目的探討PTEN抑制神經(jīng)干細(xì)胞增殖的作用,以闡明是否可以通過抑制PTEN蛋白表達來促進神經(jīng)干細(xì)胞增殖。方法取新生24h昆明小鼠海馬組織,分離培養(yǎng)原代神經(jīng)干細(xì)胞,并采用免疫熒光檢測鑒定;將所培養(yǎng)的傳代神經(jīng)干細(xì)胞隨機分組:正常組、缺血模型組、低氧組（低氧+缺血模型組）、Lip2000組（低氧+缺血模型組+Lip2000空轉(zhuǎn)染組）、PTEN轉(zhuǎn)染組（低氧+缺血模型組+Ad5-PTEN轉(zhuǎn)染組）、PTEN干擾組（低氧+缺血模型組+Lip2000+PTENsiRNA干擾組）,檢測0、6、24、36、48h不同時間點各組神經(jīng)干細(xì)胞的增殖情況,同時檢測PTEN轉(zhuǎn)染后PTEN蛋白在各組神經(jīng)干細(xì)胞的表達情況,以及對PI3K-Akt信號通路上標(biāo)志性蛋白表達的影響。結(jié)果免疫熒光檢測Nestin以鑒定神經(jīng)干細(xì)胞球,在熒光顯微鏡下觀察到綠色明亮且典型的細(xì)胞球,球內(nèi)可見清晰結(jié)構(gòu)。MTT測定發(fā)現(xiàn)低氧組、Lip2000組培養(yǎng)36h時神經(jīng)干細(xì)胞出現(xiàn)明顯增殖,與模型組、PTEN轉(zhuǎn)染組及PTEN干擾組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）,其中PTEN干擾組的細(xì)胞增殖又較模型組、PTEN轉(zhuǎn)染組明顯,差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義（P... 

【文章來源】：西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2016,37(02)北大核心

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1動物與試劑
    1.2小鼠神經(jīng)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定
    1.3免疫熒光鑒定海馬組織原代神經(jīng)干細(xì)胞
    1.4缺血缺氧細(xì)胞模型的制備[5]及實驗分組
    1.5 PTEN RNA干擾(RNAi)技術(shù)及轉(zhuǎn)染
    1.6 MTT法測神經(jīng)干細(xì)胞增殖情況
    1.7 Western blot檢測PTEN、PI3K、Akt、bad、p-Akt、p-bad蛋白表達情況
    1.8統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1神經(jīng)干細(xì)胞的免疫熒光鑒定
    2.2 MTT法測定神經(jīng)干細(xì)胞增殖情況
    2.3不同組別神經(jīng)干細(xì)胞PTEN的表達情況
    2.4轉(zhuǎn)染PTEN對細(xì)胞中PI3K、Akt、bad以及p-Akt、p-bad表達的影響
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]PTEN、E-cd和MMP-9在人腦膠質(zhì)瘤的表達和意義[J]. 張軍普,許雯,劉向輝.  山東大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2010(02)



本文編號：3374099