研究目的：1、探討谷氨酸誘導神經(jīng)元損傷的機制；2、探討羥基紅花黃色素A（HSYA）對谷氨酸誘導損傷神經(jīng)元PPARy的表達及活性的研究,并進一步研究羥基紅花黃色素A對PPARy活性的影響機制,為羥基紅花黃素素A防治谷氨酸神經(jīng)損傷提供一定的理論基礎。實驗方法：以體外原代培養(yǎng)的Sprague Dawley雌性大鼠（孕17-20d）大腦皮層神經(jīng)元作為實驗材料,體外培養(yǎng)7天后,進行實驗。1、細胞形態(tài)觀察：于倒置相差顯微鏡下觀察各組細胞形態(tài),并采集各組細胞形態(tài)的圖像。2、免疫熒光染色法（MAP2）對體外培養(yǎng)的神經(jīng)元進行純度鑒定。3、MTT比色法檢測細胞活性。4、Western blot法檢測不同組別細胞內(nèi)PPARγ、 p-PPARy、p-MAPK的表達水平,并對PPARy的胞漿蛋白和胞核蛋白水平進行檢測。5、免疫熒光染色法對不同組別細胞內(nèi)PPARy, p-PPARy、p-MAPK的表達水平和亞細胞定位進行檢測。實驗結果：1、細胞形態(tài)觀察：正常神經(jīng)元經(jīng)體外培養(yǎng)第7天時形態(tài)飽滿,突起豐富,相互交織成網(wǎng)絡。不同濃度谷氨酸可使大部分神經(jīng)元腫脹變圓,細胞突起變短或消失,胞體立體感差,并可見大量細胞碎片。HS... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、HSYA對谷氨酸損傷神經(jīng)元PPARγ的表達及活性的研究
    1.1 對象和方法
        1.1.1 實驗動物
        1.1.2 主要儀器設備
        1.1.3 主要試劑及耗材
        1.1.4 主要溶液及配方
        1.1.5 實驗方法
        1.1.6 統(tǒng)計學處理
    1.2 結果
        1.2.1 胎鼠大腦皮質神經(jīng)元純度鑒定
        1.2.2 形態(tài)學觀察
        1.2.3 MTT法測定神經(jīng)元細胞相對存活率
        1.2.4 Westen blotting法檢測蛋白表達水平
        1.2.5 免疫熒光染色法檢測表達水平和亞細胞定位
    1.3 討論
        1.3.1 HSYA簡介
        1.3.2 谷氨酸損傷模型的建立
        1.3.3 PPARγ的神經(jīng)保護作用
二、HSYA對谷氨酸損傷神經(jīng)元p-PPARγ調節(jié)機制的研究
    2.1 對象和方法
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 主要儀器設備
        2.1.3 主要試劑及耗材
        2.1.4 主要溶液及配方
        2.1.5 實驗方法
        2.1.6 統(tǒng)計學處理
    2.2 結果
        2.2.1 胎鼠大腦皮質神經(jīng)元純度鑒定
        2.2.2 Westen blotting法檢測蛋白表達水平
        2.2.3 免疫熒光染色法檢測表達水平和亞細胞定位
    2.3 討論
        2.3.1 MAPK家族
        2.3.2 多種細胞中MAPK/ERK介導的PPARγ磷酸化
結論
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    PPARγ在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的保護作用
    綜述參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3140078