MiR-126在ApoE -/- 小鼠頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2021-08-01 05:19
目的:觀察micro RNA-126(miR-126)及靶基因血管細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1)在載脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的表達(dá),探討mi R-126在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成中發(fā)揮的作用。方法:取8周齡Apo E-/-小鼠24只,隨機(jī)分為對(duì)照組(假手術(shù)+普通飲食)、模型組(頸動(dòng)脈套管術(shù)+高脂飲食)各12只。術(shù)后8周檢測血漿中總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇的水平,HE染色觀察頸總動(dòng)脈斑塊面積/血管面積,熒光定量PCR(RT-PCR)檢測斑塊內(nèi)mi R-126、VCAM-1 m RNA水平的表達(dá),western blot檢測VCAM-1蛋白水平的表達(dá)。結(jié)果:與對(duì)照組相比,模型組血脂水平明顯升高(P<0.05);模型組的頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊面積/血管面積明顯大于對(duì)照組(P<0.01);mi R-126表達(dá)水平在模型組明顯低于對(duì)照組(P<0.01);VCAM-1的m RNA及蛋白的表達(dá)在模型組明顯高于對(duì)照組(P<0.01)。結(jié)論:mi R-126在頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的表達(dá)下調(diào)在斑塊形成過程中發(fā)揮重要作用。
【文章來源】:青島大學(xué)山東省
【文章頁數(shù)】:41 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
第1章 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 動(dòng)物
1.2 主要藥品和試劑
1.3 主要儀器設(shè)備
第2章 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 頸動(dòng)脈粥樣硬化ApoE~(-/-)小鼠模型制備
2.2 血清血脂水平檢測
2.3 病理學(xué)分析
2.4 RNA提取及實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR)
2.4.1 RNA的提取
2.4.2 cDNA的合成
2.4.3 RT-PCR
2.5 Western blot檢測VCAM-1 的蛋白表達(dá)
2.5.0 頸總動(dòng)脈粥樣硬化斑塊總蛋白質(zhì)提取
2.5.1 試劑配制
2.5.2 配制濃縮膠和分離膠
2.5.3 上樣及SDS-PAGE凝膠電泳
2.5.4 轉(zhuǎn)膜
2.5.5 封閉
2.5.6 孵育抗體
2.5.7 顯色
2.6 統(tǒng)計(jì)分析
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 動(dòng)物體質(zhì)量及血脂水平檢測結(jié)果
3.2 頸總動(dòng)脈病理學(xué)改變
3.3 miR-126和VCAM-1 mRNA水平的表達(dá)
3.4 VCAM-1 蛋白水平的表達(dá)
第4章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Chungtaejeon, a Korean fermented tea, prevents the risk of atherosclerosis in rats fed a high-fat atherogenic diet[J]. Keshav Raj Paudel,Ung-Won Lee,Dong-Wook Kim. Journal of Integrative Medicine. 2016(02)
[2]Relationship between arterial atheromatous plaque morphology and platelet-associated miR-126 and miR-223 expressions[J]. Heng-Song Tian,Qing-Guo Zhou,Fang Shao. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2015(04)
[3]缺血性卒中不同亞型患者血漿miRNAs表達(dá)譜變化分析[J]. 仲倩維,馬愛軍,潘旭東,楊淑娜,王蘭,張璋,龐萌. 中華神經(jīng)科雜志. 2015 (02)
[4]MiRNA-146a通過NF-κB依賴的途徑促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞增殖[J]. 熊瑋,董少紅,袁建輝,李江華,劉建軍,徐新云. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(02)
本文編號(hào):3314895
【文章來源】:青島大學(xué)山東省
【文章頁數(shù)】:41 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
第1章 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 動(dòng)物
1.2 主要藥品和試劑
1.3 主要儀器設(shè)備
第2章 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 頸動(dòng)脈粥樣硬化ApoE~(-/-)小鼠模型制備
2.2 血清血脂水平檢測
2.3 病理學(xué)分析
2.4 RNA提取及實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR)
2.4.1 RNA的提取
2.4.2 cDNA的合成
2.4.3 RT-PCR
2.5 Western blot檢測VCAM-1 的蛋白表達(dá)
2.5.0 頸總動(dòng)脈粥樣硬化斑塊總蛋白質(zhì)提取
2.5.1 試劑配制
2.5.2 配制濃縮膠和分離膠
2.5.3 上樣及SDS-PAGE凝膠電泳
2.5.4 轉(zhuǎn)膜
2.5.5 封閉
2.5.6 孵育抗體
2.5.7 顯色
2.6 統(tǒng)計(jì)分析
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 動(dòng)物體質(zhì)量及血脂水平檢測結(jié)果
3.2 頸總動(dòng)脈病理學(xué)改變
3.3 miR-126和VCAM-1 mRNA水平的表達(dá)
3.4 VCAM-1 蛋白水平的表達(dá)
第4章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Chungtaejeon, a Korean fermented tea, prevents the risk of atherosclerosis in rats fed a high-fat atherogenic diet[J]. Keshav Raj Paudel,Ung-Won Lee,Dong-Wook Kim. Journal of Integrative Medicine. 2016(02)
[2]Relationship between arterial atheromatous plaque morphology and platelet-associated miR-126 and miR-223 expressions[J]. Heng-Song Tian,Qing-Guo Zhou,Fang Shao. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2015(04)
[3]缺血性卒中不同亞型患者血漿miRNAs表達(dá)譜變化分析[J]. 仲倩維,馬愛軍,潘旭東,楊淑娜,王蘭,張璋,龐萌. 中華神經(jīng)科雜志. 2015 (02)
[4]MiRNA-146a通過NF-κB依賴的途徑促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞增殖[J]. 熊瑋,董少紅,袁建輝,李江華,劉建軍,徐新云. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(02)
本文編號(hào):3314895
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