腓骨肌萎縮癥（Charcot-Marie-Tooth, CMT）亦稱為遺傳性運動感覺神經(jīng)�。℉MSN）,具有明顯的遺傳異質性,根據(jù)臨床和電生理特征,CMT分為脫髓鞘型和軸突型。軸突周圍蛋白（periaxin）是非致密髓鞘有髓施萬細胞特異表達蛋白,根據(jù)mRNA不同的剪切方式,periaxin基因可以編碼兩種長短不同的蛋白,分別為L-periaxin （L-PRX）和S-periaxin （S-PRX）。L-PRX蛋白一般包含PDZ結構域、NLS結構域、repeat結構域以及C末端的acidic結構域；S-PRX蛋白只含有PDZ結構域。Periaxin基因突變將導致脫髓鞘型腓骨肌萎縮癥4F亞型（CMT4F）的發(fā)生。Periaxin蛋白是一個胞內(nèi)蛋白,從表達之初到最終定位在成熟髓鞘的遠軸端的膜脂筏中,不斷發(fā)生細胞內(nèi)位置的變化。Peraxin蛋白亞細胞定位的變化可能與其穩(wěn)定髓鞘的功能密切相關。本文圍繞L-PRX蛋白的PDZ結構域展開以下工作。首先,將來源于人的L-PRX及其PDZ結構域缺失突變體基因,克隆至真核表達載體pEGFP載體,并在大鼠雪旺細胞（RSC96）中表達,結果顯示PDZ結構域存... 

【文章來源】：山西大學山西省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 綜述
    1.1 腓骨肌萎縮癥
    1.2 軸突周圍蛋白(periaxin)
        1.2.1 核定位信號(NLS)
        1.2.2 PDZ domain
        1.2.3 L-PRX蛋白的repeat domain和acidic domain
    1.3 受體調(diào)節(jié)的核輸入與核輸出機制
    參考文獻
第二章 L-PRX亞細胞定位及其核輸出序列的分析鑒定
    2.1 前言
    2.2 實驗材料
        2.2.1 菌株和質粒
        2.2.2 細胞系
        2.2.3 主要的酶和生化試劑
    2.3 實驗儀器
    2.4 實驗方法
        2.4.1 載體構建
        2.4.2 細胞培養(yǎng)及基因轉染
        2.4.3 生物信息學分析
        2.4.4 定點突變
        2.4.5 Leptomycin B(LMB)處理細胞
    2.5 實驗結果
        2.5.1 EGFP融合表達載體的構建
        2.5.2 L-PRX-PDZ domain介導L-PRX蛋白的細胞質定位
        2.5.3 L-PRX-PDZ與cyclinAl融合蛋白定位于細胞質中
        2.5.4 L-PRX-PDZ domain含有亮氨酸富集型NES信號
        2.5.5 Leptomycin B(LMB)抑制L-PRX及L-PRX-PDZ-cyclinAl蛋白的核輸出
        2.5.6 L_(83,85)/Q突變使L-PRX和L-PRX-PDZ-cyclinAl蛋白聚集于細胞核內(nèi)
    2.6 討論
    參考文獻
第三章 H_2O_2氧化調(diào)節(jié)L-PRX PDZ domain二聚化分析
    3.1 前言
    3.2 實驗材料
        3.2.1 菌株和質粒
        3.2.2 細胞系
        3.2.3 主要的酶和生化試劑
    3.3 實驗儀器
    3.4 實驗方法
        3.4.1 載體構建
        3.4.2 重組蛋白的表達與純化
        3.4.3 H_2O_2保溫處理L-PRX-PDZ蛋白
        3.4.4 Western blot
    3.5 實驗結果
        3.5.1 L-PRX PDZ體外經(jīng)H_2O_2處理可以形成二聚體
        3.5.2 H_2O_2氧化介導細胞內(nèi)L-PRX蛋白二聚化
    3.6 討論
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡況及聯(lián)系方式


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Periaxin蛋白中PDZ結構域的重組表達與純化[J]. 石亞偉,任燕,劉俊林,楊廷.  山西大學學報(自然科學版). 2012(01)
[2]腓骨肌萎縮癥研究概述[J]. 孫順昌,張海鷗.  中國神經(jīng)精神疾病雜志. 2010(01)
[3]軸突影響施萬細胞分化與整合素α6β4表達[J]. 鐘延豐,任碧和,王立軍,由江峰,王盛蘭,王薇,楊金輝,胡白和.  北京大學學報(醫(yī)學版). 2001(02)



本文編號：3326993