已知帕金森病（Parkinson‘s disease,PD）的主要病理是中腦黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的特異性與持續(xù)性死亡,而引起這一死亡的病因機(jī)制至今不清楚。眾多研究者推測,這一死亡和多巴胺（dopamine,DA）的代謝有密切關(guān)系。正常情況下,多巴胺能神經(jīng)元通過末梢將釋放的遞質(zhì)DA重吸收入細(xì)胞,與胞內(nèi)合成的DA一起,由囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)體轉(zhuǎn)運(yùn)至囊泡中儲(chǔ)存,從而避免DA被氧化。當(dāng)某些原因?qū)е录?xì)胞內(nèi)游離DA上升時(shí),游離DA極易受氧化應(yīng)激而形成多巴胺醌（dopamine quinone,DAQ）,DAQ可與含巰基的蛋白結(jié)合形成醌蛋白而導(dǎo)致細(xì)胞毒性,引起多巴胺能神經(jīng)元的特異性死亡。為驗(yàn)證DA的醌毒性作用和抗醌氧化的細(xì)胞保護(hù)作用,本論文運(yùn)用人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系（SH-SY5Y）作為多巴胺能細(xì)胞模型,研究增加外源游離DA對(duì)細(xì)胞內(nèi)醌蛋白的累積效應(yīng)以及對(duì)細(xì)胞生存率的影響。在此基礎(chǔ)上,探討DA細(xì)胞毒性的可能途徑。已知蘿卜硫素（sulforaphane,SF）可以誘導(dǎo)醌氧化還原酶（NQO1）的表達(dá),而NQO1具有降低細(xì)胞內(nèi)醌化物的作用,因而論文探討了SF對(duì)DA毒性的預(yù)防作用。實(shí)驗(yàn)主要分為兩部分:首先,我們通過增加外源性... 

【文章來源】：華東師范大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度DA處理后檢測SH-SY5Y細(xì)胞存活率以不加DA（DA濃度

不同濃度DA分別作用于SH-SY5Y細(xì)胞和HEK293細(xì)胞后檢測細(xì)胞存活率以DA濃度0為對(duì)照組，分別比較不同濃度DA（80μM,160μM,240μM,320μM,400μM,480μM,1000μM）對(duì)細(xì)胞存活率的影響

華東師范大學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位論文16240μM和320μM出現(xiàn)非常顯著和極顯著差異（圖1.3），結(jié)果說明細(xì)胞內(nèi)的游離多巴胺增加在細(xì)胞毒性中起重要作用。圖1.3DA和RE共同作用后檢測SH-SY5Y細(xì)胞存活率以只加DA，不加RE為對(duì)照組（黑色柱狀圖），分別比較RE4μM與不同濃度DA（80μM,160μM,240μM,320μM)共同作用（藍(lán)色柱狀圖）對(duì)細(xì)胞存活率的影響。以不加RE和DA的空白對(duì)照組OD570處測量吸光值為1，比較加入不同濃度DA或RE與DA共同作用后，相應(yīng)孔在OD570處測量吸光值。其中，橫坐標(biāo)中RE表示只加RE4μM(綠色柱狀圖)，solvent表示只加了RE的溶劑（黃色柱狀圖）。本實(shí)驗(yàn)重復(fù)6次，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果用mean±SD(**表示P<0.01，***表示P<0.001)。Fig.1.3Theeffectsofdifferentconcentrationsofdopamine(DA),RE4μMtreatmentorbothonSH-SY5Ycellviability(MTT).Theeffectsofdifferentconcentrationsofdopamineoncellviabilitywerecomparedwithcontrolgroup(withoutRE,thebarchartofblack).Theabsorbanceofblankcontrolgroup(withoutDAorRE)atOD570wasas1.AfteraddingdifferentconcentrationsofDA(80μM,160μM,240μM,320μM),RE4μMtreatmentorboth(thebarchartofblue),theabsorbancewasmeasuredatOD570.TheREofabscissarepresentsRE4μMonlyadded(thebarchartofgreen).ThesolventrepresentsthesolventofRE(thebarchartofyellow).Theexperimentwasrepeated6times,andthestatisticalresultswereexpressedasmean±SD(**P<0.01,***P<0.001).


本文編號(hào)：3254117