目的研究氯化鋰-匹羅卡品癲癇模型SD大鼠海馬CA3區(qū)神經(jīng)元軸突起始段（axon initial segment, AIS） Nav1.6和ankyrin G的表達(dá)分布及其變化規(guī)律,探討AIS的可塑性變化在癲癇發(fā)病中的作用。方法6-8周齡健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為模型組（N=76只）和對照組（N=36只）,模型組大鼠予腹腔注射氯化鋰-匹羅卡品致癇,對照組大鼠予生理鹽水假處理。分別于癲癇持續(xù)狀態(tài)（status epilepticus, SE）誘導(dǎo)成功后24小時（急性期）、7天（靜止期）和60天（慢性期）三個時間點取模型組和對照組大鼠制備海馬冰凍切片及提取海馬CA3區(qū)總蛋白和mRNA。采用免疫熒光雙標(biāo)染色、Western blot及Real-Time PCR方法檢測Nav,1.6和ankyrin G在大鼠海馬CA3區(qū)神經(jīng)元的共定位及其表達(dá)量的變化。結(jié)果免疫熒光染色顯示,Nav,1.6和ankyrin G在海馬CA3區(qū)的錐體神經(jīng)元AIS區(qū)共表達(dá),而在胞膜區(qū)僅有較低密度的Nav,1.6表達(dá)；實驗組和對照組AIS的染色模式在SE后各期均一致。Western blot檢測顯示Nav,1.6在急性期和慢... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
目錄
縮略詞表
第一章 前言
第二章 材料與方法
    2.1 動物及主要試劑
    2.2 主要儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 動物分組與癲癇模型制備
        2.3.2 實驗時間點的選擇
        2.3.3 冰凍切片的制備
        2.3.4 海馬組織的分離與保存
        2.3.5 免疫熒光雙標(biāo)
        2.3.6 Western Blot檢測
        2.3.7 Real-Time PCR檢測
    2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
第三章 實驗結(jié)果
    3.1 氯化鋰-匹羅卡品癲癇動物模型
        3.1.1 行為學(xué)觀察
        3.1.2 造模數(shù)據(jù)統(tǒng)計
    3.2 Na_v1.6和ankyrin G在海馬CA3區(qū)的共定位表達(dá)
    3.3 海馬CA3區(qū)錐體神經(jīng)元Na_v1.6和ankyrin G蛋白的表達(dá)
    3.4 海馬CA3區(qū)組織Na_v1.6和ankyrin G mRNA的表達(dá)
        3.4.1 RNA的完整性檢測結(jié)果
        3.4.2 熔解曲線和擴(kuò)增曲線
        3.4.3 SCN8A和ANK-3 mRNA的表達(dá)水平
第四章 討論
    4.1 氯化鋰-匹羅卡品癲癇模型的建立
    4.2 神經(jīng)元AIS區(qū)Na_v1.6和ankyrin G的共表達(dá)
    4.3 海馬CA3區(qū)Na_v1.6蛋白及其mRNA的表達(dá)變化
    4.4 海馬CA3區(qū)ankyrin G蛋白及其mRNA的表達(dá)變化
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
在讀期間完成的論文



本文編號：3336313