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人源臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對腦缺血再灌注小鼠神經(jīng)功能及神經(jīng)炎癥的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-05-13 15:53
  目的探究人源臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對腦缺血再灌注損傷小鼠神經(jīng)功能及神經(jīng)炎癥的影響。方法將96只野生型C57BL/6小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、磷酸鹽緩沖液(PBS)處理組、WJ-MSCs細(xì)胞移植組,每組32只。PBS處理組和細(xì)胞移植組小鼠通過線栓法構(gòu)建大腦中動(dòng)脈阻塞再灌注模型;術(shù)后24h,通過腦立體定位技術(shù)注射細(xì)胞懸液或PBS溶液。每組取6只小鼠,于細(xì)胞移植后對小鼠腹腔注射BrdU溶液,持續(xù)5d。于術(shù)前及術(shù)后1、6、12、24d對各組小鼠進(jìn)行改良神經(jīng)功能損傷評分;術(shù)后6d時(shí),采用神經(jīng)元標(biāo)志物NeuN免疫熒光單標(biāo)記染色技術(shù)檢測缺血側(cè)大腦梗死灶及梗死灶周圍區(qū)皮質(zhì)神經(jīng)元的變性丟失情況;采用RT-qPCR技術(shù)檢測各組小鼠缺血側(cè)大腦半球炎癥因子的表達(dá)量;采用小膠質(zhì)細(xì)胞/巨噬細(xì)胞標(biāo)志物Iba1及增殖標(biāo)記物BrdU免疫熒光雙標(biāo)記染色技術(shù)檢測小膠質(zhì)細(xì)胞/巨噬細(xì)胞的活化和增殖情況。結(jié)果與PBS處理組相比,WJ-MSCs細(xì)胞移植組小鼠神經(jīng)功能顯著改善(P<0.01),且位于缺血側(cè)大腦梗死灶及梗死灶周圍區(qū)皮質(zhì)的存活神經(jīng)元數(shù)目顯著增多(P<0.01)。與PBS處理組相比,WJ-MSCs細(xì)胞移植組小鼠缺血側(cè)腦組... 

【文章來源】:同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2020,41(05)

【文章頁數(shù)】:9 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組
    1.2 試劑和儀器
    1.3 方法
        1.3.1 小鼠大腦中動(dòng)脈阻塞再灌注模型制備
        1.3.2 WJ-MSCs的體外貼壁培養(yǎng)
        1.3.3 細(xì)胞移植
        1.3.4 小鼠神經(jīng)功能評分
        1.3.5 RT-qPCR
        1.3.6 免疫組織熒光染色
        1.3.7 共聚焦顯微鏡圖像采集與細(xì)胞計(jì)數(shù)
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié) 果
    2.1 WJ-MSCs表面標(biāo)志物鑒定及三系分化潛能檢測結(jié)果
    2.2 WJ-MSCs顯著改善腦缺血再灌注損傷小鼠的神經(jīng)功能
    2.3 WJ-MSCs顯著降低大腦梗死灶及梗死灶周圍區(qū)皮質(zhì)神經(jīng)元變性丟失
    2.4 神經(jīng)炎癥相關(guān)基因表達(dá)量的RT-qPCR檢測結(jié)果
    2.5 WJ-MSCs顯著抑制大腦梗死灶及梗死灶周圍區(qū)皮質(zhì)小膠質(zhì)細(xì)胞/巨噬細(xì)胞的活化和增殖
3 討 論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]過表達(dá)趨化因子受體2促進(jìn)脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞對皮膚損傷的修復(fù)[J]. 祁旻龍,朱良,Yuri Ciervo,徐俊.  同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2018(05)
[2]細(xì)胞因子在腦缺血損傷中的作用研究進(jìn)展[J]. 王芳,霍星,王國年,劉晶晶,劉天琳.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2015(07)
[3]TGF-β與缺血性腦卒中[J]. 盧昌均,曾鑒源.  中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用. 2014(08)
[4]小鼠線栓法局灶性腦缺血再灌注模型的改良[J]. 孫艷,張洹,譚廣銷.  暨南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版). 2005(06)
[5]IL-1β在缺血致腦損傷中的主要作用機(jī)制[J]. 陳蔚,鄒長江.  生理科學(xué)進(jìn)展. 2002(01)



本文編號:3184295

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