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VEGF在IL-1β開放血腫瘤屏障過程中的作用及其機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2017-05-01 11:14

  本文關(guān)鍵詞:VEGF在IL-1β開放血腫瘤屏障過程中的作用及其機(jī)制,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的研究白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞內(nèi)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、質(zhì)膜微囊結(jié)構(gòu)蛋白caveolin-1和caveolin-2表達(dá)的影響,初步探討IL-1β開放血腫瘤屏障的可能機(jī)制。方法利用Transwell制備體外血腫瘤屏障模型。免疫熒光法和免疫蛋白印跡法檢測(cè)不同劑量(0.1ng/ml,0.25ng/ml,0.5ng/ml,0.75ng/ml,1ng/ml)IL-1β作用于C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞后VEGF蛋白表達(dá)水平的變化。Western blot法動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)IL-1β對(duì)C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞內(nèi)caveolin-1和caveolin-2蛋白表達(dá)水平的影響。跨膜電阻法評(píng)估IL-1β對(duì)血腫瘤屏障通透性的影響。結(jié)果成功建立了體外血腫瘤屏障模型。當(dāng)IL-1β作用于體外血腫瘤屏障模型后,VEGF蛋白的表達(dá)量增加,于60min時(shí)達(dá)到峰值,至120min時(shí)恢復(fù)到初始狀態(tài)。體外血腫瘤屏障模型的跨膜電阻值亦于IL-1β作用60min時(shí)降到最低,而此時(shí)熒光素鈉的透過率最大。另外,我們的研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn),IL-1β作用于血腫瘤屏障模型60min時(shí),腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞中質(zhì)囊微泡結(jié)構(gòu)蛋白caveolin-1和caveolin-2的蛋白表達(dá)量達(dá)到峰值,其后減少,并于120min時(shí)恢復(fù)到未給藥狀態(tài)。結(jié)論IL-1β增加了血腫瘤屏障的通透性,此作用可能是IL-1β通過VEGF上調(diào)了質(zhì)膜微囊結(jié)構(gòu)蛋白caveolin-1和caveolin-2的表達(dá),進(jìn)而增加了血腫瘤屏障的通透性。
【關(guān)鍵詞】:血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 白介素-1β 血腫瘤屏障 質(zhì)囊微泡結(jié)構(gòu)蛋白
【學(xué)位授予單位】:華北理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R739.41
【目錄】:
  • 摘要4-5
  • Abstract5-9
  • 引言9-11
  • 第1章 實(shí)驗(yàn)研究11-31
  • 1.1 主要實(shí)驗(yàn)材料與試劑11-16
  • 1.1.1 主要實(shí)驗(yàn)抗體11
  • 1.1.2 主要實(shí)驗(yàn)耗材11-12
  • 1.1.3 實(shí)驗(yàn)所需溶液配置12-14
  • 1.1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器14-16
  • 1.2 主要實(shí)驗(yàn)方法16-20
  • 1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)16
  • 1.2.2 體外BTB模型的制作16-17
  • 1.2.3 樣本收集與實(shí)驗(yàn)分組17
  • 1.2.4 跨膜電阻測(cè)定和熒光素鈉滲透性檢測(cè)17-18
  • 1.2.5 免疫熒光技術(shù)18
  • 1.2.6 免疫印跡技術(shù)(Westem-blot法)18-20
  • 1.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)20
  • 1.3 結(jié)果20-25
  • 1.3.1 跨膜電阻值評(píng)估體外模型20-21
  • 1.3.2 熒光素鈉評(píng)估體外模型通透性21
  • 1.3.3 Western blotting法檢測(cè)VEGF蛋白表達(dá)變化21-22
  • 1.3.4 VEGF免疫熒光檢測(cè)結(jié)果22-23
  • 1.3.5 跨膜電阻值變化曲線23-24
  • 1.3.6 Western blot法檢測(cè)IL-1β作用后VEGF、caveolin-1 和caveolin-2表達(dá)情況的變化24-25
  • 1.4 討論25-27
  • 1.5 小結(jié)27
  • 參考文獻(xiàn)27-31
  • 第2章 綜述31-42
  • 一、血腫瘤屏障的研究進(jìn)展31-33
  • 二、白細(xì)胞介素 1(Interleukin-1)33-35
  • 三、VEGF 的生物學(xué)特征35-36
  • 四、前景和展望36-37
  • 參考文獻(xiàn)37-42
  • 結(jié)論42-43
  • 致謝43-44
  • 導(dǎo)師簡(jiǎn)介44-45
  • 作者簡(jiǎn)介45-46
  • 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集46

【參考文獻(xiàn)】

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 鄧金木;聚焦超聲聯(lián)合微泡開放血腦屏障的機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年


  本文關(guān)鍵詞:VEGF在IL-1β開放血腫瘤屏障過程中的作用及其機(jī)制,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):338826

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