目的：采用miRNA芯片技術(shù)檢測難治性癲癇患者腦組織中miRNA表達(dá)變化，篩選出表達(dá)差異有意義的miRNA，探討其在難治性癲癇發(fā)病中的作用及意義，為難治性癲癇治療提供實驗依據(jù)。方法：1.標(biāo)本獲得實驗組：從已建立的重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院難治性癲癇患者術(shù)后腦組織庫中隨機(jī)抽取6例樣本。對照組：重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院非癲癇患者術(shù)后腦組織庫中隨機(jī)抽取4例樣本。2.應(yīng)用Trizol試劑提取總RNA，甲醛瓊脂糖凝膠電泳測定RNA完整性及分光光度計分別于240nm、260nm和280nm測定吸光度值以判定總RNA純度及濃度。3.miRNA微陣列芯片研究難治性癲癇患者腦組織與非癲癇患者腦組織中miRNA表達(dá)差異，篩選出倍數(shù)變化（F/C）≥1.5且P＜0.05的miRNA并對表達(dá)差異的miRNA進(jìn)行聚類分析。結(jié)果：通過miRNA芯片篩選出表達(dá)差異顯著miRNA基因13個，其中上調(diào)基因11個，分別是miR-10a、miR-374c、miR-376a、miR-425、miR-9、miR-224、hsa-miR-26a、let-7c、let-7a、miR-23c及miR-378c，下調(diào)基因2個，分別是miR... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

RNA凝膠電泳圖

圖 4.1 表達(dá)差異 miRNA 火山圖Figure 4.1 volcano plot of differential miRNA注：橫 標(biāo)為 log2（F/C）， 標(biāo)為-log (P value)，紅色圓點即為變化超過 1.5 倍且 PiRNA。類分析由于各樣本間 miRNA 表達(dá)差異不同，將所得芯片數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類分析促使越相似的 miRNA 聚在一起，得到樹狀圖并以熱圖方式顯示使結(jié)果更加直，以此分辨不同樣本間不同 miRNA 表達(dá)差異，見圖 8.1。

18圖 5.1 表達(dá)差異 miRNAs 聚類分析圖igure 5.1 Hierarchical clustering images of differential miRNAs 個 miRNA, 每 代表 個樣本。左側(cè)為 miRNA 聚 樹，頂端為樣本聚 樹。紅色示色示相對較低表達(dá)。頂端為顏色標(biāo)尺，從左至右依次標(biāo)書差異表達(dá)由低到高。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3228009