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miR-542-3p調(diào)控Rho基因?qū)δX缺血再灌注損傷的保護(hù)作用

發(fā)布時間:2021-06-06 06:39
  目的探討microRNA-542-3p (miR-542-3p)靶向調(diào)控Rho基因?qū)π∈竽X缺血再灌注損傷(CIRI)的保護(hù)作用。方法將小鼠隨機(jī)分為正常組、假手術(shù)組和模型組,構(gòu)建CIRI模型(MCAO)。用TUNEL染色檢測3組小鼠海馬組織中海馬神經(jīng)元的凋亡情況,用實(shí)時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)和蛋白免疫印跡法(Western Blot)分別檢測各組小鼠海馬組織的miR-542-3p和Rho的mRNA和蛋白表達(dá)水平;分離提取3組小鼠海馬神經(jīng)元體外傳代培養(yǎng),選擇第三代細(xì)胞分為:正常組、空白組、陰性對照組、miR-542-3p mimic組、miR-542-3p inhibitor組、siRNA-Rho組和miR-542-3p inhibitor+siRNA-Rho組,雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證miR-542-3p和Rho的靶向關(guān)系,用qRT-PCR和Western Blot法分別檢測各組細(xì)胞中miR-542-3p、Rho的mRNA和蛋白表達(dá)水平,四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT)檢測各組細(xì)胞轉(zhuǎn)染后的增殖能力變化情況,流式細(xì)胞術(shù)檢測各組細(xì)胞轉(zhuǎn)染后的凋亡情況。結(jié)果與正常組相比,模... 

【文章來源】:西北藥學(xué)雜志. 2020,35(06)

【文章頁數(shù)】:7 頁

【部分圖文】:

miR-542-3p調(diào)控Rho基因?qū)δX缺血再灌注損傷的保護(hù)作用


HE染色 (200×)

凋亡,海馬,神經(jīng)元,情況


小鼠造模7 d后,處死,進(jìn)行TUNEL細(xì)胞凋亡檢測,凋亡陽性細(xì)胞呈深棕色,細(xì)胞核萎縮,染色質(zhì)聚邊,胞漿不著色,見圖2。由圖2可知,正常組和假手術(shù)組平均各視野的陽性細(xì)胞數(shù)與模型組比較均明顯減少,模型組凋亡率明顯高于正常組和假手術(shù)組。3.3 qRT-PCR和Western Blot測定mRNA和蛋白表達(dá)水平

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]鳶尾苷元對血管緊張素Ⅱ作用下心肌成纖維細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J]. 陳雪斌,汪鳳蘭,張冠茂.  西北藥學(xué)雜志. 2020(01)
[2]miRNA-29c在大鼠腦缺血再灌注神經(jīng)損傷中的保護(hù)作用與機(jī)制[J]. 葉蓓,李曼,程翔,陳建珍,賀芳,張立光.  中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2016(11)
[3]電針對局灶性腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)血管單元的保護(hù)作用[J]. 韓永升,徐銀,韓詠竹,徐磊,劉向國,劉自兵,王頻.  針刺研究. 2013(03)



本文編號:3213818

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