本文關(guān)鍵詞：血脂康對實(shí)驗(yàn)性自身免疫性神經(jīng)炎的治療潛能，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景及目的格林巴利綜合征(Guillain-Barre syndrome, GBS),又稱急性炎癥性脫髓鞘性多發(fā)性神經(jīng)病,是常見的脊神經(jīng)和周圍神經(jīng)的脫髓鞘疾病,是一種神經(jīng)系統(tǒng)自身免疫性疾病,其發(fā)病機(jī)制為分子模擬理論,即外源性感染因子上存在與正常組織成分結(jié)構(gòu)相同或相近的共同抗原表位,抗感染免疫去除感染因子的同時產(chǎn)生自身抗體,損害神經(jīng)組織。實(shí)驗(yàn)性自身免疫性神經(jīng)炎(Experimental autoimmune neuritis, EAN)是一種主要由CD4+T細(xì)胞介導(dǎo)的,累及外周神經(jīng)系統(tǒng)(peripheral nervous system, PNS)的急性炎癥性脫髓鞘性疾病,其在發(fā)病機(jī)制、臨床表現(xiàn)、神經(jīng)病理學(xué)改變及電生理等諸多方面,同人類GBS極為相似,因此已被國際上公認(rèn)為研究GBS的理想動物模型。應(yīng)用周圍神經(jīng)髓鞘蛋白或其組成成分P2或PO蛋白或其肽與完全弗氏佐劑共同免疫敏感動物可成功誘導(dǎo)EAN模型。體液免疫和細(xì)胞免疫均參與其發(fā)病機(jī)制。血脂康膠囊是由特制紅曲發(fā)酵而成,含13種天然莫納可林(Monaco lin),為他汀同系物,發(fā)揮調(diào)脂作用。其主要成分為洛伐他汀,還含有多種不飽和脂肪酸以及必需氨基酸,但其對HMG-CoA還原酶活性的抑制優(yōu)于洛伐他汀。他汀類藥物是3-羥基-3甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶的抑制劑,通過阻斷甲羥戊酸途徑抑制膽固醇的合成,臨床上主要用于降低低密度脂蛋白。目前越來越多的研究集中于他汀類藥物與自身免疫病間的關(guān)系,如多發(fā)性硬化和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)阿托伐他汀通過抑制Thl和Th17免疫反應(yīng),下調(diào)細(xì)胞表面共刺激分子表達(dá)并上調(diào)淋巴結(jié)單個核細(xì)胞中Treg細(xì)胞的比例從而緩解了EAN病情。而阿托伐他汀修飾的樹突狀細(xì)胞疫苗可以誘導(dǎo)重癥肌無力大鼠免疫耐受,其機(jī)制包括增加了CD4+CD25+Treg的比例及Foxp3的表達(dá)、抑制淋巴細(xì)胞增生、誘導(dǎo)T細(xì)胞分泌的Th1/Th17型細(xì)胞因子向Th2型細(xì)胞因子轉(zhuǎn)化以及減弱血清中抗R97-116肽IgG抗體的產(chǎn)生。然而血脂康作為傳統(tǒng)降脂中藥,其所含成分雖含他汀卻又與他汀類藥物不盡相同。本研究通過構(gòu)造實(shí)驗(yàn)性自身免疫性神經(jīng)炎動物模型,闡明血脂康誘導(dǎo)EAN免疫耐受的機(jī)制,為臨床應(yīng)用血脂康治療GBS提供實(shí)驗(yàn)和理論基礎(chǔ)。材料與實(shí)驗(yàn)方法：1.1材料1.1.1實(shí)驗(yàn)動物：雌性Lewis大鼠,6-8周齡,體質(zhì)量155～185 g。1.1.2主要試劑：抗原為周圍髓鞘蛋白(P0)抗原180～199肽段。1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1 EAN模型的誘導(dǎo)及臨床評分于每只大鼠雙后足墊皮下給予200μL抗原乳液(含200μgP0180-199肽,1.5mg H37Ra結(jié)核桿菌,不完全弗氏佐劑),每側(cè)100μL,免疫當(dāng)天記為第0天。采用雙盲評估法,自免疫當(dāng)天開始每天評測大鼠臨床癥狀并記錄體質(zhì)量,至免疫后第16天(臨床癥狀達(dá)高峰時)。臨床評分標(biāo)準(zhǔn)為0級：正常；1級：尾部無力；2級：輕度后肢癱瘓；3級：中度后肢癱瘓；4級：重度后肢癱瘓5級：四肢癱。以每個時間點(diǎn)的平均數(shù)表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1.2.2血脂康治療EAN15只大鼠隨機(jī)分為對照組、小劑量治療組(200 mg/kg/day)和大劑量治療組(1000 mg/kg/day)。自免疫后第五天開始每天給予血脂康灌胃治療,直至免疫后第16天。對照組給予等體積的0.9%生理鹽水灌胃處理。1.2.3淋巴結(jié)單個核細(xì)胞懸液的制備免疫后第16天麻醉大鼠,無菌條件下取雙側(cè)腹股溝淋巴結(jié)制備淋巴結(jié)單個核細(xì)胞懸液。用完全培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞密度為2×106個/mL。1.2.4胞內(nèi)細(xì)胞因子流式檢測取淋巴結(jié)單個核細(xì)胞懸液,分別加入PE標(biāo)記的抗大鼠IL-10和TNF-α及FITC標(biāo)記的IL-17A和IFN-γ抗體,避光,于4℃環(huán)境下孵育30 min后重懸上機(jī)檢測。1.2.5流式檢測Treg細(xì)胞情況取淋巴結(jié)單個核細(xì)胞懸液,加入FITC標(biāo)記的CD4抗體和PE標(biāo)記的CD25抗體,4℃下孵育30 min。洗滌后加入固定/破膜工作液并混勻,4℃下避光孵育過夜。洗滌細(xì)胞后加入PE-Cy5標(biāo)記的Foxp3抗體,4℃孵育30 min。細(xì)胞重懸過濾后上機(jī)檢測。1.3統(tǒng)計學(xué)處理采用spss 22.0統(tǒng)計軟件分析,結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,應(yīng)用單因素方差分析(one-factor analysis of variance, ANOVA)比較3組標(biāo)本的組間差異,p0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果：1血脂康治療組臨床評分降低2血脂康抑制了細(xì)胞因子TNF-α、IL-10和IL-17的分泌3血脂康下調(diào)了淋巴結(jié)單個核細(xì)胞中CD4+CD25+T細(xì)胞和CD4+Foxp3+T細(xì)胞比例結(jié)論：血脂康通過抑制了細(xì)胞因子TNF-α、IL-10和IL-17的產(chǎn)生及CD4+T細(xì)胞向Treg分化,緩解了EAN大鼠病情。
【關(guān)鍵詞】：血脂康 格林巴利綜合征 實(shí)驗(yàn)性自身免疫性神經(jīng)炎 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞 細(xì)胞因子
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R745.43
【目錄】：

• 中文摘要6-10
• ABSTRACT10-14
• 符號說明14-16
• 前言16-17
• 材料與方法17-22
• 結(jié)果22-23
• 討論23-37
• 結(jié)論37-38
• 附圖38-42
• 參考文獻(xiàn)42-53
• 致謝53-54
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄54-55
• 學(xué)位論文評閱及答辯情況表55

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王慧力;唐長華;王芳;;血脂康不良反應(yīng)[J];中國誤診學(xué)雜志;2010年06期

  本文關(guān)鍵詞：血脂康對實(shí)驗(yàn)性自身免疫性神經(jīng)炎的治療潛能，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：309444