發(fā)布時間：2017-04-17 16:35

  本文關(guān)鍵詞：WD攜帶者基因分型與實驗室指標相關(guān)性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景:肝豆狀核變性(Hepatolenticular Degeneration,HLD),又稱Wilson病(Wilson’s Disease,WD),是一種ATP7B基因突變致病的常染色體隱性遺傳疾病,臨床主要表現(xiàn)為全身性銅異常沉積引起的肝臟、大腦基底節(jié)乃至腎臟、心臟、骨骼等各系統(tǒng)的功能和器質(zhì)性損傷。WD基因具有高度的遺傳特異性,雖然突變位點眾多,但以少數(shù)幾個熱點突變?yōu)橹?且大多為復(fù)合雜合突變,不同國家和地區(qū)的基因突變高頻位點有所差異。研究指出:目前尚未發(fā)現(xiàn)WD攜帶者存在神經(jīng)系統(tǒng)癥狀,但可能存在部分銅代謝異常,包括給予驅(qū)銅藥物后尿銅增高及腦脊液銅稍高于正常健康人群等。推測可能由于WD攜帶者存在ATP7B雜合突變,導(dǎo)致銅代謝過程輕度異常,從而引起體內(nèi)銅輕度積累,即WD攜帶者有亞臨床銅潴留的發(fā)生,但尚未到達出現(xiàn)臨床癥狀的水平。目前已有許多學(xué)者在進行WD基因型---表型方面的研究,而WD攜帶者的基因型與臨床實驗室指標之間的關(guān)系尚未有相關(guān)研究及報道,需進一步研究。目的:通過對WD患者、WD攜帶者(明確診斷為WD患者的父母)及健康對照組行ATP7B基因21個外顯子直接測序,并進行肝功能、肝纖維化及銅生化指標檢測,分析WD攜帶者及患者ATP7B基因突變的特征和差異并分析其與臨床生化指標之間的相關(guān)性和相異性,探討ATP7B基因突變檢查對WD攜帶者與患者的鑒別診斷及WD發(fā)病機制的意義,進一步研究攜帶者和患者的基因型、攜帶基因頻率與臨床表型相關(guān)性。方法:以2013年~2015年在我院住院確診的WD患者的父親或(和)母親為實驗組,WD患者及普通健康人分別為對照組,留取外周血樣本,并記錄其姓名、性別、年齡、病程、首發(fā)癥狀等臨床資料,留取并檢測入組者肝功能、銅生化、肝纖維化指標,收集并提取基因標本,應(yīng)用DNA測序方法對上述三組進行ATP7B基因突變檢測,并統(tǒng)計基因突變情況,采用統(tǒng)計軟件分析高頻突變位點與年齡、性別及生化指標等臨床表型的相關(guān)性。結(jié)果:1.剔除271例攜帶者組入組檢測后屬復(fù)合雜合及純合突變的23例,余248例中未檢測出致病突變位點共68例,檢測出雜合突變22種共178例(其中4例檢測出意義不明確突變點),染色體突變頻率為35.89%;高頻突變外顯子為8號、13號、11號外顯子,高頻突變位點為2333GT、2975CT及2621CT突變,突變頻率分別是16.73%、7.46%、2.62%。2.240例WD患者對照組檢測出致病突變共36種,其中10例檢測出意義不明確的突變位點,12例未檢測出致病突變,90例僅檢測出一個位點雜合突變,高頻突變外顯子為8號、13號、11號、16號外顯子。3.132例健康對照組檢測出雜合突變共4例。4.WD攜帶者組中檢測出突變位點與未檢測出突變位點者在性別上無明顯差異性;WD攜帶者組中檢測出兩個突變位點與非兩個突變位點者在性別上無明顯差異性;WD攜帶者組中檢測出2333GT突變位點與非2333GT突變位點者在性別上無明顯差異性;WD攜帶者組中檢測出2975CT突變位點與非2975CT突變位點者在性別上無明顯差異性;WD攜帶者組中檢測出2333GT突變位點與2975CT突變位點者在性別上無明顯差異性。5.WD攜帶者組中檢測出2333GT突變、C2975T突變與未檢測出突變位點者肝功能各項指標、銅生化各項指標、肝纖維化各項指標兩兩比較時均無顯著差異性。6.WD攜帶者組中未檢測出突變位點、檢測出一個突變位點與檢測出兩個及以上突變位點者銅藍蛋白指標兩兩比較均無顯著差異性。7.總膽汁酸在WD患者組、攜帶者組與健康人組之間兩兩比較均有顯著差異性;總膽紅素、直接膽紅素、白蛋白在WD患者組與WD攜帶者組之間無顯著差異性,而在健康人組與WD患者組及WD攜帶者組之間均有顯著差異性;谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總蛋白在WD攜帶者組與健康人組之間無顯著差異性,而在WD患者組與攜帶者組及健康人組之間均有顯著差異性。8.血清銅、銅藍蛋白在WD患者組、攜帶者組與健康人組之間兩兩比較均有顯著差異性,銅氧化酶在攜帶者組與健康人組之間無顯著差異性,而在WD患者組與攜帶者組及健康人組之間有均顯著差異性。9.層粘連蛋白、Ⅳ型膠原在WD患者組、攜帶者組與健康人組之間兩兩比較均有顯著差異性,透明質(zhì)酸在WD患者組與攜帶者組之間無顯著差異性,而在健康人組與WD患者組及攜帶者組之間有顯著差異性。結(jié)論:WD患者組與WD攜帶者組主要基因突變位點都位于8號、13號、11號外顯子上;WD攜帶者與WD患者,WD攜帶者與健康人之間肝功能、銅生化、肝纖維化指標存在顯著差異性,此生化指標可考慮作為WD攜帶者診斷、與患者及正常人鑒別診斷輔助標準;攜帶高頻突變基因的WD攜帶者的臨床表型無顯著差異性。
【關(guān)鍵詞】：Wilson 病雜合子 ATP7B 基因 基因突變 基因型 臨床表型
【學(xué)位授予單位】：安徽中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R742.4
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• Abstract9-12
• 中英文縮略詞12-13
• 第一部分 WD中西醫(yī)理論研究13-18
• 第二部分 實驗研究18-66
• 前言18-21
• WD攜帶者及患者、健康人基因突變位點的檢測與分析21-35
• 1.研究方法21-26
• 1.1 研究對象21
• 1.2 主要實驗儀器21-22
• 1.3 主要實驗試劑22-23
• 1.4 實驗方法23-26
• 1.4.1 血液標本留取23
• 1.4.2 標本處理23-26
• 1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及處理26
• 2 實驗結(jié)果26-32
• 2.1 WD攜帶者ATP7B基因突變測序結(jié)果及突變分析26-29
• 2.2 WD患者ATP7B基因突變測序結(jié)果及突變分析29-31
• 2.3 正常人基因測序結(jié)果及突變分析31-32
• 3 討論32-35
• WD攜帶者基因分型與實驗室指標研究35-54
• 1 研究方法35-40
• 1.1 研究對象35
• 1.2 實驗儀器35
• 1.3 實驗試劑35-36
• 1.4 實驗方法36-39
• 1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及處理39-40
• 2 實驗結(jié)果40-49
• 2.1 三組生化指標比較40-44
• 2.1.1 肝功能生化指標比較40-42
• 2.1.2 銅生化指標比較42-43
• 2.1.3 肝纖維化指標比較43-44
• 2.2 WD攜帶者基因突變與生化關(guān)系44-47
• 2.2.1 WD攜帶者基因突變與肝功能的關(guān)系44-45
• 2.2.2 WD攜帶者基因突變與銅生化的關(guān)系45-46
• 2.2.3 WD攜帶者基因突變與肝纖維化的關(guān)系46-47
• 2.3 WD攜帶者基因突變與性別關(guān)系47-48
• 2.4 突變位點數(shù)與銅藍蛋白比較48-49
• 3.討論49-54
• 結(jié)論54-55
• 參考文獻55-66
• 第三部分 綜述66-74
• 參考文獻70-74
• 致謝74-75
• 個人簡介75
• 在讀期間發(fā)表文章75

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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4 程楠;陸兵勛;杜益剛;王訓(xùn);胡紀源;韓詠竹;潘速躍;楊任民;;華中和華東地區(qū)肝豆狀核變性患者ATP7B基因第13號外顯子突變的研究[J];臨床神經(jīng)病學(xué)雜志;2010年01期

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8 程楠;陸兵勛;杜益剛;王訓(xùn);胡紀源;胡文彬;李凱;韓詠竹;潘速躍;楊任民;;中國人Wilson病患者基因高頻突變位點的快速檢測[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;2009年04期

9 劉曉青,張雅芬,劉孜孜,顧學(xué)范,蕭廣仁,鮑克容,俞麗華;肝豆狀核變性基因類型與臨床表型關(guān)系研究[J];中華兒科雜志;2003年01期

10 韓詠竹,王訓(xùn),胡紀原,胡文彬,楊任民;肝豆片治療32例肝豆狀核變性的臨床觀察及其對體液微量元素的影響[J];中醫(yī)藥研究;1998年04期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 萬波;中國漢族人肝豆狀核變性患者的ATP7B突變基因型與臨床表型關(guān)聯(lián)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

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本文編號：313849