第一部分膠質(zhì)瘤干細胞誘導宿主腦膠質(zhì)細胞癌變的實驗研究目的：探討人膠質(zhì)瘤干細胞在裸鼠腦內(nèi)組織重構過程中，腫瘤干細胞與宿主神經(jīng)細胞的相互作用。方法：將紅色熒光蛋白（RFP）基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)染到已建株的人膠質(zhì)瘤干細胞SU3，再將轉(zhuǎn)染RFP的SU3細胞（SU3-RFP）接種于表達綠色熒光蛋白（GFP）的裸小鼠腦內(nèi)。獲取移植瘤組織，篩選增殖能力強的GFP細胞，單克隆化后，鑒定細胞類型，測定細胞DNA含量，行染色體顯帶分析。并將建系的GFP細胞H1和H9分別接種于裸小鼠腋下和顱內(nèi)，觀察這兩株細胞的致瘤率和相關癌性表型。結果：在接種30天后的移植瘤組織中，RFP、GFP、RFP/GFP細胞的比例分別為（88.99±1.46）%、（5.59±0.68）%和（4.11±1.02）%。經(jīng)二次單克隆化的宿主GFP細胞株H1、H9，在體外表現(xiàn)出無限增殖、接觸抑制消失、超四倍體等癌細胞特征，并且表達少突膠質(zhì)細胞特異性標志物2′，3′-環(huán)腺苷酸-3′-磷酸二酯酶（CNP）。H1和H9細胞在裸鼠體內(nèi)致瘤率均為100%，且腫瘤細胞均向臨近組織廣泛浸潤性生長。結論在可移植性膠質(zhì)瘤模型中的腫瘤細胞，并非像傳統(tǒng)觀點那樣均來源于移... 

【文章來源】：蘇州大學江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

SU3-RFP細胞穩(wěn)定高表達紅色熒光蛋白

（a） （b）3-RFP/GFP 裸小鼠原位移植瘤，a：多模式小動物活體成像系統(tǒng)顯示，移植瘤可見，發(fā)紅色熒光的腫瘤位于小鼠大腦右側(cè)半球；b：共聚焦顯微鏡下可見，腫瘤細胞與宿主細胞因發(fā)出不同熒光而清晰可辨 ×200。再培養(yǎng)細胞的熒光示蹤效果：移植瘤細胞經(jīng)過再培養(yǎng)，具有增殖能長。在熒光相差顯微鏡下，發(fā)出不同熒光的 3 類細胞清晰可辨：（1SU3-RFP 子代細胞，簡稱 RFP 細胞；（2）發(fā)綠色熒光的宿主細胞，3）少量共表達紅色熒光和綠色熒光的融合細胞，顯示為黃色熒光細P 細胞（圖 3）。在流式細胞儀上測得這 3 類細胞的比例依次為（88.959±0.68）%和（4.11±1.02）%。

（a） （b原位移植瘤，a：多模式小動物活體成的腫瘤位于小鼠大腦右側(cè)半球；b：共胞因發(fā)出不同熒光而清晰可辨 ×200。光示蹤效果：移植瘤細胞經(jīng)過再培顯微鏡下，發(fā)出不同熒光的 3 類細，簡稱 RFP 細胞；（2）發(fā)綠色熒色熒光和綠色熒光的融合細胞，顯流式細胞儀上測得這 3 類細胞的4.11±1.02）%。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Differentiation profile of brain tumor stem cells:a comparative study with neural stem cells[J]. Quan Bin Zhang~1 Xiao Yan Ji~1 Qiang Huang~1 Jun Dong~1 Yu De Zhu~1 Qing Lan~1 Neurosurgical Department and Brain Tumor Research Laboratory,Second Affiliated Hospital of Suzhou Universiry,Suzhou 215004,China.  Cell Research. 2006(12)
[2]人腦膠質(zhì)瘤干細胞移植于表達綠色熒光蛋白裸小鼠的研究[J]. 吳自成,黃強,邵義祥,薛智謀,董軍,刁藝,王愛東,蘭青.  中華醫(yī)學雜志. 2008 (33)



本文編號：3413592