腓骨肌萎縮癥（Charcot-Marie-Tooth, CMT）亦稱為遺傳性運(yùn)動(dòng)感覺(jué)神經(jīng)病（HMSN）,具有明顯的遺傳異質(zhì)性,根據(jù)臨床和電生理特征,CMT分為脫髓鞘型和軸突型。軸突周圍蛋白（periaxin）是非致密髓鞘有髓施萬(wàn)細(xì)胞特異表達(dá)蛋白,根據(jù)mRNA不同的剪切方式,periaxin基因可以編碼兩種長(zhǎng)短不同的蛋白,分別為L(zhǎng)-periaxin （L-PRX）和S-periaxin （S-PRX）。L-PRX蛋白一般包含PDZ結(jié)構(gòu)域、NLS結(jié)構(gòu)域、repeat結(jié)構(gòu)域以及C末端的acidic結(jié)構(gòu)域；S-PRX蛋白只含有PDZ結(jié)構(gòu)域。Periaxin基因突變將導(dǎo)致脫髓鞘型腓骨肌萎縮癥4F亞型（CMT4F）的發(fā)生。Periaxin蛋白是一個(gè)胞內(nèi)蛋白,從表達(dá)之初到最終定位在成熟髓鞘的遠(yuǎn)軸端的膜脂筏中,不斷發(fā)生細(xì)胞內(nèi)位置的變化。Peraxin蛋白亞細(xì)胞定位的變化可能與其穩(wěn)定髓鞘的功能密切相關(guān)。本文圍繞L-PRX蛋白的PDZ結(jié)構(gòu)域展開(kāi)以下工作。首先,將來(lái)源于人的L-PRX及其PDZ結(jié)構(gòu)域缺失突變體基因,克隆至真核表達(dá)載體pEGFP載體,并在大鼠雪旺細(xì)胞（RSC96）中表達(dá),結(jié)果顯示PDZ結(jié)構(gòu)域存... 

【文章來(lái)源】：山西大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 綜述
    1.1 腓骨肌萎縮癥
    1.2 軸突周圍蛋白(periaxin)
        1.2.1 核定位信號(hào)(NLS)
        1.2.2 PDZ domain
        1.2.3 L-PRX蛋白的repeat domain和acidic domain
    1.3 受體調(diào)節(jié)的核輸入與核輸出機(jī)制
    參考文獻(xiàn)
第二章 L-PRX亞細(xì)胞定位及其核輸出序列的分析鑒定
    2.1 前言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 菌株和質(zhì)粒
        2.2.2 細(xì)胞系
        2.2.3 主要的酶和生化試劑
    2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.4 實(shí)驗(yàn)方法
        2.4.1 載體構(gòu)建
        2.4.2 細(xì)胞培養(yǎng)及基因轉(zhuǎn)染
        2.4.3 生物信息學(xué)分析
        2.4.4 定點(diǎn)突變
        2.4.5 Leptomycin B(LMB)處理細(xì)胞
    2.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.5.1 EGFP融合表達(dá)載體的構(gòu)建
        2.5.2 L-PRX-PDZ domain介導(dǎo)L-PRX蛋白的細(xì)胞質(zhì)定位
        2.5.3 L-PRX-PDZ與cyclinAl融合蛋白定位于細(xì)胞質(zhì)中
        2.5.4 L-PRX-PDZ domain含有亮氨酸富集型NES信號(hào)
        2.5.5 Leptomycin B(LMB)抑制L-PRX及L-PRX-PDZ-cyclinAl蛋白的核輸出
        2.5.6 L_(83,85)/Q突變使L-PRX和L-PRX-PDZ-cyclinAl蛋白聚集于細(xì)胞核內(nèi)
    2.6 討論
    參考文獻(xiàn)
第三章 H_2O_2氧化調(diào)節(jié)L-PRX PDZ domain二聚化分析
    3.1 前言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 菌株和質(zhì)粒
        3.2.2 細(xì)胞系
        3.2.3 主要的酶和生化試劑
    3.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.4 實(shí)驗(yàn)方法
        3.4.1 載體構(gòu)建
        3.4.2 重組蛋白的表達(dá)與純化
        3.4.3 H_2O_2保溫處理L-PRX-PDZ蛋白
        3.4.4 Western blot
    3.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.5.1 L-PRX PDZ體外經(jīng)H_2O_2處理可以形成二聚體
        3.5.2 H_2O_2氧化介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)L-PRX蛋白二聚化
    3.6 討論
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)況及聯(lián)系方式


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Periaxin蛋白中PDZ結(jié)構(gòu)域的重組表達(dá)與純化[J]. 石亞偉,任燕,劉俊林,楊廷.  山西大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2012(01)
[2]腓骨肌萎縮癥研究概述[J]. 孫順昌,張海鷗.  中國(guó)神經(jīng)精神疾病雜志. 2010(01)
[3]軸突影響施萬(wàn)細(xì)胞分化與整合素α6β4表達(dá)[J]. 鐘延豐,任碧和,王立軍,由江峰,王盛蘭,王薇,楊金輝,胡白和.  北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2001(02)



本文編號(hào)：3326993