miR-132在氧糖剝奪誘導(dǎo)原代皮質(zhì)神經(jīng)元缺血損傷中的作用
發(fā)布時間:2021-04-26 07:04
目的探討miR-132在氧糖剝奪誘導(dǎo)原代皮質(zhì)神經(jīng)元缺血損傷中的作用。方法體外培養(yǎng)原代皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞,構(gòu)建氧糖剝奪(OGD/R)模型模擬缺血再灌注損傷。細(xì)胞隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham)、OGD組、慢病毒對照組(LV-control)、miR-132低表達(dá)組(LV-anti-miR-132)、miR-132過表達(dá)組(LV-miR-132)。采用CCK-8、real-time PCR、Western blot等技術(shù)研究miR-132對OGD損傷原代皮質(zhì)神經(jīng)元的影響和機(jī)制。結(jié)果 miR-132在OGD誘導(dǎo)的缺血損傷模型中表達(dá)水平明顯降低(P <0.05);在OGD誘導(dǎo)原代皮質(zhì)神經(jīng)元缺血損傷過程中,降低miR-132的表達(dá),會加劇OGD損傷明顯減少細(xì)胞活力;增加miR-132表達(dá)水平,會減輕OGD損傷提升細(xì)胞存活率。Western blot結(jié)果顯示,過表達(dá)miR-132會上調(diào)突觸相關(guān)蛋白Synapsin-1、PSD95蛋白表達(dá)水平。結(jié)論過表達(dá)miR-132通過上調(diào)突觸相關(guān)蛋白Synapsin-1、PSD95的表達(dá)水平改善OGD誘導(dǎo)的缺血損傷,提高原代皮質(zhì)神經(jīng)元的存活率。
【文章來源】:中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志. 2020,37(08)
【文章頁數(shù)】:4 頁
【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 材料和試劑
1.2 原代大鼠皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)
1.3 皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞氧糖剝奪再灌注損傷模型的建立
1.4 實驗分組和皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染
1.5 皮質(zhì)神經(jīng)元存活率的檢測
1.6 Real-time PCR檢測各組miR-132的表達(dá)
1.7 Western blot檢測蛋白表達(dá)
1.8 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 OGD處理后各組神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)miR-132表達(dá)水平的檢測
2.2 miR-132表達(dá)水平對OGD處理后神經(jīng)元細(xì)胞活性的影響
2.3 miR-132表達(dá)水平對OGD處理后神經(jīng)元細(xì)胞突觸相關(guān)蛋白的影響
3 討論
本文編號:3160970
【文章來源】:中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志. 2020,37(08)
【文章頁數(shù)】:4 頁
【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 材料和試劑
1.2 原代大鼠皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)
1.3 皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞氧糖剝奪再灌注損傷模型的建立
1.4 實驗分組和皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染
1.5 皮質(zhì)神經(jīng)元存活率的檢測
1.6 Real-time PCR檢測各組miR-132的表達(dá)
1.7 Western blot檢測蛋白表達(dá)
1.8 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 OGD處理后各組神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)miR-132表達(dá)水平的檢測
2.2 miR-132表達(dá)水平對OGD處理后神經(jīng)元細(xì)胞活性的影響
2.3 miR-132表達(dá)水平對OGD處理后神經(jīng)元細(xì)胞突觸相關(guān)蛋白的影響
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