γ-氨基丁酸A受體激動劑對新生大鼠海馬神經(jīng)元癲癇樣放電的影響
發(fā)布時間:2017-04-16 08:11
本文關(guān)鍵詞:γ-氨基丁酸A受體激動劑對新生大鼠海馬神經(jīng)元癲癇樣放電的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:通過新生大鼠海馬神經(jīng)元體外癲癇樣放電模型,探討γ-氨基丁酸A受體(GABAa受體)激動劑(氯硝西泮、蠅蕈醇、異孕烷醇酮)對發(fā)育期海馬神經(jīng)元癲癇樣放電的影響。評估γ-氨基丁酸(GABA)能神經(jīng)元在中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)發(fā)育早期介導(dǎo)的作用。方法:采用出生24小時內(nèi)新生SD大鼠,取海馬組織,通過胰酶消化,吸管吹打法制備海馬神經(jīng)元,置于培養(yǎng)箱中(37℃、5%CO2、95%O2、飽和濕度)培養(yǎng)至第9天。用“無鎂細(xì)胞外液”孵育3小時,建立體外癲癇樣放電模型,選擇表面光滑、輪廓清楚、活性良好的神經(jīng)元用于全細(xì)胞膜片鉗記錄。在形成高阻封接并破膜后,轉(zhuǎn)換到電流鉗模式下分別記錄以上三種GABAa受體激動劑對新生大鼠海馬神經(jīng)元癲癇樣放電的作用。結(jié)果:1、新生大鼠海馬神經(jīng)元癲癇樣放電模型的建立:新生大鼠海馬神經(jīng)元培養(yǎng)至第9天,外形飽滿,突起密集清晰并交織成密集的網(wǎng)絡(luò)。海馬神經(jīng)元在無鎂細(xì)胞外液中孵育3小時后,神經(jīng)元興奮性明顯增加,出現(xiàn)自發(fā)的反復(fù)癲癇樣放電。放電頻率5-20Hz,幅度45-60Mv范圍,恢復(fù)正常細(xì)胞外液后能持續(xù)穩(wěn)定的放電。神經(jīng)元癲癇樣放電模型建立成功。2、GABAa受體激動劑的干預(yù)結(jié)果:(1)氯硝西泮干預(yù):在新生大鼠海馬神經(jīng)元癲癇樣放電模型中,氯硝西泮干預(yù)后與干預(yù)前相比,神經(jīng)元癲癇樣放電頻率及放電幅度未見明顯變化(p0.05)。(2)蠅蕈醇干預(yù):蠅蕈醇干預(yù)后,神經(jīng)元癲癇樣放電的頻率及放電幅度較干預(yù)前明顯下降(p0.001)。(3)異孕烷醇酮干預(yù):異孕烷醇酮干預(yù)后神經(jīng)元癲癇樣放電的頻率及放電幅度較干預(yù)前明顯下降(p0.001)。結(jié)論:(1)無鎂細(xì)胞外液可以誘導(dǎo)新生大鼠海馬神經(jīng)元自發(fā)的反復(fù)癲癇樣放電,建立穩(wěn)定的癲癇樣放電模型。(2)GABAa受體激動劑未加劇新生大鼠海馬神經(jīng)元癲癇樣放電而是依然介導(dǎo)抑制作用。(3)氯硝西泮對新生大鼠海馬神經(jīng)元癲癇樣放電未見明顯的抑制作用,可能與未成熟腦相關(guān)受體表達(dá)不全、神經(jīng)元持續(xù)自發(fā)放電GABA消耗殆盡及無鎂細(xì)胞外液孵育降低GABA能神經(jīng)元傳導(dǎo)有關(guān)。(4)蠅蕈醇、異孕烷醇酮可以明顯地抑制新生大鼠海馬神經(jīng)元的癲癇樣放電,提示神經(jīng)類固醇和其他GABA類似物在神經(jīng)發(fā)育階段對癲癇有一定的治療作用。
【關(guān)鍵詞】:新生大鼠 海馬神經(jīng)元 原代培養(yǎng) 膜片鉗 癲癇樣放電
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R742.1
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-9
- 前言9-11
- 實驗流程圖11-12
- 第一部分 新生大鼠海馬神經(jīng)元原代培養(yǎng)及新生大鼠海馬神經(jīng)元癲癇樣放電模型的建立12-18
- 一、新生大鼠海馬神經(jīng)元原代培養(yǎng)12-14
- 二、新生大鼠海馬神經(jīng)元癲癇樣放電模型的建立14-17
- 小結(jié)17-18
- 第二部分 GABAA受體激動劑對新生大鼠海馬神經(jīng)元癲癇樣放電的影響18-24
- 實驗材料18-19
- 實驗方法19-20
- 數(shù)據(jù)整理和統(tǒng)計學(xué)分析20
- 結(jié)果20-23
- 小結(jié)23-24
- 討論24-29
- 結(jié)論29-30
- 參考文獻(xiàn)30-34
- 綜述34-41
- 參考文獻(xiàn)39-41
- 中英文對照縮略詞表41-42
- 研究生期間發(fā)表的文章42-43
- 致謝43-44
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 湯繼宏;朱玉霞;張兵兵;李巖;馮星;;新生期大鼠反復(fù)驚厥后海馬區(qū)γ-氨基丁酸A受體α1和γ2亞單位表達(dá)的改變及其意義[J];臨床神經(jīng)病學(xué)雜志;2014年05期
本文關(guān)鍵詞:γ-氨基丁酸A受體激動劑對新生大鼠海馬神經(jīng)元癲癇樣放電的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
,本文編號:310382
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