siRNA干擾人腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子表達(dá)對(duì)U251細(xì)胞凋亡作用機(jī)制研究
本文關(guān)鍵詞:siRNA干擾人腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子表達(dá)對(duì)U251細(xì)胞凋亡作用機(jī)制研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的應(yīng)用特異性腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-小干擾核糖核酸(brain derived neurotrophic factor-small interfering RNA,BDNF-si RNA)下調(diào)U251細(xì)胞中BDNF表達(dá),觀察對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡的影響,并初步探討其相關(guān)機(jī)制。方法將經(jīng)體外培養(yǎng)的人膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U251細(xì)胞按照隨機(jī)數(shù)方法隨機(jī)分為3組,其中A組為對(duì)照組,B組為non-silencing-si RNA組,C組為BDNF-si RNA組,取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞用于本研究。通過(guò)Western blot法檢測(cè)細(xì)胞BDNF、AKt、p AKt蛋白的表達(dá)情況,ELISA檢測(cè)各組BDNF的分泌水平,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組U251細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果用non-silencing-si RNA和BDNF-si RNA分別瞬時(shí)轉(zhuǎn)染U251細(xì)胞后,Western blot可見(jiàn)C組與A、B兩組相比,BDNF、p AKt蛋白表達(dá)明顯降低,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05);A組和B組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。ELISA提示C組U251細(xì)胞培養(yǎng)上清中BDNF含量為(70.20±3.05)pg/ml,與A、B兩組相比有所降低,且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05);A、B兩組相比未見(jiàn)明顯差異。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果可見(jiàn)C組細(xì)胞的凋亡率為(19.62±2.50)%,這與A組(1.63±0.61)%和B組(1.78±0.94)%相比明顯增高,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05);A、B兩組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論人腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)具有促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞存活和抗凋亡的能力。人膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U251細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí),特異性BDNF-si RNA能夠顯著降低U251細(xì)胞BDNF、p AKt表達(dá),同時(shí),干擾BDNF表達(dá)能促進(jìn)U251細(xì)胞的凋亡,研究推測(cè)這與Trk B-Akt通路密切相關(guān),其具體的機(jī)制需要后續(xù)的進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】:siRNA BDNF U251 凋亡
【學(xué)位授予單位】:遼寧醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類(lèi)號(hào)】:R739.41
【目錄】:
- 中文論著摘要4-6
- 英文論著摘要6-8
- 英文縮略語(yǔ)表8-9
- 前言9-10
- 實(shí)驗(yàn)材料與方法10-13
- 結(jié)果13-14
- 討論14-16
- 結(jié)論16-17
- 本研究創(chuàng)新的自我評(píng)價(jià)17-18
- 參考文獻(xiàn)18-21
- 附圖21-22
- 附錄22-34
- 一、文獻(xiàn)綜述22-31
- 參考文獻(xiàn)28-31
- 二、在學(xué)期間科研成績(jī)31-32
- 三、致謝32-33
- 四、個(gè)人簡(jiǎn)介33-34
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本文編號(hào):337493
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