p27kip1在施萬細(xì)胞分化中的作用研究
發(fā)布時(shí)間:2021-06-20 16:57
目的1.研究p27kip1在坐骨神經(jīng)夾傷過程中的表達(dá)變化及細(xì)胞定位情況,初步探討p27kip1與坐骨神經(jīng)夾傷后施萬細(xì)胞分化的關(guān)系。2.研究p27kip1在施萬細(xì)胞分化中的表達(dá)變化及其調(diào)控機(jī)制,明確p27kip1在施萬細(xì)胞分化中的作用。方法1.構(gòu)建SD大鼠坐骨神經(jīng)夾傷模型,通過Western blot、免疫熒光等方法觀察p27kip1在坐骨神經(jīng)夾傷后的表達(dá)變化、組織分布與細(xì)胞定位,結(jié)合施萬細(xì)胞生物學(xué)行為,初步明確p27kip1在施萬細(xì)胞分化過程中的作用。2.分離培養(yǎng)施萬細(xì)胞,建立環(huán)磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)誘導(dǎo)的施萬細(xì)胞分化模型,分析施萬細(xì)胞分化過程中p27kip1的表達(dá)變化及其細(xì)胞定位改變。在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步通過干預(yù)p27kip1的表達(dá),分析其在施萬細(xì)胞分化過程中的作用,如形態(tài)學(xué)改變、分化標(biāo)記表達(dá)的影響。結(jié)果1.在大體水平,Western blot結(jié)果顯示在坐骨神經(jīng)夾傷之后,p27kip1表達(dá)明顯下調(diào),于1d達(dá)到最低,后逐漸上調(diào),在1W達(dá)到最高,然后下調(diào),在4W恢復(fù)正常。分化指標(biāo)P0在損傷后逐漸上調(diào),于1w達(dá)到最高。免疫熒光雙標(biāo)...
【文章來源】:南通大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
目錄
摘要
Abstract
第一章 緒論
1.1 課題來源、研究的目的和意義
1.2 國(guó)內(nèi)外研究概況
1.2.1 國(guó)外研究概況
1.2.2 國(guó)內(nèi)研究概況
1.3 論文的主要研究?jī)?nèi)容
第二章 材料與方法
2.1 研究資料及儀器設(shè)備
2.1.1 研究對(duì)象
2.1.2 主要儀器與試劑
主要儀器
主要試劑
2.2 實(shí)驗(yàn)流程與方法
2.2.1 建立大鼠坐骨神經(jīng)夾傷模型
2.2.2 標(biāo)本處理及冰凍切片
2.2.3 Western blot
2.2.4 免疫組織熒光
2.2.5 大鼠原代施萬細(xì)胞的培養(yǎng)及純化
2.2.6 p27kip1基因RNA干擾質(zhì)粒的構(gòu)建與鑒定
2.2.7 細(xì)胞增殖分析
2.2.8 利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染施萬細(xì)胞
2.2.9 細(xì)胞免疫熒光
2.2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第三章 結(jié)果
3.1 p27kip1在夾傷后坐骨神經(jīng)中的表達(dá)變化
3.2 p27kip1在大鼠坐骨神經(jīng)中細(xì)胞的定位
3.3 施萬細(xì)胞體外分化過程中p27kip1的表達(dá)變化
3.4 p27kip1在cAMP誘導(dǎo)的施萬細(xì)胞的變化中的作用
3.5 p27kip1在施萬細(xì)胞分化過程中的亞細(xì)胞定位
3.6 p27Klp1在施萬細(xì)胞分化過程中量的調(diào)節(jié)
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
英文縮寫詞表
綜述
綜述參考文獻(xiàn)
在攻讀碩士學(xué)位期間公開發(fā)表的論文
致謝
附文一
附文二
本文編號(hào):3239583
【文章來源】:南通大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
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摘要
Abstract
第一章 緒論
1.1 課題來源、研究的目的和意義
1.2 國(guó)內(nèi)外研究概況
1.2.1 國(guó)外研究概況
1.2.2 國(guó)內(nèi)研究概況
1.3 論文的主要研究?jī)?nèi)容
第二章 材料與方法
2.1 研究資料及儀器設(shè)備
2.1.1 研究對(duì)象
2.1.2 主要儀器與試劑
主要儀器
主要試劑
2.2 實(shí)驗(yàn)流程與方法
2.2.1 建立大鼠坐骨神經(jīng)夾傷模型
2.2.2 標(biāo)本處理及冰凍切片
2.2.3 Western blot
2.2.4 免疫組織熒光
2.2.5 大鼠原代施萬細(xì)胞的培養(yǎng)及純化
2.2.6 p27kip1基因RNA干擾質(zhì)粒的構(gòu)建與鑒定
2.2.7 細(xì)胞增殖分析
2.2.8 利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染施萬細(xì)胞
2.2.9 細(xì)胞免疫熒光
2.2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第三章 結(jié)果
3.1 p27kip1在夾傷后坐骨神經(jīng)中的表達(dá)變化
3.2 p27kip1在大鼠坐骨神經(jīng)中細(xì)胞的定位
3.3 施萬細(xì)胞體外分化過程中p27kip1的表達(dá)變化
3.4 p27kip1在cAMP誘導(dǎo)的施萬細(xì)胞的變化中的作用
3.5 p27kip1在施萬細(xì)胞分化過程中的亞細(xì)胞定位
3.6 p27Klp1在施萬細(xì)胞分化過程中量的調(diào)節(jié)
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
英文縮寫詞表
綜述
綜述參考文獻(xiàn)
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致謝
附文一
附文二
本文編號(hào):3239583
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