本文關(guān)鍵詞：電刺激對(duì)HCN通道特性影響的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：自從HCN通道被發(fā)現(xiàn)后,它的超極化激活特性立即引起了科學(xué)研究者的重視。HCN通道參與了許多神經(jīng)活動(dòng),包括參與調(diào)節(jié)神經(jīng)元活動(dòng)的節(jié)律性和樹突整合,調(diào)控細(xì)胞靜息膜電位及突觸傳遞等等。近年來許多研究者將突觸上的NMDA和GABAA受體以及突觸外的氨基酸能遞質(zhì)受體作為參與癲癇疾病的發(fā)作機(jī)制進(jìn)行研究,探索HCN通道在癲癇疾病中的作用。同時(shí),也有一些研究表明HCN通道的調(diào)節(jié)異常可能與許多神經(jīng)系統(tǒng)疾病有關(guān),例如癲癇、神經(jīng)病理性疼痛、帕金森綜合癥等等。為了研究癲癇疾病中癲癇樣放電對(duì)HCN通道特性的影響,我們通過電刺激實(shí)驗(yàn),模擬癲癇樣放電,從通道蛋白的分布情況、通道特性及分子機(jī)制方面進(jìn)行研究。研究中,我們利用免疫熒光技術(shù)主要研究電刺激對(duì)新生鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞中HCN通道分布情況的影響,利用細(xì)胞膜片鉗技術(shù)研究反復(fù)電刺激對(duì)HCN單通道開放頻率的影響,并利用ELISA試劑盒研究電刺激對(duì)大腦皮層中cAMP含量的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示反復(fù)電刺激后HCN4通道在神經(jīng)元細(xì)胞胞體和樹突上分布情況發(fā)生變化,同時(shí)反復(fù)電刺激使得HCN單通道開放概率的增加。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)這些變化很可能是由于受到cAMP的影響所導(dǎo)致的,表現(xiàn)為電刺激后大腦皮層中cAMP的含量增加,并且在電刺激后抑制cAMP的生成會(huì)使得HCN單通道的開放概率降低。上述結(jié)果說明電刺激(模擬癲癇樣放電)能夠影響神經(jīng)信號(hào)的傳導(dǎo)速度,表現(xiàn)為神經(jīng)元細(xì)胞膜上HCN通道的分布情況發(fā)生顯著性變化,同時(shí)可以增加組織中cAMP的含量。反復(fù)的電刺激還會(huì)誘導(dǎo)通道激活,增加HCN單通道的開放概率。在傳導(dǎo)速度和通道特性雙重機(jī)制的影響下,誘導(dǎo)大量神經(jīng)元參與產(chǎn)生超同步化放電,而癲癇樣放電中這種超同步化現(xiàn)象是癲癇疾病的一種發(fā)作機(jī)制。我們通過電刺激實(shí)驗(yàn),模擬癲癇樣放電的過程,所得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不僅能夠揭示電刺激對(duì)HCN通道分布及開放概率的影響,而且有助于解釋癲癇疾病中癲癇樣放電的發(fā)生機(jī)制。
【關(guān)鍵詞】：HCN通道 癲癇樣放電 電刺激 環(huán)核苷酸腺苷
【學(xué)位授予單位】：中南民族大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R741
【目錄】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-10
• 第一章 緒論10-21
• 1.1 HCN通道的結(jié)構(gòu)10-11
• 1.2 HCN通道在神經(jīng)系統(tǒng)中的分布11
• 1.3 谷氨酸對(duì)HCN通道的影響11-12
• 1.4 HCN通道的研究進(jìn)展12-14
• 1.5 HCN通道與癲癇14-15
• 1.6 膜片鉗技術(shù)15-18
• 1.6.1 膜片鉗技術(shù)原理16-17
• 1.6.2 膜片鉗技術(shù)的應(yīng)用17-18
• 1.7 免疫熒光技術(shù)18-20
• 1.7.1 免疫熒光技術(shù)的原理18-19
• 1.7.2 免疫熒光技術(shù)的應(yīng)用19-20
• 1.8 本課題研究內(nèi)容20-21
• 第二章 電刺激對(duì)新生鼠海馬神經(jīng)元中HCN通道分布的影響21-29
• 2.1 引言21-22
• 2.2 材料和方法22-26
• 2.2.1 主要試劑22
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器22-23
• 2.2.3 試劑配制23
• 2.2.4 實(shí)驗(yàn)方法23-26
• 2.2.4.1 新生鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)23-24
• 2.2.4.2 電刺激實(shí)驗(yàn)24-25
• 2.2.4.3 免疫熒光染色25
• 2.2.4.4 激光共聚焦成像及分析25-26
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-28
• 2.4 討論28-29
• 第三章 反復(fù)電刺激對(duì)HCN單通道開放頻率的影響29-35
• 3.1 引言29-30
• 3.2 材料和方法30-32
• 3.2.1 主要試劑30
• 3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器30
• 3.2.3 試劑配制30
• 3.2.4 實(shí)驗(yàn)方法30-32
• 3.2.4.1 海馬神經(jīng)元的急性分離30-31
• 3.2.4.2 電生理實(shí)驗(yàn)31-32
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果32-34
• 3.3.1 反復(fù)電刺激增加HCN單通道的開放概率32-33
• 3.3.2 腺苷酸環(huán)化酶抑制劑Bupivacaine（布比卡因）對(duì)HCN單通道單通道開放概率的影響33-34
• 3.4 討論34-35
• 第四章 電刺激對(duì)小鼠大腦皮層中CAMP含量的影響35-40
• 4.1 引言35
• 4.2 材料和方法35-38
• 4.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及試劑35
• 4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器35
• 4.2.3 實(shí)驗(yàn)方法35-38
• 4.2.3.1 電刺激實(shí)驗(yàn)35-36
• 4.2.3.2 ELISA試劑盒測(cè)定大腦皮層組織中cAMP的含量36-38
• 4.2.3.3 數(shù)據(jù)處理38
• 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果38-39
• 4.4 討論39-40
• 結(jié)論40-42
• 參考文獻(xiàn)42-52
• 致謝52-53
• 附錄A 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文53-54
• 附錄B 主要符號(hào)和縮略詞54

  本文關(guān)鍵詞：電刺激對(duì)HCN通道特性影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：306241