發(fā)布時(shí)間：2021-06-13 17:44

　　目的：采用miRNA芯片技術(shù)檢測(cè)難治性癲癇患者腦組織中miRNA表達(dá)變化，篩選出表達(dá)差異有意義的miRNA，探討其在難治性癲癇發(fā)病中的作用及意義，為難治性癲癇治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：1.標(biāo)本獲得實(shí)驗(yàn)組：從已建立的重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院難治性癲癇患者術(shù)后腦組織庫(kù)中隨機(jī)抽取6例樣本。對(duì)照組：重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院非癲癇患者術(shù)后腦組織庫(kù)中隨機(jī)抽取4例樣本。2.應(yīng)用Trizol試劑提取總RNA，甲醛瓊脂糖凝膠電泳測(cè)定RNA完整性及分光光度計(jì)分別于240nm、260nm和280nm測(cè)定吸光度值以判定總RNA純度及濃度。3.miRNA微陣列芯片研究難治性癲癇患者腦組織與非癲癇患者腦組織中miRNA表達(dá)差異，篩選出倍數(shù)變化（F/C）≥1.5且P＜0.05的miRNA并對(duì)表達(dá)差異的miRNA進(jìn)行聚類(lèi)分析。結(jié)果：通過(guò)miRNA芯片篩選出表達(dá)差異顯著miRNA基因13個(gè)，其中上調(diào)基因11個(gè)，分別是miR-10a、miR-374c、miR-376a、miR-425、miR-9、miR-224、hsa-miR-26a、let-7c、let-7a、miR-23c及miR-378c，下調(diào)基因2個(gè)，分別是miR... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

RNA凝膠電泳圖

圖 4.1 表達(dá)差異 miRNA 火山圖Figure 4.1 volcano plot of differential miRNA注：橫 標(biāo)為 log2（F/C）， 標(biāo)為-log (P value)，紅色圓點(diǎn)即為變化超過(guò) 1.5 倍且 PiRNA。類(lèi)分析由于各樣本間 miRNA 表達(dá)差異不同，將所得芯片數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類(lèi)分析促使越相似的 miRNA 聚在一起，得到樹(shù)狀圖并以熱圖方式顯示使結(jié)果更加直，以此分辨不同樣本間不同 miRNA 表達(dá)差異，見(jiàn)圖 8.1。

18圖 5.1 表達(dá)差異 miRNAs 聚類(lèi)分析圖igure 5.1 Hierarchical clustering images of differential miRNAs 個(gè) miRNA, 每 代表 個(gè)樣本。左側(cè)為 miRNA 聚 樹(shù)，頂端為樣本聚 樹(shù)。紅色示色示相對(duì)較低表達(dá)。頂端為顏色標(biāo)尺，從左至右依次標(biāo)書(shū)差異表達(dá)由低到高。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]肝細(xì)胞癌組織中microRNA表達(dá)譜研究[J]. 王傳璽,宋偉,李增軍,宋寶,吳德華,孫愛(ài)民,陳龍華.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(05)
[2]MicroRNA在人結(jié)腸癌干細(xì)胞中的表達(dá)譜[J]. 鄒健,于曉峰,虞陽(yáng),張穎,史冬梅,董潔,李天奇,劉雪靜.  世界華人消化雜志. 2010(02)
[3]與心臟相關(guān)的miRNAs研究[J]. 劉博,秦永文.  國(guó)際心血管病雜志. 2009(01)
[4]32例原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性淋巴瘤臨床分析及文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[J]. 易基群,林桐榆,何友兼,黃慧強(qiáng),夏忠軍,夏云飛,徐瑞華,郭穎,管忠震.  癌癥. 2006(04)



本文編號(hào)：3228009