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HSPB1在U251細(xì)胞株及其干細(xì)胞中的差異表達(dá)對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-05-16 08:12
  目的研究熱休克蛋白家族(HSPs)在U251細(xì)胞株及其膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的差異表達(dá),探討熱休克蛋白B1在U251細(xì)胞株和其干細(xì)胞中的表達(dá),觀察對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的影響。方法1采用DMEM/DF12無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)U251細(xì)胞,獲得U251干細(xì)胞。并應(yīng)用細(xì)胞免疫熒光染色法通過檢測CD133和Nestin,從而對(duì)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞進(jìn)行鑒定。2應(yīng)用iTRAQ技術(shù)對(duì)U251細(xì)胞株及其干細(xì)胞進(jìn)行HSPs差異性分析。3選用不同濃度的卡莫司汀對(duì)U251細(xì)胞株進(jìn)行干預(yù),篩選出最佳濃度(細(xì)胞抑制率在50%的濃度)。4實(shí)驗(yàn)分U251細(xì)胞株、U251細(xì)胞株+卡莫司汀、U251干細(xì)胞、U251干細(xì)胞+卡莫司汀應(yīng)用MTT法、Western blot和RT-PCR(Real-time PCR)觀察經(jīng)卡莫司汀干預(yù)后,腫瘤細(xì)胞增殖與HSPB1蛋白、基因表達(dá)變化的關(guān)系,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果1通過2-3周的無血清培養(yǎng),成功培養(yǎng)出U251干細(xì)胞。運(yùn)用CD133和Nestin兩種標(biāo)志物對(duì)U251干細(xì)胞進(jìn)行鑒定,同時(shí)表達(dá)CD133和Nestin的細(xì)胞達(dá)到95%以上。2U251干細(xì)胞與U251細(xì)胞有4個(gè)熱休克蛋白呈現(xiàn)差異性表達(dá),分別為HSPA... 

【文章來源】:重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】:44 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
英漢縮略語名詞對(duì)照
中文摘要
英文摘要
前言
1 材料和方法
2 結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]抑制UPS對(duì)缺血再灌注大鼠心肌Hsp27和TNF-α的影響[J]. 戴翠蓮,羅開良,陳章榮,趙靜.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(22)



本文編號(hào):3189324

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