目的:人類中樞神經(jīng)系統(tǒng)中80%的惡性原發(fā)腫瘤是腦膠質(zhì)瘤,其預(yù)后極差。膠質(zhì)瘤作為一種血管生成實體瘤,其惡性進展依賴于腫瘤組織中血管的生成。盡管臨床上膠質(zhì)瘤的抗血管生成治療取得了一些進展,但效果仍不理想。限制抗血管生成療效的原因之一與膠質(zhì)瘤細胞的血管生成擬態(tài)（vasculogenic mimicry,VM）的生成相關(guān)。上游開放閱讀框（upstream open reading frames,uORFs）,常見于真核生物基因的5′UTR,在翻譯起始中發(fā)揮重要作用。研究發(fā)現(xiàn),人類44%-49%的基因中存在uORFs,一些基因中的uORF會激活無意義密碼子介導(dǎo)RNA降解（Nonsense-mediated RNA Decay,NMD）,進而促進該基因的降解。鋅帶蛋白基因反義核糖核酸（zinc ribbon domain-containing 1 antisense RNA 1,ZNRD1-AS1）位于6p22.1號染色體上。有證據(jù)表明,ZNRD1-AS1在肺癌組織中高表達,并且ZNRD1-AS1和其功能性Cis-eQTL促進肺癌的發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn)ZNRD1-AS1的5′UTR存在編碼144個氨基酸... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

ZNRD1-AS1的表達及其對膠質(zhì)瘤細胞生物學(xué)行為的影響

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文10標準差表示(n=3)。與NHA組比較，**P<0.01。(C)CCK-8法檢測ZNRD1-AS1對U87和U251細胞增殖的影響。(D)Transwell法檢測ZNRD1-AS1對U87和U251細胞的細胞遷移和侵襲的影響。標度條代表20μm。(E)三維管形成實驗檢測ZNRD1-AS1對U87和U251細胞的VM的影響。標度條代表50μm。數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示(n=3)。與ZNRD1-AS1(-)NC組比較，**P<0.01。3.2144aa-uORF在腦膠質(zhì)瘤中低表達，抑制膠質(zhì)瘤細胞VM形成應(yīng)用westernblot檢測，與NBTs組和NHA組相比，144aa-uORF在腦膠質(zhì)瘤組織及細胞中低表達(圖2a,b)。進一步構(gòu)建穩(wěn)定轉(zhuǎn)染144aa-uORF過表達的U87和U251細胞系，檢測其對膠質(zhì)瘤細胞生物學(xué)行為的作用。研究結(jié)果顯示，與144aa-uORF(+)NC組相比，144aa-uORF(+)組均顯著抑制了U87和U251細胞的增殖、遷移、侵襲及VM形成能力(圖2c-e)。圖2.144aa-uORF的表達及其對膠質(zhì)瘤細胞生物學(xué)行為的影響(A)144aa-uORF在NBTs、LGGs和HGGs中的表達水平。數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示(n=12)。與NBTs組比較，**P<0.01。(B)144aa-uORF在NHA、U87和U251細胞中的表達水平。數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示(n=3)。與NHA組比較，**P<0.01。(C)CCK-8法檢測ZNRD1-AS1對U87和U251細胞增殖的影響。(D)Transwell法檢測144aa-uORF對U87和U251細胞的細胞遷移和侵襲的影響。標度條代表20μm。(E)三維管形成實驗檢測144aa-uORF對U87和U251細

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文12圖3.144aa-uORF通過NMD途徑降低ZNRD1-AS1穩(wěn)定性，抑制膠質(zhì)瘤細胞的惡性行為(A)Westernblots法檢測144aa-uORF的轉(zhuǎn)染效率。數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示(n=3)。與144aa-uORF(+)NC組比較，**P<0.01。(B)qRT-PCR分析144aa-uORF調(diào)節(jié)U87和U251細胞中ZNRD1-AS1的表達。數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示(n=3)。與144aa-uORF(+)NC組比較，**P<0.01。(C)RNA-IP證實了UPF1和ZNRD1-AS1之間的結(jié)合作用。通過qRT-PCR測量相對富集。數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示(n=3)。與抗正常IgG組比較，*P<0.05。(D)用Westernblot檢測

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Elf-1和survivin在非小細胞肺癌組織中的表達及其與腫瘤微血管生成的相關(guān)性研究[J]. 楊東霞,李乃娥,馬云,韓艷春,時彥.  癌癥. 2010(04)
[2]膠質(zhì)瘤中hTERT、maspin和bFGF表達的相關(guān)性及意義[J]. 王東林,王艷芬,施公勝,黃華.  癌癥. 2007(06)



本文編號：3143634