第一部分小膠質(zhì)細(xì)胞P2X4受體對慢性偏頭痛中樞敏化的影響目的偏頭痛慢性化的病理生理機(jī)制不清楚。該部分研究用于探索小膠質(zhì)細(xì)胞P2X4受體在反復(fù)硝酸甘油（Nitroglycerin,NTG）刺激誘導(dǎo)的慢性偏頭痛小鼠中樞敏化中的作用,為慢性偏頭痛的治療提供新的方向。材料與方法1.通過隔日腹腔注射10mg/kg NTG構(gòu)建慢性偏頭痛小鼠模型,持續(xù)9天,總共5次（即第1,3,5,7,9天是給藥時間）。于每次給藥前及給藥后2小時用電子von Frey纖維絲檢測小鼠后肢足底的機(jī)械性痛閾值。給藥前的痛閾值為基礎(chǔ)痛閾值,給藥后的閾值為急性痛閾值。同時檢測小鼠三叉神經(jīng)脊束核尾側(cè)亞核（TNC）部位P2X4受體的表達(dá)變化趨勢及小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物Iba1的數(shù)量及形態(tài)改變。2.通過腹腔注射P2X4受體特異性抑制劑5-BDBD觀察模型小鼠后肢痛閾值的變化及TNC部位與中樞敏化相關(guān)指標(biāo)的變化,如磷酸化-細(xì)胞外調(diào)節(jié)激酶（p-ERK）,c-Fos和降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）的表達(dá)水平。3.模擬NTG的給藥方式,腹腔隔日注射P2X4受體激動劑IVM（0.1mg/kg,1mg/kg）。在實驗的第1,3,5,7,9天,每次IV... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：119 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

反復(fù)NTG刺激可激活TNC部位的小膠質(zhì)細(xì)胞Fig1-2.EffectofrecurrentNTGstimulationonmicrogliaresponseintheTNC（a）點(diǎn)狀區(qū)域即為小鼠TNC部位

圖 1-3. 米諾環(huán)素對反復(fù) NTG 刺激誘導(dǎo)的痛覺過敏和小膠質(zhì)細(xì)胞活化的影響Fig 1-3. Effect of minocycline on mechanical hypersensitivity and microglia response afterrecurrent NTG stimulation.米諾環(huán)素治療可以逆轉(zhuǎn) NTG 誘導(dǎo)的基礎(chǔ)痛閾值的降低，但對急性痛閾值的降低無效。(a)各組實驗小鼠后肢基礎(chǔ)機(jī)械性痛閾值。（b）各組小鼠后肢急性痛閾值。Two-way RM ANOVAn=8/group。 ***p < 0.001 compared to the VEH-VEH group。（c）NTG 組和 NTG+Mino 組

1-4. 反復(fù) NTG 刺激增加 TNC 部位 P2X4 受體的蛋白和 mRNA 表達(dá)水Fig 1-4.Expression profile of P2X4R after chronic administration of NTG 圖片顯示 P2X4 受體不同時間點(diǎn)的蛋白表達(dá)水平。（b）以β-actin 作為參變化的統(tǒng)計分析。One-way ANOVA， n=5/group, **p < 0.01, ***p < c）在第 9 天時，NTG 組和 VEH 組 P2X4 受體的 mRNA 表達(dá)水平。tern blot assay for the protein expression of P2X4R on different daynd Tukey’s Multiple comparison test. n=5/group, **p < 0.01, ***p < 0.00up. (c) qRT-PCR analysis for the mRNA expression of P2X4R betwee the chronic NTG group treated with NTG for nine days. Unpaired t-test01 versus the VEH group.4 受體與小膠質(zhì)細(xì)胞的共定位情況有研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，P2X4 受體在中樞神經(jīng)系統(tǒng)位于小膠質(zhì)細(xì)胞上一種特異性的受體。我們使用了雙標(biāo)免疫熒光的方法檢測了 P2


本文編號：3219774