第一部分MRI引導(dǎo)聚焦超聲靶向可逆開放小鼠BBB目的建立MRI引導(dǎo)超聲靶向微泡破裂（ultrasound-targeted microbubbledestruction，UTMD）開放小鼠血腦屏障（blood-brain barrier，BBB）的模型，并為后續(xù)MRI引導(dǎo)UTMD介導(dǎo)基因體內(nèi)轉(zhuǎn)染篩選出最優(yōu)的超聲參數(shù)。方法將15只昆明小鼠隨機分成三組，分布接受MRI引導(dǎo)1.1MHz聚焦超聲聯(lián)合微泡以1.1W、2.2W、4.4W不同強度輻照小鼠腦部40s，通過靶點MRI增強掃描、伊文氏藍（EB）染色和HE組織學(xué)檢查了解不同超聲強度下BBB開放的程度、24h后恢復(fù)狀態(tài)和組織學(xué)變化，篩選出對腦組織影響最小的超聲參數(shù)。結(jié)果1．MRI增強掃描圖像：在超聲輻照結(jié)束當(dāng)時及24h兩個時間點對鼠腦行增強掃描，結(jié)果顯示：聲功率1.1W組在兩時間點均無增強；2.2W組在超聲輻照后靶區(qū)當(dāng)即出現(xiàn)明顯的小范圍增強，在24h后已未見增強；4.4W組在超聲輻照后靶區(qū)出現(xiàn)明顯的大范圍增強，且24h后仍可在該區(qū)域見片狀增強信號，但范圍有所減小。2．EB染色：超聲輻照后立即行EB染色，聲功率1.1W組靶區(qū)腦組織未見藍染，2.... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

MRI引導(dǎo)UTMD輻照鼠腦示意圖

各組的腦組織均只能看到藍染的細(xì)胞功實現(xiàn)外源基因 EGFP 在腦內(nèi)的表達檢測 EGFP 表達部位EGFP 在腦組織內(nèi)的表達部位，我們采異性標(biāo)記物 β-Tubulin III 的分布關(guān)系共區(qū)域化（見附圖 5），表明超聲聯(lián)胞漿內(nèi)表達。測定RNA的OD260／280比值在1.8-2.凝膠電泳結(jié)果見28S，18S兩條帶清晰PCR的要求(見圖 2)。

圖 3 RT-PCR 檢測各組 EGFP mRNA 的含量（A 示根據(jù)處理因素的不同分為對照組（Con 組）、質(zhì)粒組（P 組）、質(zhì)粒＋微泡組（P+M組）、質(zhì)粒＋超聲組（P+U 組）、質(zhì)粒＋超聲＋微泡組（P+U+M 組），B 為根據(jù)觀察時間點的不同，分為 0 h/ 6 h/ 12 h/ 24 h/ 48 h/ 5 d/ 7 d/ 14 d/ 28 d 組）Fig.3 Use of Real-time PCR to investigate the changes of EGFP mRNA expression (relative toGAPDH mRNA).(A) EGFP mRNA expression in brain of different treatment groups. Con: control group; P:Plasmid group; P+M: Plasmid + microbubble group; P+U: Plasmid + US group; P+U+M:Plasmid + US + microbubble group. **P < 0.01 compared to Con, P, P+M, P+U group. (B)EGFP mRNA expression in brain of P+U+M group at 0 h, 6 h, 12 h, 24 h, 48 h, 5 d, 7 d, 14 dand 28 d after transfection,**P < 0.01 compared to 0 h, 6 h, 12 h, 24 h, 5 d, 7 d, 14 d and 28 dgroup.（n=5）2.6 Western blot 檢測各組 EGFP 蛋白的表達情況

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3373345