目的：建立大鼠2-VO法腦缺血模型，探討急性缺血性腦損傷中單磷酸腺苷活化蛋白激酶（AMP-activated potein kinase，AMPK）、哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）表達的時向變化及其與神經(jīng)缺陷評分（NDS）的相關(guān)性。方法：選取健康清潔級雌性SD大鼠24只，隨機分為假手術(shù)組（A組）、腦缺血4小時組（B組）、腦缺血8小時組（C組）、腦缺血24小時組（D組），每組6只大鼠。參照大鼠2-VO法并改良，建立大腦急性缺血模型，A組麻醉后僅手術(shù)暴露雙側(cè)頸總動脈并游離出迷走交感神經(jīng)鏈，不做雙側(cè)動脈結(jié)扎和離斷，縫合切口待蘇醒后參照改良的神經(jīng)功能缺陷評分（NDS）法從意識、基本反射、感覺、運動、行為等方面進行評分，之后斷頭處死取雙側(cè)海馬；B、C、D組均麻醉后實施手術(shù)暴露雙側(cè)頸總動脈，游離出雙側(cè)迷走交感神經(jīng)鏈，結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈近心端與離心端，并于結(jié)扎段中點剪斷頸總動脈，分別于術(shù)后4h（B組）、8h（C組）、24h（D組）斷頭處死后取雙側(cè)海馬組織，各組處死前15min均先進行NDS評分；所有大鼠模型采用左側(cè)海馬行Western B... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

大鼠海馬組織光鏡下圖像

ene 方差齊性檢驗得，P=0.024＜0.05，示四個總體的方差分析。與假手術(shù)組（A 組）相比，缺血 4 小時（B 組））的 NDS 評分均下降，且其值隨時間點逐漸增高，差異＜0.01）；缺血 24 小時（D 組）的 NDS 評分最高，與假沒有統(tǒng)計學(xué)意義（p＞0.05）；見表 3.2 及圖 3.2。3.2 各組大鼠神經(jīng)功能缺損評分（NDS）結(jié)果的比較( x s)*（分Table 3.2 Comparison of NDS in each group( x s)（score）例數(shù) x±s（分）6 77.67±2.0666646.67±10.33**61.00±3.79**70.50±5.61比, **P＜0.01, *P＜0.05＜0.01, *P＜0.05, versus group A

圖3.3 western blot檢測各組p-AMPK/AMPK、p-mTOR/mTOR的蛋白表達變化 與A組相比**p＜0.01、*p＜0.05Fig3.3 The expression of p-AMPK/AMPK and p-mTOR / mTOR proteins in different groups bywestern blot **p＜0.01、*p＜0.05，versus group A3.4 p-S6K1、p-4EBP1 在各時間點的表達情況參照 FARHAT 等人的實驗[22]，采用 p-S6K1/β-actin 及 p-4EBP1/β-actin 來說明 mTOR 下游兩條通路的表達情況。具體見表 3.4.1 及圖 3.4.1。實驗結(jié)果顯示：在腦組織缺血后 p-s6k1 的表達明顯減弱，B 組最低，與 A 組相比差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01），隨缺血時間延長 B、C、D 組呈遞增趨勢，B、C 組與A 組相比，差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.01）D 組最高，與 A 組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（p＞0.05）；p4E-BP1 的表達在腦缺血后各組較 A 組均明顯減弱，但隨缺血時間延長而逐漸增強，D 組最高，差異均具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01）。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]AMPK在胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的作用[J]. 黃德強,羅凌玉,王麗麗,羅時文,呂農(nóng)華,羅志軍.  中國細胞生物學(xué)學(xué)報. 2011(11)
[2]細胞周期抑制劑對局灶性缺血缺氧性腦損傷后神經(jīng)細胞凋亡的影響[J]. 張貴斌,徐運蘭,王偉,謝敏杰.  中華急診醫(yī)學(xué)雜志. 2006(01)
[3]興奮性氨基酸與腦梗死關(guān)系的臨床研究[J]. 盛寶英,喬香蘭,王明禮.  中國急救醫(yī)學(xué). 2001(12)



本文編號：3070463