發(fā)布時(shí)間：2021-09-27 19:29

　　目前,來(lái)源于體細(xì)胞的誘導(dǎo)性多功能干細(xì)胞（iPS）細(xì)胞類(lèi)似于胚胎干細(xì)胞,可以表達(dá)多功能性的標(biāo)志物且在體內(nèi)外都具有分化為三個(gè)胚層細(xì)胞的潛能,但胚胎干細(xì)胞應(yīng)用于人體存在倫理學(xué)和免疫排異問(wèn)題,而iPS細(xì)胞不存在倫理學(xué)問(wèn)題又具備胚胎干細(xì)胞的生物特性,同時(shí)從患者自身的細(xì)胞制備而來(lái),所以具有廣泛的應(yīng)用前景。我們前期研究發(fā)現(xiàn),介導(dǎo)iPS細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附的整合素p亞基主要是整合素β1。文獻(xiàn)提示,microRNA-217在細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、血管內(nèi)皮祖細(xì)胞分化和血管新生中起重要作用。因此我們以小鼠股動(dòng)脈內(nèi)膜損傷為模型,研究iPS細(xì)胞在血管內(nèi)膜損傷中的作用及其機(jī)制。第一部分：在成功制備出誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞的前提下進(jìn)行體內(nèi)研究。C57BL/6J8-10周齡雄性小鼠,每組動(dòng)物都復(fù)制標(biāo)準(zhǔn)金屬絲擦傷股動(dòng)脈內(nèi)膜損傷模型,然后分別于術(shù)后當(dāng)天和術(shù)后第三天從尾靜脈注射PBS、MEF（胚胎成纖維細(xì)胞）、iPS,細(xì)胞劑量為6*104個(gè)/次/200μl,動(dòng)物的觀察周期為3周,為了明確iPS細(xì)胞進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)后的去向,我們采用術(shù)后從小鼠尾靜脈注射帶紅色熒光染料PKH的iPS細(xì)胞,觀察24h后留取股動(dòng)脈,共聚焦熒光顯微鏡觀察iPS細(xì)胞在血管... 

【文章來(lái)源】：復(fù)旦大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

-B);而它的相對(duì)表達(dá)量是通過(guò)Westernblotting方法檢測(cè)來(lái)衡量的，發(fā)現(xiàn)H0-1蛋白在邊緣區(qū)腦組織的表達(dá)量明顯高于梗死區(qū)腦組織；Z

點(diǎn)是其在邊緣區(qū)腦組織的表達(dá)量多于梗死區(qū)腦組織。高倍鏡下觀察HO-l蛋白主要分布于神經(jīng)元細(xì)胞，膠質(zhì)細(xì)胞的胞質(zhì)胞膜和胞裝(圖2A-B);而它的相對(duì)表達(dá)量是通過(guò)Western blotting方法檢測(cè)來(lái)衡量的，發(fā)現(xiàn)H0-1蛋白在邊緣區(qū)腦組織的表達(dá)量明顯高于梗死區(qū)腦組織；Znpp可使缺血預(yù)處理后H0-1的表達(dá)量明顯增加，原因可能是Znpp抑制H0-1的表達(dá)活性反饋性引起其表達(dá)量地增加。而IPC 20min組用Hemin處理后HO-l的表達(dá)量相比其它組(除了用DPCPX處理過(guò)的動(dòng)物組外）都明顯減少，而后者發(fā)揮對(duì)腦組織的保護(hù)作用可能是Hemin大大地增加了 H0-1的生物活性以及短時(shí)間缺血預(yù)處理后引起腺苷A1受體的表達(dá)量增加共同發(fā)揮保護(hù)作用。Western bk)t結(jié)果顯示DPCPX可使HO-l蛋白的表達(dá)量明顯降低；Znpp可使缺血預(yù)處理后H0-1的表達(dá)量增加（圖2 C-D)。除DPCPX處理過(guò)的各組外，H0-1在處理過(guò)的IPC2S表達(dá)量都相對(duì)較高，其主要原因可能缺血缺氧誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)引起缺血區(qū)域腦組織HO-l的表達(dá)量明顯增加有關(guān)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)(Endoplasmic Reticulum Stress，ERS)是機(jī)體最常見(jiàn)的一種自我保護(hù)的反映機(jī)制

A2a的分布情況進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)腺苷受體A2a在各組動(dòng)物的邊緣區(qū)腦組織的表達(dá)量明顯高于其梗死區(qū)腦組織（圖4A)；但根據(jù)Western blot方法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)各組動(dòng)物的邊緣區(qū)腦組織的腺苷受體A2a表達(dá)量之間無(wú)明顯差異（圖4 C)。同時(shí)，Westernblot結(jié)果也顯示DPCPX可使梗死區(qū)腦組織腺苷受體A2a蛋白的表達(dá)量比其他組明顯降低（圖4B)。同樣，經(jīng)Hemin處理過(guò)的實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物的梗死區(qū)腦組織腺苷受體A2a蛋白表達(dá)量較對(duì)照組相對(duì)增加（圖4B)。其原因與缺血預(yù)處理所產(chǎn)生腺苷受體A1發(fā)揮保護(hù)作用有關(guān)外，可能與后期MCAO模型制作中缺血缺氧因素密切相關(guān)，腺苷表達(dá)量的增加主要誘導(dǎo)因素是缺血缺氧。同時(shí)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)引起H0-1表達(dá)增加，和腺苷受體之間共同發(fā)揮保護(hù)作用。圖4 A 各組動(dòng)物左側(cè)腦組織A2aR蛋白的分布、議;Ilk 晴,,,?IPC2S+PBS IPC2S+Hem丨n IPC 2S+Znpp 丨PC 2S+DPCPX一 r■.? 丨..?.? ■. - .. '二I ■ ‘ ?，--[：‘ -■ ?,：：？ ^u.1 ? . M. ? \1 ? ?? ? S ?.V . — i j /

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]細(xì)胞粘附分子與心腦血管疾病研究進(jìn)展[J]. 張健,張芹.  長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)(自科版)醫(yī)學(xué)卷. 2008(03)



本文編號(hào)：3410497