發(fā)布時間：2021-09-27 19:29

　　目前,來源于體細胞的誘導性多功能干細胞（iPS）細胞類似于胚胎干細胞,可以表達多功能性的標志物且在體內(nèi)外都具有分化為三個胚層細胞的潛能,但胚胎干細胞應用于人體存在倫理學和免疫排異問題,而iPS細胞不存在倫理學問題又具備胚胎干細胞的生物特性,同時從患者自身的細胞制備而來,所以具有廣泛的應用前景。我們前期研究發(fā)現(xiàn),介導iPS細胞與血管內(nèi)皮細胞粘附的整合素p亞基主要是整合素β1。文獻提示,microRNA-217在細胞運動、血管內(nèi)皮祖細胞分化和血管新生中起重要作用。因此我們以小鼠股動脈內(nèi)膜損傷為模型,研究iPS細胞在血管內(nèi)膜損傷中的作用及其機制。第一部分：在成功制備出誘導性多能干細胞的前提下進行體內(nèi)研究。C57BL/6J8-10周齡雄性小鼠,每組動物都復制標準金屬絲擦傷股動脈內(nèi)膜損傷模型,然后分別于術后當天和術后第三天從尾靜脈注射PBS、MEF（胚胎成纖維細胞）、iPS,細胞劑量為6*104個/次/200μl,動物的觀察周期為3周,為了明確iPS細胞進入動物體內(nèi)后的去向,我們采用術后從小鼠尾靜脈注射帶紅色熒光染料PKH的iPS細胞,觀察24h后留取股動脈,共聚焦熒光顯微鏡觀察iPS細胞在血管... 

【文章來源】：復旦大學上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

-B);而它的相對表達量是通過Westernblotting方法檢測來衡量的，發(fā)現(xiàn)H0-1蛋白在邊緣區(qū)腦組織的表達量明顯高于梗死區(qū)腦組織；Z

點是其在邊緣區(qū)腦組織的表達量多于梗死區(qū)腦組織。高倍鏡下觀察HO-l蛋白主要分布于神經(jīng)元細胞，膠質(zhì)細胞的胞質(zhì)胞膜和胞裝(圖2A-B);而它的相對表達量是通過Western blotting方法檢測來衡量的，發(fā)現(xiàn)H0-1蛋白在邊緣區(qū)腦組織的表達量明顯高于梗死區(qū)腦組織；Znpp可使缺血預處理后H0-1的表達量明顯增加，原因可能是Znpp抑制H0-1的表達活性反饋性引起其表達量地增加。而IPC 20min組用Hemin處理后HO-l的表達量相比其它組(除了用DPCPX處理過的動物組外）都明顯減少，而后者發(fā)揮對腦組織的保護作用可能是Hemin大大地增加了 H0-1的生物活性以及短時間缺血預處理后引起腺苷A1受體的表達量增加共同發(fā)揮保護作用。Western bk)t結果顯示DPCPX可使HO-l蛋白的表達量明顯降低；Znpp可使缺血預處理后H0-1的表達量增加（圖2 C-D)。除DPCPX處理過的各組外，H0-1在處理過的IPC2S表達量都相對較高，其主要原因可能缺血缺氧誘導內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激反應引起缺血區(qū)域腦組織HO-l的表達量明顯增加有關，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激反應(Endoplasmic Reticulum Stress，ERS)是機體最常見的一種自我保護的反映機制

A2a的分布情況進行檢測，發(fā)現(xiàn)腺苷受體A2a在各組動物的邊緣區(qū)腦組織的表達量明顯高于其梗死區(qū)腦組織（圖4A)；但根據(jù)Western blot方法檢測發(fā)現(xiàn)各組動物的邊緣區(qū)腦組織的腺苷受體A2a表達量之間無明顯差異（圖4 C)。同時，Westernblot結果也顯示DPCPX可使梗死區(qū)腦組織腺苷受體A2a蛋白的表達量比其他組明顯降低（圖4B)。同樣，經(jīng)Hemin處理過的實驗組動物的梗死區(qū)腦組織腺苷受體A2a蛋白表達量較對照組相對增加（圖4B)。其原因與缺血預處理所產(chǎn)生腺苷受體A1發(fā)揮保護作用有關外，可能與后期MCAO模型制作中缺血缺氧因素密切相關，腺苷表達量的增加主要誘導因素是缺血缺氧。同時，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激反應引起H0-1表達增加，和腺苷受體之間共同發(fā)揮保護作用。圖4 A 各組動物左側腦組織A2aR蛋白的分布、議;Ilk 晴,,,?IPC2S+PBS IPC2S+Hem丨n IPC 2S+Znpp 丨PC 2S+DPCPX一 r■.? 丨..?.? ■. - .. '二I ■ ‘ ?，--[：‘ -■ ?,：：？ ^u.1 ? . M. ? \1 ? ?? ? S ?.V . — i j /

【參考文獻】：
期刊論文
[1]細胞粘附分子與心腦血管疾病研究進展[J]. 張健,張芹.  長江大學學報(自科版)醫(yī)學卷. 2008(03)



本文編號：3410497