小鼠原位移植瘤，a：多模式小動(dòng)物活體成像系統(tǒng)顯示，移植瘤可見(jiàn)，發(fā)紅色熒光的腫瘤位于小鼠大腦右側(cè)半球；b：共聚焦顯微鏡下可見(jiàn)，腫瘤細(xì)胞與宿主細(xì)胞因發(fā)出不同熒光而清晰可辨 ×200。再培養(yǎng)細(xì)胞的熒光示蹤效果：移植瘤細(xì)胞經(jīng)過(guò)再培養(yǎng)，具有增殖能長(zhǎng)。在熒光相差顯微鏡下，發(fā)出不同熒光的 3 類(lèi)細(xì)胞清晰可辨：（1SU3-RFP 子代細(xì)胞，簡(jiǎn)稱(chēng) RFP 細(xì)胞；（2）發(fā)綠色熒光的宿主細(xì)胞，3）少量共表達(dá)紅色熒光和綠色熒光的融合細(xì)胞，顯示為黃色熒光細(xì)P 細(xì)胞（圖 3）。在流式細(xì)胞儀上測(cè)得這 3 類(lèi)細(xì)胞的比例依次為（88.959±0.68）%和（4.11±1.02）%。

（a） （b原位移植瘤，a：多模式小動(dòng)物活體成的腫瘤位于小鼠大腦右側(cè)半球；b：共胞因發(fā)出不同熒光而清晰可辨 ×200。光示蹤效果：移植瘤細(xì)胞經(jīng)過(guò)再培顯微鏡下，發(fā)出不同熒光的 3 類(lèi)細(xì)，簡(jiǎn)稱(chēng) RFP 細(xì)胞；（2）發(fā)綠色熒色熒光和綠色熒光的融合細(xì)胞，顯流式細(xì)胞儀上測(cè)得這 3 類(lèi)細(xì)胞的4.11±1.02）%。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Differentiation profile of brain tumor stem cells:a comparative study with neural stem cells[J]. Quan Bin Zhang~1 Xiao Yan Ji~1 Qiang Huang~1 Jun Dong~1 Yu De Zhu~1 Qing Lan~1 Neurosurgical Department and Brain Tumor Research Laboratory,Second Affiliated Hospital of Suzhou Universiry,Suzhou 215004,China.  Cell Research. 2006(12)
[2]人腦膠質(zhì)瘤干細(xì)胞移植于表達(dá)綠色熒光蛋白裸小鼠的研究[J]. 吳自成,黃強(qiáng),邵義祥,薛智謀,董軍,刁藝,王愛(ài)東,蘭青.  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2008 (33)



本文編號(hào)：3413592