發(fā)布時間：2021-05-10 15:45

　　目的利用GDNF及dbcAMP對大鼠胚胎神經(jīng)干細胞進行定向分化,從而獲得相當(dāng)數(shù)量的多巴胺能細胞,為下一步的細胞移植打下基礎(chǔ)。方法分離培養(yǎng)孕14¹6 d Wistar大鼠大腦神經(jīng)干細胞,通過傳代培養(yǎng)來檢測其自我更新能力,并對其進行Nestin及Brdu蛋白鑒定,利用GDNF及dbcAMP對大鼠神經(jīng)干細胞進行定向分化,通過免疫細胞化學(xué)及免疫熒光等方法檢測TH陽性細胞表達。結(jié)果培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞均表達Nestin及Brdu,體外培養(yǎng)1 w后神經(jīng)球的數(shù)量顯著增加,體積增大;GDNF及dbcAMP均能提高TH表達,與血清對照組比較有顯著差異（P<0.05）。結(jié)論在神經(jīng)營養(yǎng)因子的作用下,分離的神經(jīng)干細胞能夠快速增殖并形成神經(jīng)球,GDNF及dbcAMP均有誘導(dǎo)神經(jīng)干細胞向多巴胺能神經(jīng)元分化的作用,其中GDNF在20μg/L時誘導(dǎo)效能最高,dbcAMP在200μmol/L時誘導(dǎo)效能最高,二者均存在劑量依賴性,二者聯(lián)合誘導(dǎo)可明顯提高各自單獨誘導(dǎo)TH細胞的陽性率。 

【文章來源】：中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志. 2014,31(07)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 動物
    1.2 試劑
    1.3 神經(jīng)干細胞的體外分離及原代培養(yǎng)
    1.4 神經(jīng)干細胞的鑒定
    1.5 NSC的誘導(dǎo)分化
    1.6 免疫細胞化學(xué)染色
    1.7 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 孕14~16 d Wistar大鼠無血清培養(yǎng)
    2.2 Nestin鑒定
    2.3 Brdu鑒定
    2.4 神經(jīng)干細胞向多巴胺能神經(jīng)元分化的鑒定
        2.4.1 血清分化組
        2.4.2 實驗組A (不同劑量組GDNF誘導(dǎo)神經(jīng)干細胞分化)
        2.4.3 實驗組B (不同劑量組dbc AMP誘導(dǎo)神經(jīng)干細胞分化)
        2.4.4 實驗組C (GDNF20μg/L聯(lián)合db-c AMP200μmol/L誘導(dǎo)分化)
3 討論
    3.1 NSCs定向分化中多巴胺能相關(guān)誘導(dǎo)劑應(yīng)用機制的探討
    3.2 GDNF和dbc AMP在NSCs向多巴胺能神經(jīng)元定向分化中的誘導(dǎo)效應(yīng)及有效劑量的探討
    3.3 NSCs向多巴胺能定向分化研究應(yīng)用于臨床存在的問題
    3.4 神經(jīng)干細胞移植治療PD的展望


【參考文獻】：
期刊論文
[1]EGF和FGF-2促神經(jīng)干細胞增殖與分化研究[J]. 張文治,蘇心,秦進喜,孔繁明,王新平,只達石.  現(xiàn)代神經(jīng)疾病雜志. 2002(06)
[2]神經(jīng)營養(yǎng)因子家族及其受體的研究進展[J]. 郭雨霽,李盛芳.  神經(jīng)解剖學(xué)雜志. 2001(03)



本文編號：3179627