研究背景多年以來,國內(nèi)外促進(jìn)中樞神經(jīng)修復(fù)的方法主要集中在調(diào)控中樞微環(huán)境中的神經(jīng)生長因子、抑制因子^[2]和增加神經(jīng)元內(nèi)在生長潛能^[3]等方面,尤其是聯(lián)合運(yùn)用可實(shí)現(xiàn)一定程度的再生和功能恢復(fù)^[4,5],但效果仍不滿意。近年來研究發(fā)現(xiàn),中樞神經(jīng)疾病或損傷會觸發(fā)多種修復(fù)過程,包括神經(jīng)發(fā)生、軸突萌芽、突觸發(fā)生、血管生成、軸突再生和再髓鞘化等^[6],這其中小膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)揮了十分關(guān)鍵的作用^[7]。目前,調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥,已逐漸成為中樞神經(jīng)損傷修復(fù)新的研究方向。一、中樞神經(jīng)炎癥在神經(jīng)損傷后發(fā)揮促進(jìn)繼發(fā)損傷（M1）和促進(jìn)再生修復(fù)（M2）的雙重作用,促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞向M2型極化,可減少炎癥繼發(fā)性損傷和促進(jìn)神經(jīng)修復(fù)。近年研究發(fā)現(xiàn),中樞神經(jīng)疾病或損傷過程中小膠質(zhì)細(xì)胞激活會產(chǎn)生兩種表型—M1型和M2型。M1型也叫經(jīng)典激活,主要發(fā)揮促炎作用。M1型細(xì)胞主要通過釋放蛋白酶和活性氧等機(jī)制執(zhí)行宿主抵抗病原體的功能,也能損害健康的神經(jīng)元;M2型也叫替代激活,主要發(fā)揮抗炎作用,M2型細(xì)胞具有神經(jīng)保護(hù)、減輕炎癥... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：122 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

CD11b蛋白和Iba1蛋白在正常和視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜的表達(dá)Fig1-1ExpressionofCD11bandIba1proteininretinaofintactandfollowingopticnervecrush

陸軍軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文27圖1-2CD11b蛋白和Iba1蛋白在正常和視神經(jīng)損傷后視神經(jīng)的表達(dá)Fig1-2ExpressionofCD11bandIba1proteininintactandinjuredopticnerve圖1-2說明:免疫熒光雙重標(biāo)記法檢測CD11b蛋白和Iba1蛋白在完整靜息狀態(tài)下和視神經(jīng)損傷后7天視神經(jīng)的表達(dá)的代表性圖像。a在靜息狀態(tài)的完整視神經(jīng)中，CD11b蛋白表達(dá)陽性信號幾乎不可見。bIba1+小膠質(zhì)細(xì)胞體型纖細(xì)呈長梭形，沿視神經(jīng)長軸均勻分布，與神經(jīng)纖維走行基本一致。c,hDAPI染核，顯示視神經(jīng)損傷后視神經(jīng)總細(xì)胞數(shù)量明顯增多。dabc的合并圖像。e圖像d中盒狀區(qū)域的高倍放大圖，顯示Iba1+小膠質(zhì)細(xì)胞胞體細(xì)小呈長梭形，沿視神經(jīng)長軸均勻分布，與神經(jīng)纖維走行基本一致（細(xì)箭頭所示）。f視神經(jīng)損傷后7天視神經(jīng)CD11b+細(xì)胞明顯增多。gIba1+小膠質(zhì)細(xì)胞明顯增多，胞體增大呈阿米巴樣，在視神經(jīng)中分布排列紊亂。ifgh的合并圖像，顯示絕大部分CD11b+細(xì)胞與Iba1+細(xì)胞共染色。j圖像i中盒狀區(qū)域的高倍放大圖，顯示大部分CD11b+Iba1+小膠質(zhì)細(xì)胞呈阿米巴樣，胞體明顯變大，分支變粗變短，少數(shù)細(xì)胞表現(xiàn)為肥大的“變形蟲樣”吞噬細(xì)胞（粗箭頭所示）。標(biāo)尺：a,b,c,d,f,g,h,i=30μm;e,j=10μm。二、WesternBlot實(shí)驗(yàn)(一)視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜CD11b蛋白表達(dá)變化在總蛋白上樣量均為40μg、內(nèi)參照β-actin條帶亮度基本相同的前提下，視神經(jīng)損傷后7天(7dpc),14天(14dpc),28天(28dpc)組視網(wǎng)膜組織中均檢測到分布于170KDa左右明顯條帶，而正常對照(sham)組視網(wǎng)膜組織中條帶非常微弱。各組內(nèi)參β-actin蛋白條帶均分布于43KDa左右。Image-ProPlus5.0圖像處理軟件分析結(jié)果表明：CD11b蛋白在正常靜息狀態(tài)下的視網(wǎng)膜中表達(dá)量很低，視神經(jīng)損傷后7天,14天,28天組CD11b蛋白表達(dá)均顯著高于正常對照組(*p<0.01,n=6)；視神?

陸軍軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文28但14天組較28天組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖1-3）。圖1-3WesternBlot檢測正常和視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜CD11b蛋白的表達(dá)Fig1-3DetectionofCD11bproteininretinaofintactandfollowingopticnervecrushbyWesternBlot圖1-3說明:CD11b蛋白在正常靜息狀態(tài)下的視網(wǎng)膜中低表達(dá)，視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜CD11b蛋白表達(dá)量明顯升高，傷后7天達(dá)最高峰，傷后14天較7天表達(dá)明顯下降，至傷后28天仍維持在較高水平。*p<0.01，n=6。(二)視神經(jīng)損傷后視神經(jīng)CD11b蛋白表達(dá)變化在總蛋白上樣量均為40μg、內(nèi)參照β-actin條帶亮度基本相同的前提下，視神經(jīng)損傷后7天,14天,28天組視神經(jīng)組織中均檢測到分布于170KDa左右明顯條帶，而正常對照組視神經(jīng)組織中幾乎無信號。各組內(nèi)參β-actin蛋白條帶均分布于43KDa左右。Image-ProPlus5.0圖像處理軟件分析結(jié)果表明：CD11b蛋白在正常對照組視神經(jīng)中幾乎無表達(dá)，視神經(jīng)損傷后7天,14天,28天組CD11b蛋白表達(dá)均顯著高于正常對照組(*p<0.01,n=6)；視神經(jīng)損傷后7天CD11b蛋白表達(dá)達(dá)最高峰，14天組較7天組CD11b蛋白表達(dá)量明顯下降(*p<0.01,n=6)，但14天組較28天組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖1-4）。


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