[目的]復(fù)制體內(nèi)新生大鼠缺血缺氧性腦損傷（HIBD）模型與體外脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞激活模型,研究血管緊張素系統(tǒng)（ACE、AT1、AT2）、NADPH氧化酶2（NOX2）和沉默信息調(diào)節(jié)蛋白3（SirT3）在HIBD大鼠胼胝體區(qū)及LPS激活的小膠質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)以及天麻素干預(yù)對(duì)AngⅡ-NOX2/SirT3信號(hào)通路的影響,從細(xì)胞、分子和蛋白層面探討天麻素對(duì)激活小膠質(zhì)細(xì)胞的抑制作用及信號(hào)機(jī)制。[方法]將新生1d的SD大鼠頸總動(dòng)脈結(jié)扎后放入缺氧箱（8%02,92%N2）2h,復(fù)制HIBD模型,新生大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、HIBD組和HIBD+天麻素干預(yù)組（100 mg/kg）。將體外培養(yǎng)的BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞隨機(jī)分為對(duì)照組、LPS（1mg/L）組、不同濃度的天麻素（50 mg/L和100 mg/L）+LPS處理組,LPS+阿齊沙坦（10 μM）組和天麻素（50 mg/L）+LPS+阿齊沙坦共同處理組和陽(yáng)性對(duì)照組。采用MTS法檢測(cè)天麻素對(duì)BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞活力的影響。采用免疫熒光雙標(biāo)染色、蛋白質(zhì)印跡分析（Western Blot）方法檢測(cè)體內(nèi)、外激活的小膠質(zhì)細(xì)胞中血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（A... 

【文章來(lái)源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁(yè)數(shù)】：79 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．?ＢＶ－２小膠質(zhì)細(xì)胞活力檢測(cè)：０－１?ｍｇ／ｍｌ濃度的天麻素，培養(yǎng)４?ｈ未見明顯的??亡

表５各組ＢＶ－２小膠質(zhì)細(xì)胞ｉＮＯＳ和ＴＮＦ－ａ光密度值變化（Ｚ?土?ｓ?）??Ｔａｂｌｅ?５?Ｔｈｅ?ｏｐｔｉｃａｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ?ｏｆ?ｉＮＯＳ?ａｎｄ?ＴＮＦ－ａ?ｉｎ?ｅａｃｈ?ｇｒｏｕｐ?ｏｆ?ＢＶ－２?ｍｉｃｒｏｇｌｉａ??（Ｊ?±?■？）??組別?ｉＮＯＳ?ＴＮＦ－ａ??正常對(duì)照組?０．０５±０．０９?０．０１±０．０１??ＬＰＳ?組?０．９Ｕ０．０５＊?０．７６士０．０４＊??５０ｍｇ／Ｌ?天麻素組?０．６７±０．０６＃?０．５３士０．１０＃??ｌＯＯｍｇ／Ｌ?天麻素組?０．６５±０．０３＃?０．５６±０．０７＃??＊表示與正常對(duì)照組相比較有明顯差異，；？＜０．０５；?＃表示與ＬＰＳ組比較有明顯差??異，／？＜０．０５〇??＊Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ，／？＜０．０５；?＃Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ??ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ＬＰＳ?ｇｒｏｕｐ，／？＜０．０５．??

實(shí)驗(yàn)通過Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ與免疫熒光雙標(biāo)染色共同檢測(cè)了正常對(duì)照組、ＬＰＳ組??與５０ｍｇ／Ｌ和１００ｍｇ／Ｌ兩個(gè)天麻素干預(yù)組的ＢＶ－２小膠質(zhì)細(xì)胞中ＡＣＥ、Ａ１與??ＮＯＸ２蛋白的表達(dá)水平（見表６，圖４、圖５、圖６）。免疫焚光雙標(biāo)染色結(jié)果顯??示：在正常對(duì)照組中，小膠質(zhì)細(xì)胞（綠色）與ＡＣＥ、ＡＴ＾?ＮＯＸ２?（紅色）僅有??少量共表達(dá)；ＬＰＳ組的小膠質(zhì)細(xì)胞（綠色）與ＡＣＥ、ＡＴ＾?ＮＯＸ２?（紅色）共表??達(dá)較對(duì)照組明顯增強(qiáng)；在５〇１？§＾和１００ｍｇ／Ｌ兩個(gè)天麻素干預(yù)組，ＡＣＥ、ＡＴＶ??ＮＯＸ２?（紅色）熒光強(qiáng)度較ＬＰＳ組減弱，與小膠質(zhì)細(xì)胞（綠色）的共表達(dá)減少，??兩個(gè)天麻素組之間無(wú)明顯差異。Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ結(jié)果顯示：與正常對(duì)照組相比，ＬＰＳ??組中ＡＣＥ、八＾和ＮＯＸ２的ＯＤ值明顯增加（ｐ＜０．０５），而在兩個(gè)天麻素干預(yù)??組，ＡＣＥ、ＡＴ！和ＮＯＸ２的ＯＤ值相較于ＬＰＳ組有顯著的降低（／？＜０．０５）。兩??個(gè)天麻素干預(yù)組間無(wú)明顯差異。??表６各組ＢＶ－２小膠質(zhì)細(xì)胞ＡＣＥ、ＡＴ！和ＮＯＸ２光密度值變化（Ｚ?±?ｓ?）??Ｔａｂｌｅ?６?Ｔｈｅ?ｏｐｔｉｃａｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ?ｏｆ?ＡＣＥ


本文編號(hào)：3112328