發(fā)布時(shí)間：2021-08-31 03:29

　　目的探討PTEN抑制神經(jīng)干細(xì)胞增殖的作用,以闡明是否可以通過(guò)抑制PTEN蛋白表達(dá)來(lái)促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞增殖。方法取新生24h昆明小鼠海馬組織,分離培養(yǎng)原代神經(jīng)干細(xì)胞,并采用免疫熒光檢測(cè)鑒定;將所培養(yǎng)的傳代神經(jīng)干細(xì)胞隨機(jī)分組:正常組、缺血模型組、低氧組（低氧+缺血模型組）、Lip2000組（低氧+缺血模型組+Lip2000空轉(zhuǎn)染組）、PTEN轉(zhuǎn)染組（低氧+缺血模型組+Ad5-PTEN轉(zhuǎn)染組）、PTEN干擾組（低氧+缺血模型組+Lip2000+PTENsiRNA干擾組）,檢測(cè)0、6、24、36、48h不同時(shí)間點(diǎn)各組神經(jīng)干細(xì)胞的增殖情況,同時(shí)檢測(cè)PTEN轉(zhuǎn)染后PTEN蛋白在各組神經(jīng)干細(xì)胞的表達(dá)情況,以及對(duì)PI3K-Akt信號(hào)通路上標(biāo)志性蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果免疫熒光檢測(cè)Nestin以鑒定神經(jīng)干細(xì)胞球,在熒光顯微鏡下觀察到綠色明亮且典型的細(xì)胞球,球內(nèi)可見(jiàn)清晰結(jié)構(gòu)。MTT測(cè)定發(fā)現(xiàn)低氧組、Lip2000組培養(yǎng)36h時(shí)神經(jīng)干細(xì)胞出現(xiàn)明顯增殖,與模型組、PTEN轉(zhuǎn)染組及PTEN干擾組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）,其中PTEN干擾組的細(xì)胞增殖又較模型組、PTEN轉(zhuǎn)染組明顯,差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P... 

【文章來(lái)源】：西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2016,37(02)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1動(dòng)物與試劑
    1.2小鼠神經(jīng)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定
    1.3免疫熒光鑒定海馬組織原代神經(jīng)干細(xì)胞
    1.4缺血缺氧細(xì)胞模型的制備[5]及實(shí)驗(yàn)分組
    1.5 PTEN RNA干擾(RNAi)技術(shù)及轉(zhuǎn)染
    1.6 MTT法測(cè)神經(jīng)干細(xì)胞增殖情況
    1.7 Western blot檢測(cè)PTEN、PI3K、Akt、bad、p-Akt、p-bad蛋白表達(dá)情況
    1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1神經(jīng)干細(xì)胞的免疫熒光鑒定
    2.2 MTT法測(cè)定神經(jīng)干細(xì)胞增殖情況
    2.3不同組別神經(jīng)干細(xì)胞PTEN的表達(dá)情況
    2.4轉(zhuǎn)染PTEN對(duì)細(xì)胞中PI3K、Akt、bad以及p-Akt、p-bad表達(dá)的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]PTEN、E-cd和MMP-9在人腦膠質(zhì)瘤的表達(dá)和意義[J]. 張軍普,許雯,劉向輝.  山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2010(02)



本文編號(hào)：3374099